| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-17页 |
| 英文缩写索引 | 第17-19页 |
| 前言 | 第19-21页 |
| 第一部分 淫羊藿素减轻 CCL_4 致大鼠肝细胞损伤的实验研究 | 第21-36页 |
| 1 材料与方法 | 第21-27页 |
| ·实验材料 | 第21-23页 |
| ·主要化学药品和生物试剂 | 第21-22页 |
| ·实验动物 | 第22页 |
| ·主要溶液的配制 | 第22-23页 |
| ·主要实验仪器 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-27页 |
| ·大鼠肝细胞的获取及培养 | 第23-24页 |
| ·二步胶原酶灌流法获取大鼠肝细胞 | 第23-24页 |
| ·大鼠肝细胞的活力鉴定及培养 | 第24页 |
| ·大鼠肝细胞损伤模型的建立 | 第24页 |
| ·样本分组及药物处理流程 | 第24-25页 |
| ·MTT 法测定大鼠肝细胞活力 | 第25页 |
| ·自动生化分析仪测定大鼠肝细胞培养上清 ALT、AST | 第25页 |
| ·分光光度法测定大鼠肝细胞 MDA 含量、SOD 活力 | 第25-27页 |
| ·荧光显微镜观察大鼠肝细胞ROS 的变化 | 第27页 |
| ·统计学处理 | 第27页 |
| 2 结果 | 第27-32页 |
| ·大鼠肝细胞的活力鉴定及培养结果 | 第27页 |
| ·大鼠肝细胞CCL_4 损伤模型结果 | 第27-29页 |
| ·淫羊藿素对CCL_4 损伤大鼠肝细胞存活率的影响 | 第29页 |
| ·淫羊藿素对CCL_4 损伤大鼠肝细胞培养上清ALT、AST 的影响 | 第29-30页 |
| ·淫羊藿素对 CCL_4 损伤大鼠肝细胞大鼠肝细胞 MDA、SOD 的影响 | 第30页 |
| ·淫羊藿素对 CCL_4 损伤大鼠肝细胞大鼠肝细胞 ROS 的影响 | 第30-32页 |
| 3 讨论 | 第32-36页 |
| ·大鼠肝细胞分离培养的意义及技术要点 | 第32-33页 |
| ·大鼠肝细胞四氯化碳损伤模型的建立及损伤机理 | 第33-34页 |
| ·淫羊藿素抗氧化机理及其应用价值 | 第34-36页 |
| 第二部分 淫羊藿素减轻 CCL_4 致大鼠肝细胞凋亡的实验研究 | 第36-57页 |
| 1 材料与方法 | 第36-43页 |
| ·实验材料 | 第36-40页 |
| ·主要化学药品、生物试剂 | 第36-37页 |
| ·抗体 | 第37页 |
| ·大鼠肝细胞 | 第37页 |
| ·主要溶液的配制 | 第37-39页 |
| ·主要实验仪器 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-43页 |
| ·细胞分离与培养 | 第40页 |
| ·大鼠肝细胞 CCL4 凋亡模型的制作 | 第40页 |
| ·流式检测细胞凋亡数目 | 第40页 |
| ·细胞蛋白裂解液制备和 Western blot 分析 | 第40-42页 |
| ·培养细胞免疫化学染色检测 | 第42页 |
| ·玻片处理 | 第42页 |
| ·细胞爬片 | 第42页 |
| ·免疫化学染色 | 第42页 |
| ·TUNNEL 法凋亡形态学检测 | 第42-43页 |
| ·统计学处理 | 第43页 |
| 2 结果 | 第43-49页 |
| ·大鼠肝细胞 CCL4 凋亡模型的制作结果 | 第43页 |
| ·PPAR-α、L-FABP、Bcl-2/Bax 蛋白的表达 | 第43-46页 |
| ·不同浓度淫羊藿素作用于大鼠肝细胞不同时间后 PPAR-α、L-FABP 蛋白的表达 | 第43页 |
| ·淫羊藿素作用于 CCL_4 损伤大鼠肝细胞 PPAR-α、L-FABP 蛋白的表达 | 第43-46页 |
| ·Bcl-2/Bax 凋亡相关蛋白的表达 | 第46页 |
| ·不同浓度药物作用后 L-FABP 蛋白的免疫组织化学结果 | 第46页 |
| ·流式细胞仪检测结果 | 第46-49页 |
| ·培养细胞凋亡形态学检测结果 | 第49页 |
| 3 讨论 | 第49-57页 |
| ·CCL_4 致大鼠肝细胞凋亡的机理 | 第49-51页 |
| ·淫羊藿素拟雌激素样药理作用的理论基础 | 第51-52页 |
| ·淫羊藿素调节 PPAR-α蛋白表达的意义及可能机理 | 第52-53页 |
| ·淫羊藿素可通过拟雌激素受体样作用调节肝细胞L-FABP 的蛋白表达 | 第53-54页 |
| ·L-FABP 抗氧化损伤的机理 | 第54-55页 |
| ·淫羊藿素可上调 Bcl-2/Bax 比率减轻受损肝细胞的凋亡 | 第55-57页 |
| 第三部分 淫羊藿素减轻 CCL_4 诱导急性肝损伤的动物实验研究 | 第57-74页 |
| 1 材料与方法 | 第57-64页 |
| ·实验材料 | 第57-58页 |
| ·主要试剂和抗体 | 第57-58页 |
| ·实验动物 | 第58页 |
| ·实验仪器 | 第58页 |
| ·实验方法 | 第58-64页 |
| ·去势动物及急性肝损伤模型的制作 | 第58-59页 |
| ·动物分组 | 第59页 |
| ·血清ALT、AST 的测定 | 第59页 |
| ·肝组织MDA、SOD 的测定 | 第59-60页 |
| ·Realtime-PCR 测定肝组织 PPAR-α、L-FABP 转录水平 | 第60-62页 |
| ·常规病理切片 HE 染色 | 第62页 |
| ·免疫化学染色检测肝组织 L-FABP 的蛋白表达 | 第62-63页 |
| ·TUNNEL 法检测肝组织凋亡细胞比率 | 第63-64页 |
| ·统计学处理 | 第64页 |
| 2 结果 | 第64-69页 |
| ·淫羊藿素对CCL_4 损伤小鼠血清ALT、AST 的影响 | 第64页 |
| ·淫羊藿素对 CCL_4 损伤小鼠肝组织 MDA、SOD 的影响 | 第64-65页 |
| ·淫羊藿素对CCL_4 损伤小鼠肝组织PPAR-α、L-FABP 转录水平的影响 | 第65页 |
| ·淫羊藿素对CCL_4 损伤小鼠肝组织 L-FABP 蛋白表达的影响 | 第65页 |
| ·淫羊藿素对 CCL_4 损伤小鼠肝组织 HE 染色观察与评估 | 第65-69页 |
| ·淫羊藿素对 CCL_4 损伤小鼠肝组织凋亡细胞比率的影响 | 第69页 |
| 3 讨论 | 第69-74页 |
| ·迫切需要发现新的减轻急性肝损伤的药物 | 第69页 |
| ·淫羊藿素的保肝降酶作用 | 第69-71页 |
| ·淫羊藿素的减轻肝细胞脂质过氧化损害的作用 | 第71页 |
| ·淫羊藿素调控肝细胞 L-FABP 转录的作用与意义 | 第71-72页 |
| ·淫羊藿素减轻 CCL_4 损伤肝细胞凋亡的作用 | 第72页 |
| ·淫羊藿素具有治疗急慢性肝损伤及肝脏纤维化的巨大潜能 | 第72-74页 |
| 全文小结 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-84页 |
| 综述 1 氧应激与细胞信号转导 | 第84-91页 |
| 综述 2 肝型脂肪酸结合蛋白研究进展 | 第91-100页 |
| 在读期间撰写发表论文和参加科研工作情况 | 第100-102页 |
| 致谢 | 第102页 |
