摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-13页 |
第1章 绪论 | 第13-21页 |
·昆虫性别决定多样性的研究概况 | 第13-16页 |
·果蝇性别决定分子机制研究 | 第13-14页 |
·家蚕性别调控研究现状及进展 | 第14-16页 |
·差异表达基因分离技术 | 第16-19页 |
·递减杂交技术 | 第16-17页 |
·mRNA 差别显示技术(DDRT-PCR) | 第17页 |
·代表性差异分析(RDA) | 第17-18页 |
·cDNA-AFLP 技术 | 第18页 |
·抑制消减杂交(SSH) | 第18-19页 |
·其他方法 | 第19页 |
·课题研究内容及目的意义 | 第19-21页 |
第2章 仪器设备、药品试剂及方法技术 | 第21-26页 |
·主要实验仪器设备 | 第21页 |
·主要试剂和药品 | 第21-23页 |
·主要试剂和试剂盒 | 第21页 |
·常用溶液和缓冲液的配制 | 第21-22页 |
·培养基的制备 | 第22页 |
·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第22-23页 |
·主要实验方法和技术原理 | 第23-26页 |
·抑制消减杂交技术(SSH) | 第23-24页 |
·PCR 产物克隆、鉴定 | 第24页 |
·cDNA 末端快速扩增(Rapid Amplification of cDNA Ends, RACE) | 第24页 |
·半定量 RT-PCR ( Semiquantitative RT-PCR ) | 第24-25页 |
·实时荧光定量RT-PCR | 第25-26页 |
第3章 家蚕单性生殖早期胚胎SSH 文库的构建及其序列分析 | 第26-55页 |
·材料与方法 | 第26-39页 |
·实验材料 | 第26页 |
·家蚕单性生殖卵的制备 | 第26-27页 |
·家蚕单性生殖卵总RNA 提取 | 第27页 |
·抑制消减杂交cDNA 文库的构建 | 第27-32页 |
·消减 PCR 产物克隆 | 第32-34页 |
·差异表达基因的cDNA 末端快速扩增 | 第34-36页 |
·差异表达基因的半定量RT-PCR 分析 | 第36-38页 |
·实时荧光定量RT-PCR 分析 | 第38-39页 |
·结果与分析 | 第39-53页 |
·家蚕单性生殖卵的制备及总 RNA 的提取 | 第39页 |
·抑制消减杂交cDNA 文库的构建 | 第39-41页 |
·抑制消减杂交cDNA 文库分析 | 第41-45页 |
·差异表达基因的 RACE 结果分析 | 第45-48页 |
·差异表达基因的半定量RT-PCR 分析 | 第48-50页 |
·差异表达基因的实时定量RT-PCR 分析 | 第50-53页 |
·讨论 | 第53-54页 |
·家蚕单一性别消减cDNA 文库的构建及其序列分析 | 第53页 |
·差异表达基因的克隆与分析 | 第53页 |
·家蚕消减cDNA 文库差异表达基因的半定量RT-PCR 分析 | 第53-54页 |
·差异表达基因的实时定量RT-PCR 分析 | 第54页 |
·本章小结 | 第54-55页 |
结论与展望 | 第55-59页 |
参考文献 | 第59-62页 |
附录1 | 第62-67页 |
附录2 | 第67-72页 |
附录3 | 第72-74页 |
附录4 | 第74-76页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第76-77页 |
致谢 | 第77页 |