| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 第一章 研究进展 | 第12-26页 |
| 1.1 植物抗病毒药剂 | 第12-21页 |
| 1.1.1 毒氟磷 | 第12-14页 |
| 1.1.2 其他药剂及衍生物 | 第14-21页 |
| 1.2 马铃薯X病毒 | 第21-23页 |
| 1.2.1 PVX的基因组结构 | 第21-23页 |
| 1.2.2 PVX的发生和分布及防治技术 | 第23页 |
| 1.3致病因子p25 | 第23-25页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第25-26页 |
| 第二章 毒氟磷对PVX预防作用的研究分析 | 第26-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-27页 |
| 2.1.1 供试植株 | 第26页 |
| 2.1.2 供试菌株及载体 | 第26页 |
| 2.1.3 试剂与仪器 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-31页 |
| 2.2.1 Trizol法提取总RNA | 第27-28页 |
| 2.2.2 反转录 | 第28-29页 |
| 2.2.3 本氏烟草的准备 | 第29页 |
| 2.2.4 蛋白Western Blot杂交 | 第29-30页 |
| 2.2.5 实时荧光定量分析 | 第30-31页 |
| 2.3 实验结果 | 第31-33页 |
| 2.3.1 毒氟磷预处理影响PVX在本氏烟上的发病率 | 第31-32页 |
| 2.3.2 毒氟磷预处理对PVX病毒积累的影响 | 第32-33页 |
| 2.4 小结 | 第33-35页 |
| 第三章 毒氟磷对PVX治愈作用的研究分析 | 第35-38页 |
| 3.1 实验材料 | 第35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35页 |
| 3.2.1 Trizol法提取总RNA | 第35页 |
| 3.2.2 反转录 | 第35页 |
| 3.2.3 本氏烟草的准备 | 第35页 |
| 3.2.4 蛋白Western Blot杂交 | 第35页 |
| 3.2.5 实时荧光定量分析 | 第35页 |
| 3.3 实验结果 | 第35-37页 |
| 3.3.1 毒氟磷处理对发病植株中的PVX积累的影响 | 第35-36页 |
| 3.3.2 毒氟磷在治愈处理中对PVX病毒蛋白表达量的影响 | 第36-37页 |
| 3.4 小结 | 第37-38页 |
| 第四章 致病因子p25互作蛋白的筛选验证 | 第38-53页 |
| 4.1 实验材料 | 第38页 |
| 4.1.1 供试植株和菌株 | 第38页 |
| 4.1.2 试剂与仪器 | 第38页 |
| 4.2 实验方法 | 第38-44页 |
| 4.2.1 免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP) | 第38-39页 |
| 4.2.2 目的基因的扩增 | 第39-40页 |
| 4.2.3 PCR扩增产物电泳回收 | 第40页 |
| 4.2.4 T载体连接 | 第40页 |
| 4.2.5 质粒纯化提取 | 第40-41页 |
| 4.2.6 大肠杆菌感受态制备 | 第41页 |
| 4.2.7 Gateway克隆技术构建载体 | 第41-42页 |
| 4.2.8 热激转化 | 第42页 |
| 4.2.9 阳性菌落筛选及序列测定和分析 | 第42-43页 |
| 4.2.10 农杆菌感受态制备与电击转化 | 第43页 |
| 4.2.11 农杆菌共浸润本氏烟 | 第43-44页 |
| 4.2.12 双分子荧光互补(Bimolecular Fluorescence complementatuon,Bi FC) | 第44页 |
| 4.3 实验结果 | 第44-52页 |
| 4.3.1 GFP磁珠共沉淀与p25相互作用的蛋白 | 第44-45页 |
| 4.3.2 质谱鉴定结果分析 | 第45-46页 |
| 4.3.3 PVX Rd Rp与 p25的Bi FC互作验证 | 第46-47页 |
| 4.3.4 SGS3 家族蛋白与 PVX 侵染关系分析 | 第47-52页 |
| 4.4 小结 | 第52-53页 |
| 第五章 讨论 | 第53-56页 |
| 第六章 展望 | 第56-57页 |
| 6.1 毒氟磷抑制PVX侵染的作用机制 | 第56页 |
| 6.2 与p25互作蛋白分析 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 致谢 | 第63-65页 |
| 附录 | 第65-69页 |
| 符号及缩略语说明 | 第69-71页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第71-72页 |
