| 致谢 | 第3-4页 |
| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-21页 |
| 1.1 研究背景及意义 | 第10-11页 |
| 1.2 植物组织培养技术 | 第11-15页 |
| 1.2.1 植物组织培养的技术原理 | 第11页 |
| 1.2.2 植物组织培养类型 | 第11-12页 |
| 1.2.3 植物组织培养所需营养与环境条件 | 第12-14页 |
| 1.2.4 组织培养技术的应用 | 第14-15页 |
| 1.2.4.1 在植物脱毒中的应用 | 第14页 |
| 1.2.4.2 在植物离体快繁中的应用 | 第14页 |
| 1.2.4.3 在植物育种中的应用 | 第14-15页 |
| 1.2.4.4 在植物种质资源保存中的应用 | 第15页 |
| 1.2.4.5 在次生代谢产物生产中的应用 | 第15页 |
| 1.3 植物遗传转化技术 | 第15-20页 |
| 1.3.1 植物遗传转化方法 | 第16-17页 |
| 1.3.1.1 基因枪法 | 第16页 |
| 1.3.1.2 电激法 | 第16页 |
| 1.3.1.3 PEG法 | 第16页 |
| 1.3.1.4 脂质体法 | 第16页 |
| 1.3.1.5 农杆菌介导法 | 第16-17页 |
| 1.3.2 影响农杆菌遗传转化效率的因素 | 第17-18页 |
| 1.3.2.1 根癌农杆菌的类型 | 第17页 |
| 1.3.2.2 外植体基因型 | 第17页 |
| 1.3.2.3 菌液浓度与侵染时间 | 第17-18页 |
| 1.3.2.4 预培养及共培养时间 | 第18页 |
| 1.3.2.5 vir基因的活化 | 第18页 |
| 1.3.3 植物遗传转化的检测 | 第18-20页 |
| 1.3.3.1 外源基因整合水平的鉴定 | 第18-19页 |
| 1.3.3.2 外源基因转录水平的鉴定 | 第19页 |
| 1.3.3.3 外源基因蛋白表达的鉴定 | 第19-20页 |
| 1.4 杨柳科植物遗传转化研究现状 | 第20-21页 |
| 第二章 簸箕柳无菌植株的获得 | 第21-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.2 实验设计方案 | 第21-22页 |
| 2.2.1 外植体的消毒 | 第21页 |
| 2.2.2 腋芽诱导实验 | 第21-22页 |
| 2.2.2.1 基本培养基的选择 | 第21-22页 |
| 2.2.2.2 不同激素配比对腋芽诱导的影响 | 第22页 |
| 2.2.3 生根培养 | 第22页 |
| 2.2.4 继代与增殖培养 | 第22页 |
| 2.2.5 培养条件 | 第22页 |
| 2.2.6 数据统计指标和计算方法 | 第22页 |
| 2.3 结果与分析 | 第22-28页 |
| 2.3.1 外植体的消毒处理 | 第22-23页 |
| 2.3.1.1 不同处理时间对簸箕柳外植体的影响 | 第22-23页 |
| 2.3.2 腋芽诱导实验 | 第23-25页 |
| 2.3.2.1 基本培养基的确定 | 第23-24页 |
| 2.3.2.2 不同激素配比诱导腋芽 | 第24-25页 |
| 2.3.3 生根培养 | 第25-26页 |
| 2.3.4 继代增殖培养 | 第26-28页 |
| 2.4 讨论 | 第28-29页 |
| 2.4.1 外植体消毒方式的探讨 | 第28页 |
| 2.4.2 污染问题的探讨 | 第28-29页 |
| 第三章 簸箕柳下胚轴不定芽再生体系的建立 | 第29-38页 |
| 3.1 实验材料 | 第29页 |
| 3.2 实验设计方案 | 第29-30页 |
| 3.2.1 下胚轴愈伤诱导实验 | 第29页 |
| 3.2.1.1 光培养与暗培养对愈伤诱导的影响 | 第29页 |
| 3.2.1.2 不同激素配比对下胚轴愈伤组织诱导的影响 | 第29页 |
| 3.2.2 不同激素组合对下胚轴不定芽再生的影响 | 第29页 |
| 3.2.3 不定芽生根培养 | 第29页 |
| 3.2.4 不同激素配比对下胚轴愈伤继代增殖的影响 | 第29-30页 |
| 3.2.5 培养条件 | 第30页 |
| 3.2.6 数据统计方法 | 第30页 |
| 3.3 结果与分析 | 第30-35页 |
| 3.3.1 种子消毒实验 | 第30-31页 |
| 3.3.2 光培养和暗培养对下胚轴愈伤诱导的影响 | 第31-32页 |
| 3.3.3 不同激素配比对下胚轴愈伤组织诱导的影响 | 第32-33页 |
| 3.3.4 不同浓度6-BA、TDZ对再生分化的影响 | 第33页 |
| 3.3.5 不定芽生根培养 | 第33-34页 |
| 3.3.6 不同激素配比对下胚轴愈伤继代增殖的影响 | 第34-35页 |
| 3.4 讨论 | 第35-38页 |
| 3.4.1 外植体褐化的探讨 | 第35页 |
| 3.4.2 激素的作用 | 第35-38页 |
| 第四章 簸箕柳农杆菌侵染效果初探 | 第38-47页 |
| 4.1 实验材料与试剂 | 第38-40页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第38页 |
| 4.1.2 农杆菌菌株和质粒载体 | 第38-39页 |
| 4.1.3 微生物及植物培养基 | 第39-40页 |
| 4.1.4 抗生素 | 第40页 |
| 4.1.5 质粒提取试剂 | 第40页 |
| 4.1.6 GUS组织化学染色试剂 | 第40页 |
| 4.2 实验方法 | 第40-44页 |
| 4.2.1 工程菌液构建 | 第40-42页 |
| 4.2.1.1 农杆菌感受态的制备 | 第40-41页 |
| 4.2.1.2 质粒载体转化农杆菌 | 第41页 |
| 4.2.1.3 裂解法提取质粒 | 第41页 |
| 4.2.1.4 菌液PCR及质粒酶切检测 | 第41-42页 |
| 4.2.2 农杆菌转化簸箕柳 | 第42-43页 |
| 4.2.2.1 受体材料预培养 | 第42-43页 |
| 4.2.2.2 侵染菌液的制备 | 第43页 |
| 4.2.2.3 侵染和共培养 | 第43页 |
| 4.2.2.4 选择培养阶段 | 第43页 |
| 4.2.2.5 GUS组织化学检测 | 第43页 |
| 4.2.3 实验设计 | 第43-44页 |
| 4.2.3.1 不同报告基因对侵染效果检测的影响 | 第43-44页 |
| 4.2.3.2 不同受体对农杆菌侵染效果的影响 | 第44页 |
| 4.3 实验结果 | 第44-45页 |
| 4.3.1 菌液PCR及质粒酶切检测 | 第44-45页 |
| 4.3.2 不同报告基因对侵染效果检测的影响 | 第45页 |
| 4.3.3 不同受体对农杆菌侵染效果的影响 | 第45页 |
| 4.4 讨论 | 第45-47页 |
| 4.4.1 遗传转化效率相关影响因素的分析 | 第45-46页 |
| 4.4.2 受体材料的选择 | 第46-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 图版说明 | 第48-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
