| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 英文缩略表 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| ·奶牛乳房炎和口蹄疫研究进展 | 第14页 |
| ·乳房炎 | 第14页 |
| ·口蹄疫 | 第14页 |
| ·动物转基因技术 | 第14-17页 |
| ·DNA 显微注射法 | 第15页 |
| ·逆转录病毒感染法 | 第15页 |
| ·胚胎干细胞法 | 第15页 |
| ·精子载体法 | 第15-16页 |
| ·精原干细胞法 | 第16页 |
| ·体细胞克隆法 | 第16页 |
| ·诱导多能干细胞法 | 第16页 |
| ·孤雄（雌）干细胞法 | 第16-17页 |
| ·家畜转基因育种策略与现状 | 第17-22页 |
| ·抗病 | 第17-19页 |
| ·经济性状 | 第19-21页 |
| ·其他生产性状 | 第21页 |
| ·环保 | 第21-22页 |
| ·抗菌肽和干扰素研究进展 | 第22-23页 |
| ·抗菌肽 | 第22页 |
| ·干扰素 | 第22-23页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二章 转乳铁蛋白肽和α干扰素基因牛胎儿成纤维细胞的制备 | 第24-38页 |
| 前言 | 第24页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·质粒及菌株 | 第24页 |
| ·细胞 | 第24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24-25页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第25页 |
| ·主要试剂配制 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-32页 |
| ·载体构建 | 第25-26页 |
| ·质粒提取 | 第26-27页 |
| ·转化 | 第27页 |
| ·牛胎儿成纤维细胞系的建立 | 第27-29页 |
| ·FuGENE 脂质体转染 | 第29页 |
| ·Amaxa Nucleofector 电转染 | 第29页 |
| ·转基因细胞传代筛选 | 第29页 |
| ·克隆的挑取和扩大培养 | 第29-30页 |
| ·转基因细胞 DNA 提取（裂解法） | 第30页 |
| ·转基因细胞 PCR 鉴定 | 第30-31页 |
| ·Western blot 检测转基因细胞中α干扰素的表达 | 第31-32页 |
| ·实验结果 | 第32-36页 |
| ·载体构建及鉴定 | 第32-33页 |
| ·牛胎儿成纤维细胞系的建立 | 第33页 |
| ·牛胎儿成纤维细胞的转染与筛选 | 第33-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 第三章 转基因细胞中α干扰素的抗病毒作用分析 | 第38-47页 |
| 前言 | 第38页 |
| ·材料与方法 | 第38-41页 |
| ·病毒 | 第38页 |
| ·仪器设备及试剂 | 第38页 |
| ·细胞攻毒 | 第38页 |
| ·病毒滴度测定 | 第38-39页 |
| ·细胞凋亡分析 | 第39页 |
| ·培养液添加α干扰素对培养细胞的影响 | 第39页 |
| ·细胞 mRNA 提取 | 第39-40页 |
| ·RT-PCR | 第40-41页 |
| ·探针法定量 PCR | 第41页 |
| ·实验结果 | 第41-44页 |
| ·转α干扰素基因细胞上清病毒滴度检测 | 第41-42页 |
| ·细胞凋亡分析 | 第42页 |
| ·转α干扰素基因细胞抗病毒基因表达分析 | 第42-43页 |
| ·胞外添加α干扰素的牛胎儿成纤维细胞抗病毒基因表达分析 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| ·小结 | 第46-47页 |
| 第四章 转基因克隆胚胎的制备 | 第47-65页 |
| 前言 | 第47页 |
| ·材料与方法 | 第47-56页 |
| ·供体细胞 | 第47页 |
| ·仪器设备 | 第47-48页 |
| ·主要试剂的配制 | 第48-50页 |
| ·显微操作针的制备 | 第50-51页 |
| ·核移植 | 第51-53页 |
| ·转基因克隆胚胎 PCR 鉴定 | 第53-54页 |
| ·转基因克隆胚胎α干扰素免疫荧光染色 | 第54-55页 |
| ·转基因克隆囊胚细胞计数染色 | 第55页 |
| ·受体牛的同期发情与转基因克隆胚胎移植 | 第55页 |
| ·转基因克隆牛鉴定 | 第55页 |
| ·转基因克隆牛耳成纤维细胞建系与再克隆 | 第55页 |
| ·实验设计 | 第55-56页 |
| ·实验结果 | 第56-61页 |
| ·转基因克隆胚胎制备与鉴定 | 第56-58页 |
| ·供体细胞不同处理方式对克隆效率的影响 | 第58页 |
| ·不同的激活方式对克隆效率的影响 | 第58页 |
| ·不同核移植方法对克隆效率的影响 | 第58-59页 |
| ·转基因克隆和非转基因克隆胚胎发育能力比较 | 第59页 |
| ·转基因克隆胚胎和非转基因克隆胚胎妊娠情况 | 第59页 |
| ·转基因克隆牛鉴定 | 第59-61页 |
| ·转基因克隆牛耳成纤维细胞系的建立与再克隆 | 第61页 |
| ·讨论 | 第61-64页 |
| ·供体细胞不同处理方式对克隆效率的影响 | 第61-62页 |
| ·不同的激活方式对克隆效率的影响 | 第62页 |
| ·不同核移植方法对克隆效率的影响 | 第62-63页 |
| ·转基因克隆和非转基因克隆的胚胎发育比较 | 第63页 |
| ·转基因克隆胚胎和非转基因克隆胚胎妊娠情况比较 | 第63-64页 |
| ·小结 | 第64-65页 |
| 第五章 全文结论 | 第65-66页 |
| 附录 相关图片 | 第66-71页 |
| 参考文献 | 第71-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 作者简历 | 第81页 |
