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香蕉解旋酶基因的克隆和反义转化番茄的研究

摘要第1-7页
第一章 文献综述第7-33页
 1 进行香蕉新功能基因克隆,功能鉴定必要性第7-8页
 2 关于基因功能的研究方法第8-24页
   ·基因功能的含义第8-9页
   ·基因转导技术第9-10页
   ·反义技术第10-20页
     ·自然界中存在的反义RNA第11-12页
     ·反义基因的概念与分子生物学基础第12-14页
     ·反义RNA技术在植物基因功能研究中的应用第14-16页
     ·反义RNA技术在植物生理代谢途径研究中的应用第16-17页
     ·反义RNA技术在植物基因工程中的应用第17-20页
   ·利用RNAi技术分析基因功能的研究第20-24页
     ·RNAi发现及其特点第20-21页
     ·RNAi的作用机制及其技术发展状况第21-23页
     ·RNAi大规模功能基因鉴定研究的进展第23-24页
 3 关于解旋酶第24-31页
   ·解旋酶的结构第25-27页
   ·DNA解旋酶第27-28页
   ·RNA解旋酶第28-30页
   ·解旋酶缺陷疾病第30-31页
 4 本研究的目的和意义第31-32页
 5 本研究的技术路线第32-33页
第二章 香蕉解旋酶基因的克隆和Southern杂交分析第33-61页
 1 香蕉解旋酶基因的克隆第33-51页
   ·材料第33页
   ·方法第33-41页
     ·引物的设计与合成第33-34页
     ·解旋酶基因5′端的PCR扩增第34-35页
     ·RCR产物的克隆及重组子筛选第35-40页
     ·目的DNA片段的测序和分析第40-41页
   ·结果与分析第41-51页
     ·梯度PCR第41页
     ·克隆及阳性重组子的筛选第41-43页
     ·核苷酸序列的测定第43-45页
     ·基因功能预测分析第45-51页
 2 香蕉解旋酶基因的Southern杂交分析第51-58页
   ·材料第51页
   ·方法第51-57页
     ·香蕉叶片基因组DNA的提取第51-52页
     ·基因组DNA的EcoRⅠ,HindⅢ内切酶消化第52-53页
     ·DNA的印迹转移第53-54页
     ·探针的标记第54-55页
     ·Southern杂交第55-57页
   ·结果与分析第57-58页
 3 小节与讨论第58-61页
   ·小节第58页
   ·讨论第58-61页
第三章 解旋酶基因反义基因表达载体的构建第61-72页
 1 材料与试剂第61-62页
 2 方法第62-69页
   ·植物反义表达载体的构建策略第62-64页
   ·解旋酶基因中间载体的构建第64-67页
   ·解旋酶基因反义表达载体的构建第67-69页
 3 结果与分析第69-72页
第四章 香蕉解旋酶基因反义转化番茄及性状观察分析第72-96页
 1 材料第72-73页
 2 方法第73-79页
   ·三亲交配法将反义表达载体导入农杆菌GV3101第73-75页
   ·重组农杆菌介导的番茄遗传转化第75-78页
   ·转基因番茄植株Southern杂交检测第78-79页
 3 结果与分析第79-88页
 4 结论第88-89页
 5 讨论第89-96页
附录第96-102页
参考文献第102-112页
致谢第112页

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