内容提要 | 第1-9页 |
前言 | 第9-11页 |
第一章 文献回顾 | 第11-20页 |
1 PTEN 基因概述 | 第11-13页 |
·PTEN 的发现、命名 | 第11-12页 |
·PTEN 结构及生物学特征 | 第12-13页 |
2 PTEN 的作用机制 | 第13-17页 |
·PTEN 对P13K-AKT/PKB 信号负性调节 | 第13-14页 |
·PTEN 抑制细胞周期进展 | 第14页 |
·PTEN 诱导细胞凋亡的作用 | 第14-15页 |
·PTEN 与细胞迁移 | 第15-16页 |
·PTEN 抑制肿瘤血管生成活性 | 第16-17页 |
3 PTEN 基因的突变与缺失 | 第17-18页 |
4 PTEN 基因与肺癌 | 第18页 |
5 展望 | 第18-20页 |
第二章 实验正文 | 第20-34页 |
一、材料与方法 | 第20-27页 |
1 实验材料 | 第20-21页 |
·主要仪器与设备 | 第20页 |
·主要试剂 | 第20-21页 |
·试剂的配制 | 第21页 |
2 实验方法 | 第21-27页 |
·细胞培养 | 第21-22页 |
·细胞的复苏 | 第21-22页 |
·细胞的传代培养 | 第22页 |
·pcDNA-PTEN 重组子的构建与转染 | 第22-25页 |
·引物设计与合成 | 第22页 |
·RNA 的提取 | 第22-23页 |
·PTEN基因的RT-PCR扩增 | 第23页 |
·PTEN 的克隆及鉴定 | 第23-24页 |
·真核表达载体的构建及鉴定.. | 第24-25页 |
·质粒转染 | 第25页 |
·抑制作用的检测 | 第25-27页 |
·细胞生长 | 第25页 |
·KDR基因表达的检测 | 第25-27页 |
二、实验结果 | 第27-30页 |
1 细胞总RNA 的提取 | 第27页 |
2 RT-PCR扩增、PCR产物的克隆及鉴定 | 第27-28页 |
3 外源性 PTEN 基因对A549 细胞生长的影响 | 第28-29页 |
4 外源性 PTEN 基因对A549 细胞KDR m RNA 表达的影响 | 第29-30页 |
三、讨论 | 第30-33页 |
四、结论 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-38页 |
中文摘要 | 第38-43页 |
英文摘要 | 第43-51页 |
致谢 | 第51页 |