中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
第一章 前言 | 第10-24页 |
·L-精氨酸的性质、应用和生产现状 | 第10-12页 |
·L-精氨酸的性质 | 第10页 |
·L-Arg 的生理作用与应用 | 第10-12页 |
·生产现状 | 第12页 |
·L-Arg 的生产方法 | 第12-22页 |
·传统诱变育种生产L-Arg | 第12-13页 |
·利用基因工程技术生产L-Arg | 第13-22页 |
·立题背景及本文的研究任务 | 第22-24页 |
第二章 钝齿棒杆菌生物合成精氨酸关键酶分析 | 第24-31页 |
·材料和方法 | 第24-27页 |
·仪器和试剂 | 第24-25页 |
·菌株和培养基 | 第25-26页 |
·关键酶的分析 | 第26页 |
·乙酰谷氨酸激酶活力测定 | 第26页 |
·乙酰谷氨酸激酶的理化性质 | 第26-27页 |
·结果与讨论 | 第27-30页 |
·钝齿棒杆菌产精氨酸关键酶分析 | 第27-28页 |
·乙酰谷氨酸激酶的部分酶学性质 | 第28-29页 |
·金属离子、螯合剂及DTT 对酶的活性的影响 | 第29-30页 |
·本章小结 | 第30-31页 |
第三章 谷氨酸棒杆菌生物合成精氨酸途径中argB 基因的克隆、表达及与钝齿棒杆菌argB 基因的同源性 | 第31-45页 |
·材料和方法 | 第31-38页 |
·材料 | 第31-33页 |
·方法 | 第33-38页 |
·结果 | 第38-43页 |
·PCR扩增argB基因 | 第38页 |
·克隆质粒的菌落PCR及酶切鉴定 | 第38-39页 |
·argB 基因在大肠杆菌的初步表达 | 第39-42页 |
·探针的制备 | 第42页 |
·探针质量检测 | 第42页 |
·C.crenatum 基因组的酶切 | 第42-43页 |
·Southern blotting 分析C.crenatum 与C.glutamcium 的argB 基因同源性 | 第43页 |
·讨论 | 第43-44页 |
·本章小结 | 第44-45页 |
第四章 钝齿棒杆菌生物合成精氨酸基因簇argCJBDFR 的扩增及序列分析 | 第45-64页 |
·材料和方法 | 第45-47页 |
·材料 | 第45-46页 |
·方法 | 第46-47页 |
·结果 | 第47-62页 |
·各对引物PCR扩增 | 第47页 |
·序列分析 | 第47-62页 |
·讨论 | 第62页 |
·本章小结 | 第62-64页 |
第五章 野生型和突变型钝齿棒杆菌生物合成精氨酸基因簇argCJBDFR 的序列比较 | 第64-69页 |
·材料和方法 | 第64-65页 |
·菌种、试剂和仪器 | 第64-65页 |
·方法 | 第65页 |
·结果 | 第65-66页 |
·PCR扩增串联基因簇argCJBDFR | 第65页 |
·argJ 基因 | 第65-66页 |
·argB 基因 | 第66页 |
·argD基因 | 第66页 |
·argF 基因 | 第66页 |
·argR 基因 | 第66页 |
·讨论 | 第66-67页 |
·本章小结 | 第67-69页 |
第六章 钝齿棒杆菌精氨酸生物合成途径中argR 基因的功能分析及其高表达对C.crenatum A.S.M2 产精氨酸的影响 | 第69-85页 |
·材料和方法 | 第69-73页 |
·材料 | 第69-70页 |
·方法 | 第70-73页 |
·结果与讨论 | 第73-84页 |
·敲除型载体的构建及C. Crenatum A.S.M2 中argR 基因的敲除 | 第73-79页 |
·表达载体的构建及其在C. Crenatum A.S.M2 中的表达 | 第79-84页 |
·本章小结 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-94页 |
论文主要结论、创新点及展望 | 第94-97页 |
致谢 | 第97-98页 |
发表论文 | 第98页 |