| 缩写表 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-34页 |
| 第一章 酵母双杂交技术的进展及应用 | 第12-26页 |
| 1 酵母双杂交的原理 | 第12-13页 |
| 2 酵母双杂交技术的进展 | 第13-21页 |
| ·酵母单杂交 | 第13-14页 |
| ·酵母三杂交 | 第14-15页 |
| ·反式双杂交 | 第15-16页 |
| ·分裂杂交系统 | 第16-17页 |
| ·Sos拯救系统 | 第17页 |
| ·分裂泛素系统 | 第17-18页 |
| ·建立在RNA聚合酶Ⅲ基础上的双杂交 | 第18-19页 |
| ·双诱饵系统 | 第19-20页 |
| ·双杂交酶(two-hybridzyme) | 第20-21页 |
| 3 其它宿主系统的双杂交 | 第21-23页 |
| ·细菌双杂交 | 第21-22页 |
| ·哺乳动物双杂交 | 第22-23页 |
| 4 酵母双杂交在蛋白质组学中的应用 | 第23-24页 |
| 5 酵母双杂交在植物中的应用 | 第24-25页 |
| 6 展望 | 第25-26页 |
| 第二章 植物钙调素结合蛋白研究进展 | 第26-34页 |
| 1 植物CaM概述 | 第26-27页 |
| 2 钙调素结合蛋白的结构 | 第27-28页 |
| ·Ca~(2+)非依赖型的CaM结合结构 | 第27-28页 |
| ·Ca~(2+)依赖型的CaM结合结构 | 第28页 |
| 3 植物钙调素结合蛋白的功能 | 第28-32页 |
| ·调节代谢 | 第29页 |
| ·参与热激反应 | 第29-30页 |
| ·参与缺氧和盐的反应 | 第30页 |
| ·对重金属的反应 | 第30-31页 |
| ·参与病原抗性反应 | 第31页 |
| ·参与激素信号转导 | 第31-32页 |
| ·未知功能 | 第32页 |
| 4 结论与展望 | 第32-34页 |
| 第二部分 研究论文 | 第34-80页 |
| 前言 | 第34-36页 |
| 第三章 利用酵母双杂交系统筛选与G蛋白相互作用的蛋白 | 第36-61页 |
| 1 双杂交文库的筛选 | 第36-50页 |
| ·材料 | 第36-39页 |
| ·方法 | 第39-44页 |
| ·结果 | 第44-50页 |
| ·诱饵蛋白表达载体的构建及序列测定 | 第44-46页 |
| ·诱饵蛋白Gα的自激活特性鉴定 | 第46页 |
| ·拟南芥cDNA文库的筛选 | 第46-47页 |
| ·阳性克隆相互作用特异性的鉴定 | 第47-48页 |
| ·阳性克隆中cDNA片段的序列测定 | 第48-49页 |
| ·序列比对 | 第49-50页 |
| ·小结 | 第50页 |
| 2 CA编码区全长cDNA的克隆，成熟CA基因的克隆及酵母双杂交检测 | 第50-57页 |
| ·材料 | 第50-51页 |
| ·方法 | 第51-52页 |
| ·结果 | 第52-56页 |
| ·CA编码区全长cDNA的克隆 | 第52-53页 |
| ·酵母双杂交检测CA全长与G蛋白的相互作用 | 第53-54页 |
| ·成熟CA基因亚克隆至pGADT7 | 第54页 |
| ·酵母双杂交检测成熟CA与G蛋白的相互作用 | 第54-55页 |
| ·含有转运肽C端28个氨基酸的成熟CA基因(28CAm)亚克隆至pGADT7 | 第55页 |
| ·酵母双杂交检测含有转运肽C端28个氨基酸的成熟CA(28CAm)与G蛋白的相互作用 | 第55-56页 |
| ·小结 | 第56-57页 |
| 3 讨论 | 第57-61页 |
| ·酵母双杂交的基本原理及优缺点 | 第57-58页 |
| ·碳酸酐酶与G蛋白的相互作用 | 第58-59页 |
| ·酵母双杂交方法的某些体会 | 第59-61页 |
| 第四章 利用酵母双杂交系统筛选与CaM相互作用的蛋白 | 第61-80页 |
| 1 双杂交文库的筛选 | 第61-68页 |
| ·材料 | 第61页 |
| ·方法 | 第61页 |
| ·结果 | 第61-67页 |
| ·诱饵蛋白表达载体的构建及序列测定 | 第61-63页 |
| ·诱饵蛋白ACaM2的自激活特性鉴定 | 第63页 |
| ·拟南芥cDNA文库的筛选 | 第63-64页 |
| ·阳性克隆相互作用特异性的鉴定 | 第64-66页 |
| ·阳性克隆中cDNA片段的序列测定 | 第66-67页 |
| ·序列比对 | 第67页 |
| ·小结 | 第67-68页 |
| 2 免疫共沉淀鉴定ACaM2与KED样蛋白的结合 | 第68-72页 |
| ·材料 | 第68-69页 |
| ·方法 | 第69-70页 |
| ·结果 | 第70-71页 |
| ·用于免疫共沉淀的重组质粒pGADT7-KED3的构建 | 第70-71页 |
| ·免疫共沉淀 | 第71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| 3 KED样蛋白编码区全长cDNA的克隆，酵母双杂交检测及序列分析 | 第72-77页 |
| ·材料 | 第72页 |
| ·方法 | 第72页 |
| ·结果 | 第72-76页 |
| ·拟南芥KED样蛋白编码区全长cDNA的克隆 | 第72-74页 |
| ·KED样蛋白与ACaM2相互作用的酵母双杂交检测 | 第74-75页 |
| ·KED样蛋白的CaM结合域的序列分析 | 第75-76页 |
| ·小结 | 第76-77页 |
| 4 讨论 | 第77-80页 |
| ·CaM与KED的相互作用 | 第77-78页 |
| ·采用酵母双杂交系统寻找胞外CaM受体的探讨 | 第78-80页 |
| 结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-94页 |
| 附录： | 第94-101页 |
| 第五章 胞外CaM对rbcS3A基因表达调控的部分研究 | 第94-101页 |
| 1 材料 | 第94-95页 |
| 2 方法 | 第95-96页 |
| 3 结果 | 第96-100页 |
| ·Actin杂交探针的获得 | 第96-98页 |
| ·Actin Northern blot | 第98-99页 |
| ·CaM抗体+红光处理对rbcS3A表达的影响 | 第99-100页 |
| 4 小结 | 第100-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
| 个人简历 | 第102页 |
