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家蚕单性生殖早期胚胎差异表达基因的研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-13页
第1章 绪论第13-21页
   ·昆虫性别决定多样性的研究概况第13-16页
     ·果蝇性别决定分子机制研究第13-14页
     ·家蚕性别调控研究现状及进展第14-16页
   ·差异表达基因分离技术第16-19页
     ·递减杂交技术第16-17页
     ·mRNA 差别显示技术(DDRT-PCR)第17页
     ·代表性差异分析(RDA)第17-18页
     ·cDNA-AFLP 技术第18页
     ·抑制消减杂交(SSH)第18-19页
     ·其他方法第19页
   ·课题研究内容及目的意义第19-21页
第2章 仪器设备、药品试剂及方法技术第21-26页
   ·主要实验仪器设备第21页
   ·主要试剂和药品第21-23页
     ·主要试剂和试剂盒第21页
     ·常用溶液和缓冲液的配制第21-22页
     ·培养基的制备第22页
     ·大肠杆菌感受态细胞制备第22-23页
   ·主要实验方法和技术原理第23-26页
     ·抑制消减杂交技术(SSH)第23-24页
     ·PCR 产物克隆、鉴定第24页
     ·cDNA 末端快速扩增(Rapid Amplification of cDNA Ends, RACE)第24页
     ·半定量 RT-PCR ( Semiquantitative RT-PCR )第24-25页
     ·实时荧光定量RT-PCR第25-26页
第3章 家蚕单性生殖早期胚胎SSH 文库的构建及其序列分析第26-55页
   ·材料与方法第26-39页
     ·实验材料第26页
     ·家蚕单性生殖卵的制备第26-27页
     ·家蚕单性生殖卵总RNA 提取第27页
     ·抑制消减杂交cDNA 文库的构建第27-32页
     ·消减 PCR 产物克隆第32-34页
     ·差异表达基因的cDNA 末端快速扩增第34-36页
     ·差异表达基因的半定量RT-PCR 分析第36-38页
     ·实时荧光定量RT-PCR 分析第38-39页
   ·结果与分析第39-53页
     ·家蚕单性生殖卵的制备及总 RNA 的提取第39页
     ·抑制消减杂交cDNA 文库的构建第39-41页
     ·抑制消减杂交cDNA 文库分析第41-45页
     ·差异表达基因的 RACE 结果分析第45-48页
     ·差异表达基因的半定量RT-PCR 分析第48-50页
     ·差异表达基因的实时定量RT-PCR 分析第50-53页
   ·讨论第53-54页
     ·家蚕单一性别消减cDNA 文库的构建及其序列分析第53页
     ·差异表达基因的克隆与分析第53页
     ·家蚕消减cDNA 文库差异表达基因的半定量RT-PCR 分析第53-54页
     ·差异表达基因的实时定量RT-PCR 分析第54页
   ·本章小结第54-55页
结论与展望第55-59页
参考文献第59-62页
附录1第62-67页
附录2第67-72页
附录3第72-74页
附录4第74-76页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第76-77页
致谢第77页

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