| 第一篇 白内障家系的相关基因研究 | 第1-61页 |
| 引言 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-43页 |
| ·晶状体概述 | 第15-17页 |
| ·晶状体的发育、组织结构及功能特点 | 第15-17页 |
| ·晶状体的生理和生化特点 | 第17页 |
| ·白内障的诊断 | 第17-19页 |
| ·临床症状 | 第18页 |
| ·眼部检查 | 第18-19页 |
| ·临床分期 | 第19页 |
| ·白内障的分类 | 第19-22页 |
| ·白内障晶状体的生理生化改变 | 第22-24页 |
| ·水和蛋白质组成比例的变化 | 第22页 |
| ·正常及白内障晶状体的蛋白质组学研究 | 第22-23页 |
| ·白内障与离子平衡 | 第23页 |
| ·白内障与自由基 | 第23-24页 |
| ·白内障与维生素 | 第24页 |
| ·白内障与糖类 | 第24页 |
| ·白内障的病因及发病机制 | 第24-39页 |
| ·遗传性白内障 | 第24-37页 |
| ·遗传类型 | 第25页 |
| ·相关基因及突变形式 | 第25-35页 |
| ·遗传性白内障的研究方法 | 第35-37页 |
| ·年龄相关性白内障 | 第37-39页 |
| ·紫外线与白内障 | 第39页 |
| ·白内障的治疗 | 第39-42页 |
| ·手术治疗 | 第39-40页 |
| ·药物治疗 | 第40-41页 |
| ·基因治疗 | 第41页 |
| ·晶状体再生 | 第41-42页 |
| ·本研究的背景、目的和意义 | 第42-43页 |
| 第二章 一个常染色体显性遗传白内障家系的基因突变分析 | 第43-61页 |
| ·前言 | 第43-44页 |
| ·材料和方法 | 第44-51页 |
| ·家系收集 | 第44-45页 |
| ·外周血白细胞提取基因组DNA | 第45-46页 |
| ·引物设计及合成 | 第46-50页 |
| ·聚合酶链反应体外扩增目的片断 | 第50-51页 |
| ·PCR产物测序 | 第51页 |
| ·序列分析 | 第51页 |
| ·结果 | 第51-59页 |
| ·遗传方式及特点 | 第51-52页 |
| ·测序结果 | 第52-59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| 第二部分 白内障相关Connexin50-缝隙连接通道的调控机制研究 | 第61-133页 |
| 引言 | 第61页 |
| 第一章 文献综述 | 第61-86页 |
| ·缝隙连接蛋白及其功能 | 第61-76页 |
| ·细胞间通讯联系的发现 | 第61-62页 |
| ·缝隙连接的显微结构 | 第62-63页 |
| ·细胞间缝隙连接的生理意义 | 第63-64页 |
| ·缝隙连接蛋白基因的结构 | 第64页 |
| ·缝隙连接蛋白 | 第64-68页 |
| ·缝隙连接蛋白的拓扑结构 | 第65-66页 |
| ·缝隙连接蛋白不同结构区的功能 | 第66-68页 |
| ·缝隙连接功能的调节 | 第68-71页 |
| ·钙离子浓度 | 第68-69页 |
| ·PH值 | 第69页 |
| ·电压 | 第69-70页 |
| ·缝隙连接蛋白磷酸化 | 第70-71页 |
| ·缝隙连接通道的门控调节机制 | 第71-75页 |
| ·缝隙连接蛋白的分子内相互作用 | 第71-72页 |
| ·缝隙连接蛋白与钙调蛋白之间的相互作用 | 第72-75页 |
| ·缝隙连接蛋白与其他蛋白之间的相互作用及意义 | 第75-76页 |
| ·晶状体组织中的缝隙连接 | 第76-79页 |
| ·晶状体组织中缝隙连接蛋白的种类及功能 | 第76-77页 |
| ·缝隙连接蛋白与先天性白内障 | 第77-79页 |
| ·晶状体组织中钙调蛋白及其作用 | 第79页 |
| ·缝隙连接半通道 | 第79-80页 |
| ·膜片钳 | 第80-85页 |
| ·膜片钳的发现 | 第80页 |
| ·膜片钳技术的原理 | 第80-82页 |
| ·膜片钳技术的基本模式 | 第82-84页 |
| ·膜片钳技术的应用 | 第84页 |
| ·膜片钳记录中细胞膜离子通道的分类 | 第84-85页 |
| ·研究目的与意义 | 第85-86页 |
| 第二章 Connexin50蛋白的分子内及其与钙调蛋白的分子间相互作用 | 第86-113页 |
| ·引言 | 第86-88页 |
| ·材料和方法 | 第88-101页 |
| ·菌株、细胞和试剂 | 第88-89页 |
| ·目的基因、重组质粒和引物 | 第89-90页 |
| ·质粒DNA的制备 | 第90-92页 |
| ·DNA片段回收 | 第92-93页 |
| ·酶切与连接 | 第93页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第93-94页 |
| ·质粒转化 | 第94-95页 |
| ·菌种保存 | 第95页 |
| ·菌落PCR | 第95-96页 |
| ·细胞培养基的配制 | 第96页 |
| ·细胞传代培养 | 第96-97页 |
| ·细胞冻存 | 第97页 |
| ·细胞复苏 | 第97-98页 |
| ·脂质体介导的真核细胞瞬时转染 | 第98页 |
| ·免疫共沉淀 | 第98-100页 |
| ·Western blot分析 | 第100页 |
| ·激光共聚焦蛋白质免疫荧光定位 | 第100-101页 |
| ·研究结果 | 第101-110页 |
| ·CaM与Cx50之间的蛋白质相互作用 | 第101-106页 |
| ·Cx50的分子内相互作用(Cx50CT与Cx50CL) | 第106-109页 |
| ·CaM与Cx50的Ca2+依赖性共定位 | 第109-110页 |
| ·讨论 | 第110-113页 |
| 第三章 钙调蛋白在connexin50半通道功能调节中的作用研究 | 第113-125页 |
| ·前言 | 第113-115页 |
| ·材料和方法 | 第115-118页 |
| ·细胞及试剂 | 第115页 |
| ·质粒及载体构建 | 第115页 |
| ·G418筛选稳定细胞系 | 第115-116页 |
| ·Lucifer Yellow染料摄取实验 | 第116页 |
| ·膜片钳实验技术 | 第116-118页 |
| ·电极拉制 | 第116-117页 |
| ·细胞内、外液的配制 | 第117页 |
| ·电极充灌 | 第117页 |
| ·信号采集 | 第117-118页 |
| ·研究结果 | 第118-123页 |
| ·Ca+及CaM对Cx50半通道通透性的影响 | 第118-120页 |
| ·细胞外Ca2+调控Cx50半通道开放状态 | 第120-122页 |
| ·CaM参与调控Cx50半通道 | 第122-123页 |
| ·讨论 | 第123-125页 |
| 第四章 pH对Cx50半通道门控调节的可能机制 | 第125-133页 |
| ·前言 | 第125-126页 |
| ·材料和方法 | 第126-127页 |
| ·质粒、细胞及试剂 | 第126-127页 |
| ·激光共聚焦蛋白质免疫荧光定位 | 第127页 |
| ·Lucifer Yellow(LY)染料摄取(dye-uptake)实验 | 第127页 |
| ·膜片钳技术 | 第127页 |
| ·结果 | 第127-131页 |
| ·pH 6.5条件下Ca2+对Cx50半通道渗漏性的影响 | 第127-129页 |
| ·pH 6.5条件下Ca2+对Cx50半通道电压门控的影响 | 第129页 |
| ·pH 6.5条件下CaM对Cx50半通道功能的调节 | 第129-131页 |
| ·讨论 | 第131-133页 |
| 研究工作总结 | 第133-135页 |
| 创新点 | 第135-136页 |
| 参考文献 | 第136-157页 |
| 博士期间发表和待发表论文 | 第157-158页 |
| 致谢 | 第158-159页 |
