| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 1． 前言 | 第10-21页 |
| 1．1 细胞凋亡简介 | 第10-12页 |
| 1．1．1 细胞凋亡的发现及特征 | 第10页 |
| 1．1．2 细胞凋亡与细胞程序性死亡的关系 | 第10-11页 |
| 1．1．3 细胞凋亡的生物学意义 | 第11页 |
| 1．1．4 细胞凋亡的调控 | 第11页 |
| 1．1．5 细胞凋亡的检测方法 | 第11-12页 |
| 1．2 卵泡闭锁简介 | 第12-14页 |
| 1．2．1 卵泡闭锁的含义 | 第12-13页 |
| 1．2．2 卵泡闭锁是生殖细胞退化方式之一 | 第13-14页 |
| 1．2．3 卵泡闭锁的形态和生化特征 | 第14页 |
| 1．3 卵泡闭锁的实质是颗粒细胞凋亡 | 第14-15页 |
| 1．4 卵泡闭锁过程中颗粒细胞凋亡的影响因素研究进展 | 第15-19页 |
| 1．4．1 激素对颗粒细胞凋亡的影响 | 第15-17页 |
| 1．4．1．1 性腺激素对卵泡闭锁、颗粒细胞凋亡的影响 | 第15-16页 |
| 1．4．1．2 类固醇激素对卵泡闭锁、颗粒细胞凋亡的影响 | 第16页 |
| 1．4．1．3 其它激素对卵泡闭锁、颗粒细胞凋亡的影响 | 第16-17页 |
| 1．4．2 卵巢内IGF体系对卵泡闭锁、颗粒细胞凋亡的影响 | 第17-19页 |
| 1．4．2．1 IGFs的分子生物学及其对卵泡发育的影响 | 第17-18页 |
| 1．4．2．2 IGF-Rs、IGFBPs分子生物学及其对卵泡发育的影响 | 第18-19页 |
| 1．4．3． 其它细胞因子对卵泡闭锁、颗粒细胞凋亡的影响 | 第19页 |
| 1．4．3．1 EGF/TGFα和bFGF对颗粒细胞凋亡的影响 | 第19页 |
| 1．4．3．2 IL-1β和IL-6对颗粒细胞凋亡的影响 | 第19页 |
| 1．5 本次研究的目的、意义及主要研究项目 | 第19-21页 |
| 1．5．1 本次研究的目的及意义 | 第19-20页 |
| 1．5．2 主要研究项目 | 第20-21页 |
| 2． 材料与方法 | 第21-26页 |
| 2．1 体外实验用卵泡的获取及分类 | 第21页 |
| 2．2 发情周期各阶段的划分及确定方法 | 第21页 |
| 2．3 性未成熟母猪的确定 | 第21页 |
| 2．4 性成熟母猪PMSG的注射及实验组对照组的设立 | 第21页 |
| 2．5 性未成熟母猪PMSG的注射及实验组对照组设立 | 第21-22页 |
| 2．6 体内实验卵巢的获取及处理方法 | 第22页 |
| 2．7 体内实验卵泡的分类、计数和颗粒细胞、卵泡液的获取 | 第22页 |
| 2．8 血清的获取及处理 | 第22页 |
| 2．9 体外实验用颗粒细胞的获取 | 第22页 |
| 2．10 卵巢及卵泡的石蜡组织学切片制作 | 第22页 |
| 2．11 透射电镜样品制备及观察 | 第22-23页 |
| 2．12 卵巢及卵泡石蜡组织学切片的H．E染色 | 第23页 |
| 2．13 卵泡生理状态的组织学判定标准 | 第23页 |
| 2．14 卵巢及卵泡石蜡组织学切片的TUNEL原位标记 | 第23页 |
| 2．15 颗粒细胞涂片的H．E染色 | 第23页 |
| 2．16 颗粒细胞涂片H．E染色后健康细胞与凋亡细胞判定标准 | 第23-24页 |
| 2．17 颗粒细胞涂片的TUNEL原位检测 | 第24页 |
| 2．18 颗粒细胞的DNA分析 | 第24页 |
| 2．19 培养液的配制 | 第24-25页 |
| 2．20 颗粒细胞的培养 | 第25页 |
| 2．21 培养液的收集 | 第25页 |
| 2．22 激素的测定 | 第25页 |
| 2．23 数据处理 | 第25-26页 |
| 3． 结果 | 第26-46页 |
| 3．1 猪卵泡闭锁过程中颗粒细胞凋亡现象的检验及实验手段研究结果 | 第26-28页 |
| 3．1．1 直观形态观察法判定卵泡生理状态准确性的检测结果 | 第26页 |
| 3．1．2 卵泡闭锁过程中颗粒细胞凋亡现象研究 | 第26-27页 |
| 3．1．2．1 卵泡超微结构分析 | 第26-27页 |
| 3．1．2．2 颗粒细胞DNA电泳分析结果 | 第27页 |
| 3．1．2．3 卵巢及单个卵泡的TUNEL法原位标记结果 | 第27页 |
| 3．1．3 细胞涂片H．E染色法判定凋亡与TUNEL法判定凋亡的相关分析 | 第27-28页 |
| 3．1．4 健康卵泡与闭锁卵泡的颗粒细胞凋亡比例测定 | 第28页 |
| 3．2 发情周期不同阶段猪卵泡颗粒细胞凋亡规律研究结果 | 第28-32页 |
| 3．2．1 发情周期不同阶段卵巢表面各类卵泡数量的变化 | 第28页 |
| 3．2．2 发情周期不同阶段卵巢表面各类卵泡中颗粒细胞的凋亡比例 | 第28-29页 |
| 3．2．3 发情周期不同阶段卵巢组织学切片检测卵泡闭锁及颗粒细胞凋亡结果 | 第29页 |
| 3．2．4 发情周期各阶段血清孕酮及雌激素水平的变化 | 第29-31页 |
| 3．2．5 发情周期不同阶段卵巢中各类卵泡液中孕酮的浓度 | 第31-32页 |
| 3．3 发情间期注射PMSG对猪卵泡发育及颗粒细胞凋亡影响的研究结果 | 第32-36页 |
| 3．3．1 注射PMSG后不同时间卵巢表面各类卵泡数量的变化 | 第32页 |
| 3．3．2 注射PMSG后不同阶段卵巢表面各类卵泡中颗粒细胞的凋亡比例 | 第32-33页 |
| 3．3．3 PMSG注射后不同时间及情期相应阶段血清类固醇激素的变化 | 第33-36页 |
| 3．3．4 PMSG注射后不同时间及情期相应阶段各类卵泡液孕酮浓度 | 第36页 |
| 3．3．5 PMSG注射后不同时间卵巢组织学切片检测卵泡闭锁和颗粒细胞凋亡的结果 | 第36页 |
| 3．4 性未成熟小母猪注射PMSG对卵泡闭锁及颗粒细胞凋亡影响的研究结果 | 第36-38页 |
| 3．4．1 注射PMSG后不同时间卵巢表面各类卵泡数量的变化 | 第36-37页 |
| 3．4．2 性未成熟仔猪注射PMSG后不同时间卵泡颗粒细胞凋亡比例 | 第37页 |
| 3．4．3 性未成熟仔猪注射PMSG后卵巢组织学切片H．E染色及TUNEL标记结果 | 第37-38页 |
| 3．4．4 性未成熟仔猪注射PMSG后血清类固醇激素水平的变化 | 第38页 |
| 3．4．5 性未成熟仔猪注射PMSG后各类卵泡的卵泡液孕酮浓度 | 第38页 |
| 3．5 性成熟母猪与性未成熟小母猪注射PMSG后卵泡闭锁及颗粒细胞凋亡的比较 | 第38-40页 |
| 3．5．1 卵巢表面卵泡数量的比较 | 第40页 |
| 3．5．2 各类卵泡颗粒细胞凋亡比例的比较 | 第40页 |
| 3．5．3 血清类固醇激素水平的比较 | 第40页 |
| 3．6 PMSG对体外培养的卵泡和颗粒细胞的细胞凋亡影响研究结果 | 第40-43页 |
| 3．6．1 不同浓度PMSG对体外培养卵泡颗粒细胞的细胞凋亡影响 | 第40-41页 |
| 3．6．2 颗粒细胞培养液中类固醇激素浓度 | 第41页 |
| 3．6．3 PMSG对体外培养的卵泡中颗粒细胞凋亡的影响 | 第41-43页 |
| 3．6．4 卵泡培养后培养液类固醇激素浓度 | 第43页 |
| 3．7 IGF-I对体外培养卵泡及颗粒细胞的细胞凋亡影响研究结果 | 第43-46页 |
| 3．7．1 IGF-I对体外培养卵泡颗粒细胞的细胞凋亡影响 | 第43-44页 |
| 3．7．2 IGF-I对颗粒细胞分泌类固醇激素的影响 | 第44-45页 |
| 3．7．3 IGF-I对培养卵泡颗粒细胞凋亡及分泌类固醇激素能力的影响 | 第45-46页 |
| 4． 讨论 | 第46-54页 |
| 4．1 直观形态观察判定卵泡生理状态的准确性与可行性 | 第46页 |
| 4．2 卵泡闭锁过程中颗粒细胞凋亡现象的确认 | 第46页 |
| 4．3 卵泡闭锁过程中细胞凋亡发生的范围及定量检测 | 第46-47页 |
| 4．4 利用颗粒细胞凋亡比例来判定卵泡生理状态 | 第47页 |
| 4．5 发情周期各阶段卵泡数量的变化及规律 | 第47-48页 |
| 4．6 发情周期各阶段卵泡闭锁与颗粒细胞凋亡的关系 | 第48页 |
| 4．7 发情周期各阶段血清中类固醇激素及卵泡液中类固醇激素水平 | 第48-49页 |
| 4．8 性成熟母猪PMSG处理后卵巢中各类卵泡的数量变化 | 第49-50页 |
| 4．9 性成熟母猪PMSG处理后各类卵泡颗粒细胞凋亡比例 | 第50页 |
| 4．10 性成熟母猪PMSG处理后外周血清及卵泡液类固醇激素水平问题 | 第50-51页 |
| 4．11 性未成熟母猪PMSG处理后卵巢中各类卵泡的数量变化 | 第51-52页 |
| 4．12 性未成熟母猪PMSG处理后各类卵泡中颗粒细胞凋亡发生比例 | 第52页 |
| 4．13 性未成熟母猪PMSG处理后血清及卵泡液中类固醇激素浓度变化 | 第52页 |
| 4．14 PMSG对培养卵泡及颗粒细胞的细胞凋亡影响 | 第52-53页 |
| 4．15 PMSG对卵泡及颗粒细胞分泌类固醇激素的影响 | 第53页 |
| 4．16 IGF-I对卵泡颗粒细胞凋亡的影响 | 第53页 |
| 4．17 IGF-I对体外培养卵泡及颗粒细胞的生理功能影响 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-65页 |
| 图版及图版说明 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 作者简介 | 第74页 |
