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白桦愈伤组织再生系统的体细胞无性系变异研究

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
1 前言第9-22页
   ·白桦简介第9页
   ·桦木组织培养概述第9-10页
   ·植物组织培养中的体细胞无性系变异第10页
   ·体细胞无性系变异的细胞遗传学基础第10-11页
     ·细胞的全能性第10-11页
     ·体细胞无性系变异与愈伤组织和不定芽的关系第11页
     ·体细胞胚胎再生第11页
     ·细胞的异常分裂机制第11页
   ·体细胞无性系的细胞学变异第11-12页
   ·体细胞无性系变异的分子遗传学基础及表现第12-15页
     ·基因突变第12-13页
     ·DNA总量的变化第13页
     ·DNA甲基化变化与体细胞无性系变异第13-14页
     ·植物转座子活化与体细胞无性系变异第14-15页
     ·细胞器 DNA的变化第15页
   ·植物组织培养中无性系变异产生的主要原因第15-16页
     ·外植体来源及预先存在的变异第15-16页
     ·培养基中外源激素第16页
     ·周期性继代、重复再生和离体保存的时间第16页
     ·较高的增殖率第16页
   ·体细胞无性系变异的广泛性和普遍性第16-17页
   ·体细胞无性系变异对植物品种改良的意义第17-18页
   ·体细胞无性系变异的分子检测第18-20页
     ·酶谱分析检测变异第18页
     ·RFLP检测变异第18-19页
     ·RAPD检测变异第19页
     ·AFLP检测变异第19-20页
   ·现存的问题与研究前景第20-21页
   ·本研究目的与意义第21-22页
2 材料和方法第22-32页
   ·实验材料第22-26页
     ·植物愈伤组织及再生植株的诱导材料第22页
     ·再生植株染色体变异的材料第22页
     ·体细胞无性系变异AFLP扩增的材料第22页
     ·化学诱变材料第22-23页
     ·酶及化学试剂第23页
     ·主要仪器设备第23-24页
     ·分析软件第24页
     ·所用溶液及配制第24-26页
   ·实验方法第26-32页
     ·培养条件第26页
     ·愈伤组织诱导及培养第26-27页
     ·愈伤组织的分化第27页
     ·再生植株的壮苗生根第27页
     ·愈伤组织染色体观察方法的研究第27页
     ·愈伤组织及再生植株染色体统计第27页
     ·CTAB法提取DNA第27-28页
     ·限制性内切酶与节头连接第28页
     ·预扩增反应条件第28页
     ·选择性扩增反应条件第28-29页
     ·凝胶分析第29-30页
     ·银染第30-31页
     ·数据统计与分析方法第31页
     ·白桦化学诱变技术的研究第31-32页
3 结果与分析第32-48页
   ·白桦愈伤组织快速繁殖培养基中激素浓度的选择第32-33页
     ·不同BA浓度对叶片愈伤组织诱导率的影响第32页
     ·不同BA浓度诱导的叶片愈伤组织分化情况第32-33页
   ·白桦叶片直接出芽快速繁殖系统的建立第33-34页
   ·愈伤组织再生植株的壮苗生根第34页
   ·白桦愈伤组织染色体观察方法的研究第34-36页
     ·取材时间对愈伤组织制片的影响第34-35页
     ·预处理时间对染色体形态的影响第35-36页
     ·解离条件对染色效果的影响第36页
   ·白桦组织培养过程中的体细胞无性系变异研究第36-43页
     ·不同BA浓度对愈伤组织染色体数目变异的影响第36-37页
     ·不同浓度BA对再生植株染色体数目变异的影响第37页
     ·继代次数对再生植株染色体数目的影响第37-38页
     ·再生植株的AFLP分析第38-43页
   ·白桦愈伤组织化学诱变技术的研究第43-48页
     ·不同EMS浓度及浸泡时间对白桦愈伤组织诱变效果的影响第43-45页
     ·培养基中加入EMS对于白桦愈伤组织诱变效果的影响第45-46页
     ·叶柄和叶片愈伤组织在半致死剂量条件下的染色体变异第46-48页
4 讨论第48-55页
   ·影响愈伤组织诱导和分化的因素第48-49页
     ·外源激素第48页
     ·继代培养时间第48-49页
   ·影响愈伤组织染色体制片的主要因素第49页
   ·影响体细胞无性系变异的主要因素第49-50页
     ·激素水平第49页
     ·继代培养第49-50页
   ·获得高分辨率AFLP凝胶图的几个关键问题第50-52页
     ·DNA模板的质量第50页
     ·限制性内切酶及引物的选择第50-51页
     ·电泳过程中应注意的几个问题第51页
     ·预扩增产物稀释倍数的选择第51页
     ·银染时一些细节的把握第51-52页
   ·愈伤组织与再生植株之间的变异频率比较第52-53页
   ·细胞学变异与分子水平变异之间的联系第53-54页
   ·诱变技术在白桦组织培养中的应用第54-55页
5 结论第55-56页
6 参考文献第56-64页
附录 A第64-65页
附录 B第65-66页
攻读学位期间发表的学术论文第66-67页
致谢第67页

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