| 摘要 | 第1-8页 |
| 1 中文摘要 | 第5-6页 |
| 2 英文摘要 | 第6-8页 |
| 引言与文献综述 | 第8-29页 |
| 1 生物技术在虫害控制上的应用 | 第8-13页 |
| 2 昆虫神经肽的研究进展 | 第13-16页 |
| 3 保幼激素抑制素的研究进展 | 第16-19页 |
| 4 利用大肠杆菌获取重组蛋白的研究进展 | 第19-21页 |
| 5 影响大肠杆菌中外源基因表达的因素 | 第21-25页 |
| 6 基因串联体拼接的研究 | 第25-26页 |
| 7 大肠杆菌PET表达系统 | 第26-27页 |
| 8 本实验的研究目的和意义 | 第27-28页 |
| 9 本实验的技术路线 | 第28-29页 |
| 材料与方法 | 第29-42页 |
| 1 材料与试剂 | 第29页 |
| ·质粒与菌种 | 第29页 |
| ·试剂 | 第29页 |
| ·引物的合成与DNA测序 | 第29页 |
| 2 Grb-AST_3串联体的拼接 | 第29-35页 |
| ·引物的设计与合成 | 第29页 |
| ·采用改进的“自身引物模板法”拼接Grb-AST_3串联体 | 第29-35页 |
| ·Grb-AST_3串联体的拼接 | 第30-31页 |
| ·Grb-AST_3串联体的回收 | 第31页 |
| ·Grb-AST_3串联体的克隆 | 第31-34页 |
| ·重组子的筛选与鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组阳性克隆的保存 | 第35页 |
| ·重组子测序 | 第35页 |
| 3 Grb-AST_3串联体的表达 | 第35-42页 |
| ·表达载体的构建 | 第36-38页 |
| ·表达载体的扩增 | 第36页 |
| ·表达载体线性化 | 第36页 |
| ·Grb-AST_3串联体的制备 | 第36-37页 |
| ·线性化载体与Grb-AST_3串联体的连接 | 第37页 |
| ·连接产物的转化 | 第37-38页 |
| ·重组子的筛选与鉴定 | 第38页 |
| ·阳性重组克隆的保存 | 第38页 |
| ·阳性重组克隆的保存 | 第38页 |
| ·Grb-AST_3串联体的表达 | 第38-40页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE | 第40-42页 |
| 结果与分析 | 第42-46页 |
| 1 Grb-AST_3串联体的拼接 | 第42-43页 |
| 2 PCR产物的克隆 | 第43-44页 |
| 3 Grb-AST_3串联体的表达分析 | 第44-46页 |
| ·表达载体的构建 | 第44-45页 |
| ·表达分析 | 第45-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 讨论 | 第47-50页 |
| 1 Grb-AST_3串联体的构建 | 第47页 |
| 2 Grb-AST_3串联体的表达 | 第47-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 附图 | 第55-63页 |
| 致谢 | 第63页 |