摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
英文缩略表 | 第10-11页 |
第一章 引言 | 第11-20页 |
·猪圆环病毒的研究进展 | 第11-16页 |
·分类地位 | 第11页 |
·形态学及生物学特征 | 第11页 |
·PCV1 和 PCV2 | 第11-12页 |
·基因组成 | 第12-13页 |
·PCV 的复制模式 | 第13-15页 |
·仔猪断奶后多系统衰竭综合征 | 第15页 |
·PCV2 的致病机理 | 第15-16页 |
·猪圆环病毒的疫苗研究进展 | 第16-17页 |
·多表位疫苗的研究进展 | 第17-19页 |
·表位的预测 | 第18页 |
·抗原表位的选择 | 第18页 |
·多表位疫苗的设计原则 | 第18-19页 |
·研究的目的和意义 | 第19-20页 |
第二章 卡介苗 Hsp65 基因的克隆及 PCV2 表位及其串联体的筛选 | 第20-31页 |
·材料 | 第20-21页 |
·基因 | 第20页 |
·菌株、载体 | 第20-21页 |
·试剂 | 第21页 |
·卡介苗 Hsp65 基因的克隆 | 第21-25页 |
·卡介苗的培养 | 第21页 |
·卡介苗基因组 DNA 的提取 | 第21页 |
·引物设计 | 第21-22页 |
·Hsp65 基因的扩增 | 第22页 |
·Hsp65 PCR 产物的克隆 | 第22-24页 |
·重组质粒的鉴定 | 第24-25页 |
·PCV2 表位及其串联体的筛选 | 第25-26页 |
·PCV2 抗原表位的筛选 | 第25页 |
·表位串联体的筛选 | 第25页 |
·表位串联体序列的优化 | 第25-26页 |
·实验结果 | 第26-30页 |
·Hsp65 基因的扩增 | 第26页 |
·重组质粒的酶切及 PCR 鉴定 | 第26-27页 |
·表位串联体的筛选 | 第27-30页 |
·讨论 | 第30-31页 |
第三章 重组表达质粒的构建以及在大肠杆菌中的表达 | 第31-42页 |
·材料和方法 | 第31-35页 |
·试剂 | 第31页 |
·重组中间克隆载体的构建 | 第31-32页 |
·重组表达质粒的构建 | 第32页 |
·重组表达菌的表达及鉴定 | 第32-33页 |
·融合蛋白的纯化 | 第33-34页 |
·纯化蛋白的复性与加工 | 第34-35页 |
·蛋白浓度的测定 | 第35页 |
·结果 | 第35-41页 |
·重组中间克隆载体的构建 | 第35页 |
·重组表达载体的构建 | 第35-36页 |
·重组蛋白的表达及其鉴定 | 第36-38页 |
·重组蛋白可溶性的确定 | 第38页 |
·重组蛋白的纯化及复性 | 第38-41页 |
·蛋白浓度的测定 | 第41页 |
·讨论 | 第41-42页 |
第四章 重组蛋白免疫效果评价 | 第42-53页 |
·材料和方法 | 第42-45页 |
·实验动物 | 第42页 |
·实验材料 | 第42页 |
·重组蛋白免疫小鼠 | 第42-43页 |
·ELISA 检测特异性抗体 | 第43页 |
·病毒中和抗体的测定 | 第43-44页 |
·T 淋巴细胞增殖实验 | 第44页 |
·淋巴细胞 CD4、CD8 分型的测定 | 第44页 |
·抗体分型 | 第44-45页 |
·细胞因子 IFN-γ和 IL-4 的检测 | 第45页 |
·结果 | 第45-50页 |
·特异性抗体的检测结果 | 第45-46页 |
·病毒中和抗体的测定结果 | 第46-47页 |
·T 淋巴细胞增殖实验 | 第47-49页 |
·淋巴细胞 CD4、CD8 分型的测定 | 第49页 |
·抗体分型 | 第49页 |
·细胞因子 IFN-γ和 IL-4 的检测结果 | 第49-50页 |
·讨论 | 第50-53页 |
第五章 全文结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
作者简历 | 第61页 |