| 中文摘要 | 第1-3页 |
| 英文摘要 | 第3-6页 |
| 一、 文献综述 | 第6-11页 |
| 1．1、 概述 | 第6-7页 |
| 1．2、 真核生物NO_（3-）转运蛋白基因研究进展 | 第7-11页 |
| 二、 5’、3’-RACE | 第11-19页 |
| 2．1、 材料与试剂 | 第11页 |
| 2．2、 5’、3’-RACE方法 | 第11-13页 |
| 2．2．1、 植物材料的培养 | 第11页 |
| 2．2．2、 引物设计 | 第11-12页 |
| 2．2．3、 缺氮诱导小麦根总RNA的提取 | 第12页 |
| 2．2．4、 3’-RACE实验 | 第12-13页 |
| 2．2．4．1、 :RT reaction | 第12页 |
| 2．2．4．2、 PCR反应 | 第12-13页 |
| 2．2．5、 5’-RACE实验 | 第13页 |
| 2．3 实验结果 | 第13-19页 |
| 2．3．1、 植物材料的培养 | 第13页 |
| 2．3．2、 RNA提取结果 | 第13页 |
| 2．3．3、 3’-RACE实验结果 | 第13页 |
| 2．2．4、 5’-RACE实验结果 | 第13-15页 |
| 2．4、 结果分析 | 第15页 |
| 2．4．1、 RACE结果 | 第15页 |
| 2．4．2、 TaNRT2;1蛋白的一级结构预测 | 第15页 |
| 2．4．3、 TaNRT2；1蛋白的二级结构预测 | 第15-19页 |
| 三、 融合蛋白的诱导 | 第19-28页 |
| 3．1、 E．coli JM109中pGEX-2T-AF融合蛋白的诱导及检测 | 第19-20页 |
| 3．1．1、 融合蛋白的诱导表达 | 第19页 |
| 3．1．2、 融合蛋白的SDS-PAGE | 第19页 |
| 3．1．3、 考染 | 第19页 |
| 3．1．4、 pGEX-2T-AF融合蛋白的回收 | 第19-20页 |
| 3．2、 pGEX-2T-AF转化E．coli BL21及融合蛋白的诱导 | 第20-21页 |
| 3．2．1、 pGEX-2T-AF重组质粒的提取 | 第20页 |
| 3．2．2、 BL21感受态细菌的制备 | 第20-21页 |
| 3．2．3、 重组质粒（pGEX-2T-AF）的转化与抗性筛选 | 第21页 |
| 3．3、 pET32a（+）-AF重组质粒的构建及融合蛋白的诱导 | 第21-23页 |
| 3．3．1、 pGEX-2T-AF重组质粒及pET32a（+）的提取 | 第21页 |
| 3．3．2、 pGEX-2T-AF重组质粒及pET32a（+）的双酶切 | 第21页 |
| 3．3．3、 酶切产物的回收 | 第21-22页 |
| 3．3．4、 AF片段与pET32a（+）的连接 | 第22页 |
| 3．3．5、 连接产物转化E．coli BL21与抗性筛选 | 第22-23页 |
| 3．4、 结果分析 | 第23-28页 |
| 3．4．1、 pGEX-2T-AF融合蛋白在E．coli JM109中的诱导及回收 | 第23-26页 |
| 3．4．2、 pET32a（+）-AF重组质粒的构建 | 第26-28页 |
| 讨 论 | 第28-30页 |
| 展 望 | 第30-31页 |
| 致 谢 | 第31-32页 |
| 参考文献 | 第32-35页 |
| 附 录 | 第35-40页 |
