摘要 | 第1-7页 |
第一章 文献综述 | 第7-33页 |
1 进行香蕉新功能基因克隆,功能鉴定必要性 | 第7-8页 |
2 关于基因功能的研究方法 | 第8-24页 |
·基因功能的含义 | 第8-9页 |
·基因转导技术 | 第9-10页 |
·反义技术 | 第10-20页 |
·自然界中存在的反义RNA | 第11-12页 |
·反义基因的概念与分子生物学基础 | 第12-14页 |
·反义RNA技术在植物基因功能研究中的应用 | 第14-16页 |
·反义RNA技术在植物生理代谢途径研究中的应用 | 第16-17页 |
·反义RNA技术在植物基因工程中的应用 | 第17-20页 |
·利用RNAi技术分析基因功能的研究 | 第20-24页 |
·RNAi发现及其特点 | 第20-21页 |
·RNAi的作用机制及其技术发展状况 | 第21-23页 |
·RNAi大规模功能基因鉴定研究的进展 | 第23-24页 |
3 关于解旋酶 | 第24-31页 |
·解旋酶的结构 | 第25-27页 |
·DNA解旋酶 | 第27-28页 |
·RNA解旋酶 | 第28-30页 |
·解旋酶缺陷疾病 | 第30-31页 |
4 本研究的目的和意义 | 第31-32页 |
5 本研究的技术路线 | 第32-33页 |
第二章 香蕉解旋酶基因的克隆和Southern杂交分析 | 第33-61页 |
1 香蕉解旋酶基因的克隆 | 第33-51页 |
·材料 | 第33页 |
·方法 | 第33-41页 |
·引物的设计与合成 | 第33-34页 |
·解旋酶基因5′端的PCR扩增 | 第34-35页 |
·RCR产物的克隆及重组子筛选 | 第35-40页 |
·目的DNA片段的测序和分析 | 第40-41页 |
·结果与分析 | 第41-51页 |
·梯度PCR | 第41页 |
·克隆及阳性重组子的筛选 | 第41-43页 |
·核苷酸序列的测定 | 第43-45页 |
·基因功能预测分析 | 第45-51页 |
2 香蕉解旋酶基因的Southern杂交分析 | 第51-58页 |
·材料 | 第51页 |
·方法 | 第51-57页 |
·香蕉叶片基因组DNA的提取 | 第51-52页 |
·基因组DNA的EcoRⅠ,HindⅢ内切酶消化 | 第52-53页 |
·DNA的印迹转移 | 第53-54页 |
·探针的标记 | 第54-55页 |
·Southern杂交 | 第55-57页 |
·结果与分析 | 第57-58页 |
3 小节与讨论 | 第58-61页 |
·小节 | 第58页 |
·讨论 | 第58-61页 |
第三章 解旋酶基因反义基因表达载体的构建 | 第61-72页 |
1 材料与试剂 | 第61-62页 |
2 方法 | 第62-69页 |
·植物反义表达载体的构建策略 | 第62-64页 |
·解旋酶基因中间载体的构建 | 第64-67页 |
·解旋酶基因反义表达载体的构建 | 第67-69页 |
3 结果与分析 | 第69-72页 |
第四章 香蕉解旋酶基因反义转化番茄及性状观察分析 | 第72-96页 |
1 材料 | 第72-73页 |
2 方法 | 第73-79页 |
·三亲交配法将反义表达载体导入农杆菌GV3101 | 第73-75页 |
·重组农杆菌介导的番茄遗传转化 | 第75-78页 |
·转基因番茄植株Southern杂交检测 | 第78-79页 |
3 结果与分析 | 第79-88页 |
4 结论 | 第88-89页 |
5 讨论 | 第89-96页 |
附录 | 第96-102页 |
参考文献 | 第102-112页 |
致谢 | 第112页 |