| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-29页 |
| ·概述 | 第12-15页 |
| ·普鲁兰酶的国内外研究概况和发展趋势 | 第15-19页 |
| ·普鲁兰酶的主要产生菌种 | 第15-17页 |
| ·基因工程技术在普鲁兰酶研究领域应用概况 | 第17-19页 |
| ·普鲁兰酶的应用 | 第19-23页 |
| ·普鲁兰酶在高葡萄糖浆生产中的应用 | 第21-22页 |
| ·普鲁兰酶在高麦芽糖浆生产中的应用 | 第22页 |
| ·普鲁兰酶在干啤酒生产中的应用 | 第22-23页 |
| ·普鲁兰酶的其它用途 | 第23页 |
| ·研究目的和意义 | 第23-24页 |
| ·研究内容 | 第24-26页 |
| 参考文献 | 第26-29页 |
| 第二章 Bacillus naganoensis(ATCC53909)普鲁兰酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达 | 第29-53页 |
| ·材枓和方法 | 第29-38页 |
| ·结果与分析 | 第38-47页 |
| ·细菌总DNA的提取 | 第38页 |
| ·PCR克隆普鲁兰酶基因片段 | 第38-39页 |
| ·重组酵母表达载体pPIC9K—Pullulanase的构建 | 第39-41页 |
| ·重组酵母表达载体pPIC9K—Pullulanase转化酵母SMD1168及阳性转化子的筛选 | 第41-43页 |
| ·转化子的酶活测定及高产菌株的筛选 | 第43-44页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE分析 | 第44-45页 |
| ·转化子遗传稳定性实验 | 第45-47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| ·小结 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-53页 |
| 第三章 重组毕赤酵母发酵条件的优化 | 第53-72页 |
| ·材枓与方法 | 第54页 |
| ·结果与分析 | 第54-68页 |
| ·碳源的影响 | 第54-56页 |
| ·碳源对生长期菌体的影响 | 第54-55页 |
| ·碳源对诱导期产酶的影响 | 第55-56页 |
| ·氮源的影响 | 第56-59页 |
| ·氮源对生长期菌体的影响 | 第56-58页 |
| ·氮源对诱导期产酶的影响 | 第58-59页 |
| ·培养基的pH值的影响 | 第59-60页 |
| ·培养基的pH对菌体生物量的影响 | 第59页 |
| ·培养基的pH对菌株产酶的影响 | 第59-60页 |
| ·接种量的影响 | 第60-61页 |
| ·接种量对生长期菌体的影响 | 第60-61页 |
| ·接种量对诱导期产酶的影响 | 第61页 |
| ·通气量对菌体生物量和产酶的影响 | 第61-63页 |
| ·摇瓶转速对菌体生物量和产酶的影响 | 第61-62页 |
| ·装液量对菌体生物量和产酶的影响 | 第62-63页 |
| ·温度对菌体生物量和产酶的影响 | 第63-65页 |
| ·甲醇对菌体生物量和产酶的影响 | 第65-66页 |
| ·甲醇诱导浓度对菌体生物量和产酶的影响 | 第65页 |
| ·甲醇诱导时间对菌体生物量和产酶的影响 | 第65-66页 |
| ·正交试验优化发酵条件 | 第66-68页 |
| ·正交实验的验证 | 第68页 |
| ·讨论 | 第68-69页 |
| ·小结 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-72页 |
| 第四章 基因工程酵母产普鲁兰酶粗酶的酶学和应用性质研究 | 第72-80页 |
| ·材料和方法 | 第72-73页 |
| ·结果与分析 | 第73-78页 |
| ·普鲁兰酶的分子量测定 | 第73-74页 |
| ·酶作用的最适温度 | 第74-75页 |
| ·酶作用的最适pH | 第75页 |
| ·温度与pH对酶稳定性的影响 | 第75-76页 |
| ·保温时间对酶热稳定性的影响 | 第76-77页 |
| ·金属离子、EDTA和SDS对酶活力的影响 | 第77-78页 |
| ·讨论 | 第78页 |
| ·小结 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-80页 |
| 第五章 总结 | 第80-83页 |
| ·总结 | 第80-81页 |
| ·创新 | 第81-82页 |
| ·建议 | 第82-83页 |
| 附录 | 第83-92页 |
| 附录1 论文中使用的缩写词及中英文对照 | 第83-84页 |
| 附录2 实验中所使用的培养基和常用试剂的配制 | 第84-86页 |
| 附录3 论文中使用的菌株和表达载体特性 | 第86-87页 |
| 附录4 Bacillus naganoensis(ATCC53909)普鲁兰酶基因的核酸和氨基酸序列 | 第87-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
