| 文献综述 | 第1-33页 |
| 第一章 猪瘟研究进展 | 第13-22页 |
| ·概述 | 第13页 |
| ·猪瘟的地理分布和危害 | 第13-14页 |
| ·当前猪瘟流行新动态 | 第14-15页 |
| ·猪瘟诊断的研究进展 | 第15-18页 |
| ·动物实验 | 第15页 |
| ·病毒分离 | 第15页 |
| ·免疫学诊断研究进展 | 第15-17页 |
| ·分子生物学诊断技术 | 第17-18页 |
| ·猪瘟防制的研究进展 | 第18-19页 |
| ·猪瘟疫苗的研究进展 | 第19-22页 |
| ·传统疫苗 | 第19页 |
| ·新型疫苗 | 第19-21页 |
| ·新型疫苗的前景及存在的问题 | 第21-22页 |
| 第二章 猪瘟病毒及其研究进展 | 第22-33页 |
| ·猪瘟病毒的生物学特性及其研究进展 | 第22-26页 |
| ·病毒粒子结构 | 第22页 |
| ·CSFV的理化特性 | 第22-23页 |
| ·CSFV的培养特性 | 第23-24页 |
| ·CSFV的抗原性、毒力和分型 | 第24-25页 |
| ·猪瘟病毒的进化和遗传分型 | 第25-26页 |
| ·病毒的致病机制研究进展 | 第26-28页 |
| ·CSFV感染对外周血细胞亚群的影响 | 第26页 |
| ·CSFV诱导的白细胞减少的机制 | 第26-27页 |
| ·CSFV感染的靶细胞 | 第27页 |
| ·单核细胞在CSFV感染中的作用 | 第27-28页 |
| ·病毒的分子生物学研究进展 | 第28-33页 |
| ·CSFV基因组结构 | 第28-29页 |
| ·CSFV的编码蛋白及其功能 | 第29-33页 |
| 试验研究 | 第33-69页 |
| 第三章 猪瘟分子流行病学调查 | 第33-43页 |
| ·材料与方法 | 第33-38页 |
| ·疑似猪瘟病料 | 第33页 |
| ·引物的设计与合成 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33-34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| ·RNA提取 | 第34页 |
| ·RT-PCR和nPCR | 第34-35页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第35页 |
| ·纯化回收DNA片段 | 第35页 |
| ·纯化产物与pGEM-T Easy Vector连接 | 第35-36页 |
| ·新鲜感受态细胞的制备(CaCl2法) | 第36页 |
| ·连接产物的转化 | 第36-37页 |
| ·重组质粒的提取 | 第37页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第37-38页 |
| ·核酸序列分析和同源性比较 | 第38页 |
| ·结果 | 第38-40页 |
| ·RT-PCR及nPCR | 第38页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第38页 |
| ·目的基因的核苷酸序列及推导的氨基酸序列的同源性比较 | 第38页 |
| ·CSFV系统发生树的构建 | 第38-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第四章 猪瘟病毒E2基因主要抗原区在大肠杆菌中的表达 | 第43-53页 |
| ·材料和方法 | 第43-48页 |
| ·毒株 | 第43页 |
| ·菌株和质粒 | 第43页 |
| ·酶和试剂 | 第43-44页 |
| ·仪器与设备 | 第44页 |
| ·引物的设计与合成 | 第44页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第44页 |
| ·E2基因主要抗原区的获取 | 第44页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第44-45页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第45-1945页 |
| ·表达产物的检测 | 第1945-48页 |
| ·结果 | 第48-50页 |
| ·E2基因主要抗原区的获取 | 第48页 |
| ·重组表达载体的鉴定 | 第48页 |
| ·E2蛋白主要抗原区在大肠杆菌中的诱导表达 | 第48页 |
| ·表达产物的检测 | 第48-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 第五章 猪瘟病毒E2重组蛋白的变性、复性的研究 | 第53-60页 |
| ·材料与方法 | 第53-55页 |
| ·试剂 | 第53页 |
| ·主要仪器 | 第53页 |
| ·提取包涵体相关溶液的配制 | 第53-54页 |
| ·对表达蛋白基因的抗原优势表位分析 | 第54页 |
| ·重组E2工程菌的制备 | 第54页 |
| ·包涵体的制备与蛋白质的变性溶解 | 第54页 |
| ·E2蛋白的复性 | 第54页 |
| ·E2复性蛋白浓度、纯度的测定 | 第54-55页 |
| ·复性蛋白的反应活性测定 | 第55页 |
| ·结果 | 第55-57页 |
| ·C株、LT株糖蛋白的抗原表位优势图 | 第55页 |
| ·包涵体的分离 | 第55-56页 |
| ·包涵体的变性 | 第56页 |
| ·包涵体的复性 | 第56页 |
| ·E2复性蛋白浓度、纯度的测定 | 第56页 |
| ·复性蛋白的免疫活性测定 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| ·小结 | 第59-60页 |
| 第六章 以重组E2蛋白为抗原建立检测猪瘟病毒抗体间接ELISA方法的研究 | 第60-69页 |
| ·材料和方法 | 第60-62页 |
| ·抗原 | 第60页 |
| ·试剂及其耗材 | 第60页 |
| ·所用溶液的配制 | 第60-61页 |
| ·ELISA方法的建立 | 第61页 |
| ·特异性试验 | 第61-62页 |
| ·重复性试验 | 第62页 |
| ·敏感性试验 | 第62页 |
| ·与用猪瘟全病毒建立的ELISA试剂盒、间接血凝试剂盒进行比较 | 第62页 |
| ·临床血清样品的检测 | 第62页 |
| ·稳定性试验 | 第62页 |
| ·结果 | 第62-67页 |
| ·ELISA最佳工作条件的确定 | 第62-64页 |
| ·间接ELISA方法阴阳性临界值的确定 | 第64-65页 |
| ·ELISA特异性试验 | 第65页 |
| ·重复性试验 | 第65页 |
| ·敏感性试验 | 第65-66页 |
| ·与用猪瘟全病毒建立的ELISA、间接血凝试剂盒的比较试验 | 第66-67页 |
| ·临床血清样品的检测 | 第67页 |
| ·稳定性试验 | 第67页 |
| ·讨论 | 第67-68页 |
| ·小结 | 第68-69页 |
| 结 论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-77页 |
| 致 谢 | 第77-78页 |
| 作 者 简 介 | 第78页 |
