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家蚕丝腺生物反应器表达hIGF-Ⅰ转基因分泌表达载体的构建及其应用研究

中文摘要第1-7页
Abstract第7-9页
第一章 家蚕生物反应器的相关研究进展第9-20页
 1 转基因动物研究概况第9-10页
 2 动物生物反应器研究进展第10页
 3 转基因昆虫的研究概况第10-11页
 4 转基因家蚕研究概况第11-15页
   ·转基因家蚕研究第11-13页
   ·家蚕生物反应器研究概况第13-15页
 参考文献第15-20页
第二章 胰岛素样生长因子的研究进展第20-28页
 1 胰岛素样生长因子的分子结构和作用机理第20-22页
   ·分子结构第21页
   ·作用机理第21-22页
 2 生物学功能第22-24页
   ·IGFs 促生长发育的作用第22-23页
   ·IGFs 的物质代谢作用第23页
   ·IGFs 的免疫调节作用第23-24页
 3 IGF-I 在动物生产中的研究应用第24-25页
 4 研究展望第25页
 参考文献第25-28页
第三章 研究目的与内容第28-31页
 1 研究的目的和意义第28-29页
 2 研究技术路线第29页
 3 研究内容第29-31页
第四章 材料与方法第31-37页
 1 一般材料第31-33页
   ·载体、菌种、细胞和家蚕第31页
   ·工具酶及其试剂第31页
   ·培养基第31-32页
   ·缓冲液和常用溶液第32-33页
 2 常用仪器第33-34页
 3 常用实验方法第34-37页
   ·PCR 扩增目的片段第34页
   ·目的片段的分离和回收第34页
   ·DNA 的酶切反应体系第34页
   ·DNA 的连接反应体系第34-35页
   ·质粒DNA 的制备第35页
   ·感受态细胞的制备第35页
   ·连接产物的转化第35页
   ·重组质粒的筛选第35-36页
   ·限制性内切酶反应第36页
   ·细胞的传代第36-37页
第五章 家蚕丝素重链启动子驱动DsRed 的瞬时分泌表达第37-47页
 1 材料与方法第38-40页
   ·材料第38页
   ·方法第38-40页
 2 结果与分析第40-43页
   ·pSK-FibHS-DsRed-PolyA 的构建与鉴定第40-41页
   ·带有信号肽序列的fib-H 启动子在BmN 细胞中的活性检测第41页
   ·带有信号肽序列的Fib-H 启动子在丝腺组织中的活性检测第41-43页
 3 讨论第43-44页
 参考文献第44-47页
第六章 pigA3-GFP -Neo -En-[FibHS- IGF- polyA]转基因分泌表达载体的构建第47-53页
 1 材料与方法第48-50页
   ·材料与试剂第48页
   ·方法第48-50页
 2 结果与分析第50-51页
   ·转基因分泌表达载体的酶切鉴定第50-51页
 3 讨论第51-52页
 参考文献第52-53页
第七章 piggyBac 转座子介导的家蚕细胞转基因研究第53-61页
 1 引言第53-54页
 2 材料与方法第54-56页
   ·实验材料第54页
   ·方法第54-56页
 3 结果与分析第56-59页
   ·转化细胞的筛选第56页
   ·转化细胞的PCR 鉴定第56-57页
   ·转化细胞的SDS-PAGE 分析第57-58页
   ·ELISA 检测转化细胞的hIGF-I 的表达第58-59页
 4 讨论第59-60页
 参考文献第60-61页
第八章 pigA3-GFP-Neo-En-[FibHS-IGF-polyA]家蚕转基因研究第61-73页
 1 引言第61-62页
 2 材料与方法第62-65页
   ·实验材料第62-63页
   ·实验方法第63-65页
 3 结果与分析第65-70页
   ·G0 转基因家蚕的获得第65-66页
   ·转基因家蚕的继代第66-67页
   ·转基因家蚕的分子检测第67-69页
   ·转基因家蚕蚕茧中目的蛋白IGF-I 的表达分析第69-70页
 4 讨论第70-71页
 参考文献第71-73页
结论第73-74页
硕士期间科研情况第74-75页
中英文缩略表第75-76页
致谢第76页

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