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小麦淀粉合成关键酶基因启动子的克隆与特征

中文摘要第1-16页
第一章 综述第16-56页
 1 研究目的和意义第16-17页
 2 国、内外研究现状第17-47页
   ·小麦淀粉的研究第17-31页
     ·淀粉第17-18页
     ·淀粉的生物合成第18-19页
     ·淀粉合成关键酶研究进展第19-27页
     ·基因工程改变淀粉品质第27-31页
   ·启动子的国内外研究现状第31-47页
     ·基因与启动子第32页
     ·什么是启动子第32-33页
     ·真核启动子的特点第33-39页
     ·籽粒或胚乳特异启动子第39-40页
     ·启动子结合蛋白第40-44页
     ·启动子研究方法第44-47页
 3 展望第47-48页
 参考文献第48-56页
第二章 论文设计方案及技术路线第56-59页
 1 选题依据第56-57页
 2 技术路线第57-58页
 3 试验内容第58-59页
第三章 gbssI、sbeIIa 及 apg-s 启动子克隆第59-94页
 1 材料与方法第59-72页
   ·小麦材料第59-60页
   ·gDNA 提取第60-62页
   ·gDNA 酶切及纯化第62-63页
   ·连接及纯化第63页
   ·IPCR第63-65页
   ·APCR第65-67页
   ·PCR 片段凝胶回收第67-68页
   ·PCR 产物与 pMD-18T 载体的连接第68页
   ·质粒-大肠杆菌转化第68-69页
   ·质粒提取第69-71页
   ·DNA 测序第71页
   ·试剂第71-72页
 2 结果与分析第72-91页
   ·小麦总 DNA 提取及浓度检测第72页
   ·gbss 启动子克隆第72-83页
   ·sbeIIa 启动子克隆第83-90页
   ·agp-s 启动子克隆第90-91页
 3 讨论第91-93页
 参考文献第93-94页
第四章 sbeIIa、pbf 启动子缺失表达载体构建第94-118页
 1 材料与方法第94-98页
   ·质粒及引物第94-96页
   ·DNA 酶切及纯化(略)第96页
   ·连接及纯化(略)第96页
   ·DNA 片段凝胶回收(略)第96页
   ·DNA 片段与载体的连接及转化(略)第96-97页
   ·质粒提取(略)第97页
   ·PCR-大肠杆菌转化鉴定(略)第97页
   ·试剂第97-98页
 2 结果与分析第98-115页
   ·sbeIIa 启动子缺失构建第98-108页
   ·pbf 启动子缺失构建第108-115页
 3 讨论第115-116页
 参考文献第116-117页
 附表第117-118页
第五章 小麦胚乳-GUS瞬间表达体系的确立第118-134页
 1 材料与方法第118-123页
   ·小麦材料第118-119页
   ·质粒提取第119页
   ·基因枪转化程序第119-122页
   ·转化后小麦胚乳的培养及检测第122页
   ·其他试剂第122-123页
 2 结果与分析第123-128页
   ·胚乳细胞预培养与否对基因瞬间表达的影响第123-124页
   ·胚乳细胞年龄对基因瞬间表达的影响第124-127页
   ·基因枪轰击压力对基因瞬间表达的影响第127-128页
 3 讨论第128-132页
   ·小麦胚乳瞬间表达体系的应用第128-129页
   ·瞬间表达强度指标选择第129-130页
   ·基因表达与胚乳细胞年龄选择的关系第130页
   ·胚乳预培养与否对 GUS 活性的影响第130-131页
   ·不同轰击压力对 GUS 表达活性的影响第131-132页
 参考文献第132-134页
第六章 sbeIIa、pbf启动子缺失体的小麦转化及检测第134-166页
 1 材料与方法第134-139页
   ·小麦材料第134-135页
   ·质粒提取第135-136页
   ·基因枪转化程序第136页
   ·转化材料的培养第136-138页
   ·转化后小麦胚乳的培养及检测第138页
   ·试剂第138-139页
 2 结果与分析第139-156页
   ·sbeIIa 各缺失体胚乳中转化与瞬间表达第139-148页
   ·sbeIIa 各缺失体盾片中长久表达及转基因植株的鉴定第148-150页
   ·pbf 各缺失体胚乳转化与瞬间表达第150-156页
 3 讨论第156-160页
   ·GUS 瞬间表达体系第156-157页
   ·sbeIIa 启动子各缺失体的基因瞬间表达第157-158页
   ·sbe.a-g 各启动子片段序列结构与基因调控特点第158-159页
   ·pbf 启动子各缺失体的基因瞬间表达第159页
   ·sbeIIa 启动子各缺失体在盾片中的基因枪转化第159-160页
   ·启动子的表达强度及应用第160页
 参考文献第160-162页
 附表及附图第162-166页
第七章 gbss 启动子在小麦淀粉品质改良中的应用第166-178页
 1 材料与方法第166-169页
   ·质粒第166-167页
   ·小麦材料第167页
   ·DNA 片段凝胶回收(略)第167页
   ·DNA 片段与载体的连接及转化(略)第167页
   ·质粒提取(略)第167-168页
   ·PCR-大肠杆菌转化鉴定(略)第168页
   ·金粉制备(略)第168页
   ·基因枪转化(略)第168页
   ·GUS 检测第168页
   ·试剂第168-169页
 2 结果与分析第169-173页
   ·gbss 反义基因表达载体构建的设计第169-170页
   ·gbss 反义基因表达载体构建第170-171页
   ·pRgbss 表达载体在小麦中的转化第171-172页
   ·转基因植株的获得及检测第172-173页
 3 讨论第173-174页
 参考文献第174-175页
 附表及附图第175-178页
第八章 结论与展望第178-181页
 1 本文主要研究结果与结论 1第178-179页
   ·gbss、sbeIIa 及 agp 启动子的克隆第178页
   ·确立小麦胚乳 GUS 瞬间表达体系第178-179页
   ·sbeIIa 及 agp 基因启动子的功能缺失研究第179页
   ·gbss 启动子在小麦淀粉改良中的初步应用第179页
 2 创新点第179-180页
 3 展望第180-181页
英文摘要第181-186页
论文发表情况第186页

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