| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-9页 |
| 前言 | 第9-26页 |
| 一、 渗透调节研究概况 | 第9-13页 |
| 1 细胞对渗透胁迫的响应 | 第9-11页 |
| 2 不同生物响应渗透胁迫的策略 | 第11-13页 |
| 二、 相容溶质 | 第13-16页 |
| 1 相容溶质的性质、种类和功能 | 第13-14页 |
| 2 相容溶质的作用机制 | 第14-16页 |
| (1) 表面结合假说 | 第15页 |
| (2) 溶质排除假说 | 第15-16页 |
| 三、 枯草芽孢杆菌的渗透调节 | 第16-24页 |
| 1 σ~B控制的通用应激系统 | 第17页 |
| 2 枯草芽孢杆菌对高渗胁迫的响应 | 第17-24页 |
| (1) 高渗胁迫的起始响应:K~+的吸收 | 第17-18页 |
| (2) 高渗胁迫的次级响应:相容溶质的积累 | 第18-24页 |
| 1 ) 相容溶质的合成 | 第19-22页 |
| 2 ) 相容溶质的吸收 | 第22-23页 |
| 3 ) 枯草芽孢杆菌对低渗胁迫的响应 | 第23-24页 |
| 四、 渗透调节的研究意义 | 第24-25页 |
| 五、 本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 材料与方法 | 第26-35页 |
| 一、 材料 | 第26-28页 |
| 1 菌株 | 第26页 |
| 2 载体 | 第26页 |
| 3 试剂 | 第26页 |
| 4 培养基 | 第26页 |
| 5 主要溶液 | 第26-28页 |
| 二、 方法 | 第28-35页 |
| 1 NTG诱变及筛选 | 第28页 |
| 2 突变株细胞内自由脯氨酸含量的测定 | 第28-29页 |
| 3 突变株proBA基因的克隆及序列测定 | 第29-33页 |
| (1) 总DNA的制备 | 第29-30页 |
| (2) 突变株DNA的EcoRI限制性内切酶反应 | 第30页 |
| (3) DNA的连接反应 | 第30页 |
| (4) DNA纯化和回收 | 第30-31页 |
| (5) 引物设计及突变株proBA基因的PCR反应 | 第31-32页 |
| (6) 大肠杆菌感受态制备及转化 | 第32页 |
| (7) 重组质粒的鉴定 | 第32-33页 |
| (8) DNA序列测定和分析 | 第33页 |
| 4 proB基因的功能鉴定 | 第33-35页 |
| (1) 表达引物的设计和PCR反应 | 第33页 |
| (2) PCR产物和表达载体的双酶切 | 第33-34页 |
| (3) proB基因的功能互补 | 第34页 |
| (4) proB基因对大肠杆菌耐盐能力的影响 | 第34-35页 |
| 结果与讨论 | 第35-52页 |
| 一、 NTG诱变及筛选 | 第35-36页 |
| 二、 突变菌株细胞内自由脯氨酸含量的分析 | 第36-37页 |
| 三、 突变菌株proBA基因的克隆及序列分析 | 第37-49页 |
| 1 总DNA的提取和EcoRI限制性内切酶反应 | 第37页 |
| 2 突变菌株proBA基因的PCR反应 | 第37-38页 |
| 3 重组质粒的筛选 | 第38-40页 |
| 4 proBA基因的分析 | 第40-49页 |
| (1) proBA基因的序列分析 | 第40-43页 |
| (2) ProB蛋白质保守区域及突变位点的分析 | 第43-47页 |
| (3) proBA基因的组织方式 | 第47-49页 |
| 四、 proB基因的功能鉴定 | 第49-52页 |
| 1 含有突变菌株与野生菌株proB基因重组质粒的构建 | 第49-50页 |
| 2 proB基因的功能互补 | 第50-51页 |
| 3 proB基因对大肠杆菌耐盐能力的影响 | 第51-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 研究生期间发表的论文 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |