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高效聚磷菌的筛选、ppk基因的克隆及其应用研究

摘要第1-12页
Abstract第12-16页
符号与缩略语第16-18页
第一章 文献综述第18-68页
 第一节 水体富营养化和污水除磷技术概述第18-33页
  1. 氮、磷循环与水体富营养化第18-20页
   ·自然界中氮、磷的循环及水体中氮、磷的来源第18-19页
   ·水体富营养化及其危害第19页
   ·富营养化的主要控制参数第19-20页
   ·控制磷污染的主要对策第20页
  2. 我国水环境的富营养化状况第20-22页
   ·全国主要湖泊水体富营养化状况第20页
   ·沿海省份的赤潮发生情况及特点第20-21页
   ·全国主要河流的水质状况第21页
   ·全国城市生活污水的排放和处理现状第21-22页
  3. 污水除磷技术概述第22-33页
   ·化学除磷工艺第22页
   ·污水生物除磷工艺第22-25页
   ·影响污水生物除磷的参数第25-33页
 第二节 强化生物除磷(EBPR)原理及其微生物学研究进展第33-48页
  1. 强化生物除磷的原理第33-35页
  2. EBPR系统中的聚磷菌第35-38页
   ·利用可培养的方法分离鉴定的聚磷菌第35-37页
   ·利用不依赖培养的分子生物学方法描述EBPR的群落结构组成第37-38页
  3. EBPR的生物化学第38-40页
   ·以乙酸作为唯一底物的代谢第38-39页
   ·以其它有机物作为底物的代谢第39-40页
  4. poly-P贮存物的特征和作用第40-41页
  5. EBPR的结构和功能的关系第41-43页
   ·利用DAPI染色来指明PAO的身份第41-42页
   ·利用FISH/染色法和FISH/MAR技术来表明PAO的身份第42-43页
   ·利用差速离心法描述聚磷菌的特性第43页
  6. 影响EBPR稳定运行的因素第43-46页
   ·进水中底物成分对EBPR的影响第43-45页
   ·聚磷菌与非聚磷菌的竞争对EBPR的影响第45页
   ·pH值对EBPR的影响第45-46页
   ·好氧曝气对EBPR的影响第46页
   ·厌氧生境对EBPR的影响第46页
   ·污泥龄(SRT)对EBPR的影响第46页
  7. 影响生物除磷研究进展的主要原因第46-48页
 第三节 聚磷相关基因研究进展第48-56页
  1. 基因克隆的方法进展第48-50页
   ·根据已知序列克隆基因第48页
   ·新基因的克隆方法第48-50页
  2. 与poly-P合成相关的ppk和ppx基因研究进展第50-53页
   ·Pseudomonas aeruginosa 8830的ppk和ppx的克隆和表达第50-51页
   ·菌株Serratia marcescens的ppk基因的克隆第51页
   ·菌株Acinetobacter baumannii 252 ppk基因的表达调控第51-52页
   ·Aoinetobacter sp.ADP1 ppk基因的克隆、表达和磷酸盐饥饿诱导第52-53页
   ·EBPR活性污泥中混合菌ppk基因的克隆第53页
  3. GFP标记菌株的研究进展第53-56页
   ·概述第53-55页
   ·国内外用GFP标记微生物进行生态学研究的进展状况第55-56页
 第四节.选题依据及研究内容第56-68页
  1. 选题依据及意义第56-57页
   ·强化生物除磷研究中的问题第56-57页
   ·未来研究的方向第57页
  2. 本研究工作思路第57页
  3. 主要研究内容第57-68页
第二章 高效聚磷菌的筛选及生物学特性第68-85页
 1. 材料与方法第68-72页
   ·培养基第68-69页
   ·供试土样和污泥样品第69页
   ·高效聚磷菌的分离和筛选第69-71页
   ·高效聚磷菌的生理生化鉴定第71页
   ·高效聚磷菌的16S rDNA序列的测定第71-72页
   ·菌体生长曲线第72页
   ·菌体最适生长条件的研究第72页
 2. 结果与分析第72-82页
   ·高效聚磷菌株的分离和筛选第72-75页
   ·高效聚磷菌GM1和GM6的生理生化鉴定第75-79页
   ·GM1和GM6的生长曲线第79-80页
   ·培养基起始pH对GM1和GM6生长的影响第80-81页
   ·温度对GM1和GM6生长的影响第81-82页
   ·通气量对GM1和GM6的生长的影响第82页
 3. 讨论第82-85页
第三章 GM1和GM6的聚磷特性第85-102页
 1. 材料与方法第86-88页
   ·材料第86页
   ·方法第86-88页
 2. 结果与分析第88-97页
   ·培养基起始pH对GM1和GM6聚磷能力的影响第88页
   ·装液量对GM1和GM6除磷能力的影响第88-89页
   ·温度对GM1和GM6除磷能力的影响第89页
   ·GM1、GM6纯培养的聚磷能力第89-93页
   ·好氧培养时乙酸浓度与PHB/VSS的关系第93页
   ·GM1、GM6厌氧乙酸浓度与PHB贮藏及磷释放的关系第93-97页
   ·厌氧培养时乙酸吸收和磷释放的关系第97页
 3. 讨论第97-102页
第四章 Pseudomonas putida GM6 ppk基因的克隆及表达第102-121页
 1. 材料与方法第103-108页
   ·材料第103页
   ·方法第103-105页
   ·ppk部分基因序列片段PCR扩增第105页
   ·SEFA-PCR扩增片段上下游序列第105-106页
   ·序列测定分析和同源性比较第106页
   ·ppk基因的表达第106-108页
 2.结果与分析第108-117页
   ·PPk部分序列片段的获得第108-109页
   ·PPk部分基因片段上下游序列片段的克隆第109-110页
   ·PPk基因序列分析第110-111页
   ·ppk基因在菌株E.coli BL21中的表达第111-117页
 3. 讨论第117-121页
第五章 高效聚磷菌GM6在活性污泥中定殖及其应用研究第121-140页
 1. 材料与方法第122-126页
   ·菌株与质粒第122页
   ·培养基与菌株生长条件第122页
   ·抗生素浓度第122-123页
   ·试剂和酶第123页
   ·污水处理试验设置第123页
   ·高效聚磷菌株GM6的抗性试验第123-124页
   ·gfp基因标记菌株GMTR、GMBR的构建第124页
   ·GMTR、GMBR荧光检测方法第124页
   ·含gfp质粒的遗传稳定性试验第124页
   ·GMTR、GMBR的生长曲线的制作第124页
   ·GMTR投菌试验第124-125页
   ·高效聚磷菌GM6的工程化应用第125-126页
   ·分析方法第126页
 2. 结果与分析第126-137页
   ·标记菌株的构建第126-130页
   ·GMTR强化污泥除磷效果第130-137页
   ·高效聚磷菌GM6的工程化应用结果第137页
 3. 讨论第137-140页
第六章 影响EBPR系统生物除磷的主要因素第140-151页
 1. 材料与方法第141-142页
   ·试验装置及污水组份第141页
   ·进水乙酸比例对EBPR系统厌氧释磷的影响第141页
   ·厌氧搅拌强度对EBPR系统除磷效率的影响第141页
   ·进水pH对EBPR系统除磷效率的影响第141-142页
   ·好氧曝气强度对系统除磷效果的影响第142页
   ·污泥停留时间对EBPR系统除磷效率的影响第142页
 2. 结果与分析第142-148页
   ·进水中乙酸比例对厌氧释磷的影响第142-143页
   ·厌氧段搅拌强度对厌氧释磷的影响第143-144页
   ·进水pH对EBPR系统除磷效果的影响第144-146页
   ·好氧段溶解氧浓度对除磷效率的影响第146-147页
   ·污泥泥龄对除磷系统运行效率的影响第147-148页
 3. 讨论第148-151页
第七章 全文总结及建议第151-155页
 1. 全文总结第151-153页
   ·聚磷菌的分离鉴定及其生物学特性第151页
   ·GM1和GM6的聚磷特性第151页
   ·GM6(Pseudomonas putida)ppk的克隆及表达第151-152页
   ·GM6(Pseudomonas putida)在活性污泥中的定殖及其应用第152页
   ·影响EBPR系统生物除磷的主要因素第152-153页
 2. 本文创新点第153页
 3. 建议第153-155页
附录第155-159页
附表第159-160页
致谢第160-161页
发表文章及专利申报情况第161页

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