| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-33页 |
| ·花色基因工程研究概况 | 第11-24页 |
| ·花色与色素 | 第11-13页 |
| ·花色素的生物合成及其基因 | 第13-17页 |
| ·花色形成的其他影响因素 | 第17-19页 |
| ·花色基因工程操作 | 第19-24页 |
| ·矮牵牛研究概况 | 第24-26页 |
| ·矮牵牛花色研究 | 第24-25页 |
| ·矮牵牛花器官研究 | 第25-26页 |
| ·矮牵牛遗传转化研究 | 第26页 |
| ·CHI基因研究概况 | 第26-28页 |
| ·共抑制与反义RNA研究进展 | 第28-33页 |
| ·转基因植物共抑制与基因沉默 | 第28-30页 |
| ·反义RNA及其在植物基因工程中的应用 | 第30-33页 |
| 第2章 引言 | 第33-35页 |
| 第3章 CHI基因的克隆及其植物表达载体的构建 | 第35-50页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·植物材料 | 第35页 |
| ·菌种和质粒 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·主要仪器设备 | 第35页 |
| ·常用溶液配方 | 第35-36页 |
| ·基本培养基配方 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-44页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第36-37页 |
| ·农杆菌质粒DNA的提取 | 第37-38页 |
| ·质粒DNA的纯化 | 第38页 |
| ·酶切产物的纯化 | 第38页 |
| ·DNA限制性内切酶反应 | 第38页 |
| ·DNA片段的连接 | 第38-39页 |
| ·DNA片段的回收 | 第39页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第39-40页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第40页 |
| ·植物总RNA提取 | 第40页 |
| ·cDNA的合成 | 第40页 |
| ·CHI基因的PCR扩增 | 第40-41页 |
| ·目的基因片段和T载体的TA克隆 | 第41页 |
| ·重组子的鉴定 | 第41页 |
| ·DNA序列分析 | 第41页 |
| ·中间载体的构建 | 第41-42页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第42页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第42页 |
| ·农杆菌感受态细胞的转化(冻融法) | 第42-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-47页 |
| ·CHI基因的扩增、克隆及鉴定 | 第44页 |
| ·序列测定与分析 | 第44-45页 |
| ·中间载体的构建 | 第45页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第45-47页 |
| ·讨论 | 第47-50页 |
| ·RT-PCR法克隆基因 | 第47-48页 |
| ·载体构建中注意的问题 | 第48-50页 |
| 第4章 CHI基因对矮牵牛的遗传转化 | 第50-61页 |
| ·实验材料 | 第50页 |
| ·植物材料 | 第50页 |
| ·菌株与质粒 | 第50页 |
| ·主要试剂和主要仪器设备 | 第50页 |
| ·基本培养基配方 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-54页 |
| ·培养条件 | 第50-51页 |
| ·无菌材料的获得与高频再生体系的建立 | 第51页 |
| ·农杆菌的培养与活化 | 第51页 |
| ·农杆菌介导的叶盘转化法 | 第51-52页 |
| ·转基因植株的检测 | 第52-53页 |
| ·转基因植株花色素苷含量的测定 | 第53-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-58页 |
| ·农杆菌介导的正义与反义CHI基因的转化 | 第54-55页 |
| ·转化植株基因组的2x MPCR检测 | 第55-57页 |
| ·转基因植株花色素苷含量的测定 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-61页 |
| ·矮牵牛的遗传转化 | 第58-59页 |
| ·转化植株基因组的MPCR检测 | 第59-60页 |
| ·花色素苷含量的测定 | 第60-61页 |
| 第5章 转CHI基因矮牵牛花色改变与花器官变异分析 | 第61-72页 |
| ·材料与方法 | 第61页 |
| ·植物材料 | 第61页 |
| ·花色变化的观察 | 第61页 |
| ·花器官变异观察 | 第61页 |
| ·CHI基因系统进化分析与多序列比对分析 | 第61页 |
| ·结果 | 第61-68页 |
| ·TG-R~(CHI+)和TG-R~(CHI-)花色改变模式 | 第61-62页 |
| ·TG-W~(CHI+)花色改变模式 | 第62页 |
| ·TG-R~(CHI+)和TG-R~(CHI-)花器官变异 | 第62页 |
| ·同时具有独特花器官表型和花色表型的新材料 | 第62-66页 |
| ·CHI基因系统进化与多序列比对 | 第66-68页 |
| ·分析与讨论 | 第68-72页 |
| ·TG-R~(CHI+)和TG-R~(CHI-)花色改变的分析 | 第68-70页 |
| ·TG-W~(CHI+)花色改变的分析 | 第70-71页 |
| ·TG-R~(CHI+)和TG-R~(CHI-)花器官变异的可能成因 | 第71-72页 |
| 第6章 结论建议 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-87页 |
| 缩略词表 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 附录 | 第89页 |
