囊胚注射转基因ES细胞制作嵌合体的研究
| 前言 | 第1-8页 |
| 1 材料与方法 | 第8-11页 |
| ·材料 | 第8-9页 |
| ·实验动物 | 第8页 |
| ·ES细胞 | 第8页 |
| ·主要试剂 | 第8页 |
| ·主要设备 | 第8页 |
| ·主要溶液配制 | 第8-9页 |
| ·方法 | 第9-11页 |
| ·饲养层的制备 | 第9页 |
| ·ES细胞的传代培养 | 第9页 |
| ·小鼠胚胎的收集及培养 | 第9页 |
| ·注射针、持卵针及移胚针的制作 | 第9页 |
| ·ES细胞的显微注射 | 第9页 |
| ·胚胎移植 | 第9-10页 |
| ·嵌合鼠的判定及嵌合鼠的交配 | 第10-11页 |
| 2 结果 | 第11-13页 |
| ·小鼠胚胎成纤维细胞饲养层 | 第11页 |
| ·ES细胞的活性处理 | 第11页 |
| ·囊胚的显微注射和恢复 | 第11页 |
| ·嵌合体小鼠的产生及毛色分析 | 第11-13页 |
| 3 分析与讨论 | 第13-18页 |
| ·非技术性因素对嵌合体获得率的影响 | 第13-14页 |
| ·ES细胞传代次数过高 | 第13页 |
| ·季节因素的影响 | 第13页 |
| ·受体胚胎的影响 | 第13-14页 |
| ·技术性因素对嵌合体获得率的影响 | 第14-16页 |
| ·饲养层对嵌合体获得率的影响 | 第14-15页 |
| ·ES细胞核型的影响 | 第15页 |
| ·ES细胞数目的影响 | 第15-16页 |
| ·同期发情的代孕鼠嵌合体获得的影响 | 第16页 |
| ·判定嵌合体方法的影响 | 第16页 |
| ·其它影响因素 | 第16-18页 |
| 4 结论 | 第18-19页 |
| 参考文献 | 第19-22页 |
| 附录 | 第22-32页 |
| 附录一 主要溶液配制的方法 | 第22页 |
| 附录二 小鼠胎儿成纤维细胞饲养层的制备 | 第22-25页 |
| 附录三 胚胎干细胞(S_8)的传代培养 | 第25-26页 |
| 附录四 小鼠胚胎的收集及培养 | 第26页 |
| 附录五 注射针、持卵针及移胚针的制作 | 第26-28页 |
| 附录六 ES细胞的显微注射 | 第28-30页 |
| 附录七 胚胎移植 | 第30-32页 |
| 文献综述一 | 第32-46页 |
| 文献综述二 | 第46-61页 |
| 附图 | 第61-64页 |
