| 缩略词表 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 综述 | 第10-23页 |
| 参考文献 | 第20-23页 |
| 引言 | 第23-24页 |
| 第一部分:脐带血间充质干细胞培养体系的建立 | 第24-32页 |
| 一、实验材料 | 第24-25页 |
| ·实验对象 | 第24页 |
| ·实验试剂 | 第24-25页 |
| ·主要实验仪器与耗材 | 第25页 |
| ·主要试剂和溶液的配制 | 第25页 |
| 二、实验方法 | 第25-27页 |
| ·脐带血的采集与MNCs的分离 | 第26页 |
| ·培养条件的比较 | 第26-27页 |
| ·流式细胞仪测定UCB-MSCs表面标记 | 第27页 |
| ·向成骨细胞的诱导 | 第27页 |
| ·统计学方法 | 第27页 |
| 三、实验结果 | 第27-29页 |
| ·UCB-MNCs不同分离方法的比较 | 第27-28页 |
| ·不同培养基的比较 | 第28页 |
| ·不同FBS浓度的比较 | 第28页 |
| ·不同种植密度的比较 | 第28-29页 |
| ·UCB-MSCs表面标记的流式细胞仪测定 | 第29页 |
| ·UCB-MSCs诱导成骨 | 第29页 |
| 四、讨论 | 第29-30页 |
| 五、结论 | 第30-32页 |
| 第二部分:脐带血间充质干细胞向成肌细胞分化的研究 | 第32-44页 |
| 一、实验材料 | 第32-34页 |
| ·实验对象 | 第32页 |
| ·实验试剂 | 第32-33页 |
| ·主要实验仪器与耗材 | 第33页 |
| ·主要试剂和溶液的配制 | 第33-34页 |
| 二、实验方法 | 第34-38页 |
| ·UCB-MNCs的采集、分离与UCB-MSCs的培养 | 第34页 |
| ·MTT法检测不同浓度5-Aza对UCB-MSCs增殖的影响 | 第34-35页 |
| ·5-Aza诱导UCB-MSCs向成肌细胞分化 | 第35页 |
| ·UCB-MSCs经5-Aza诱导后,MyoD1、myogenin和myosin heavy chain免疫荧光染色 | 第35页 |
| ·UCB-MSCs经5-Aza诱导后,MyoD1、myogenin和myosin heavy chain的mRNA Real-time PCR检测 | 第35-38页 |
| ·Trziol法提取总RNA的步骤 | 第36页 |
| ·RNA逆转录cDNA | 第36-37页 |
| ·PCR预实验 | 第37页 |
| ·SYBR GREEN Realtime PCR | 第37-38页 |
| ·数据处理 | 第38页 |
| ·引物序列 | 第38页 |
| ·统计学分析 | 第38页 |
| 三、实验结果 | 第38-41页 |
| ·UCB-MNCs的采集、分离与UCB-MSCs的培养 | 第38页 |
| ·5-Aza对UCB-MSCs增殖的影响 | 第38-39页 |
| ·5-Aza诱导UCB-MSCs向成肌细胞分化的形态学改变与MyoD1、myogenin和myosin heavy chain IF染色表达 | 第39页 |
| ·Real-time PCR检测UCB-MSCs经5-Aza诱导后,成肌细胞分化相关调控基因mRNA水平的表达 | 第39-41页 |
| 四、讨论 | 第41-43页 |
| 五、结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 附录 | 第48-54页 |
| 研究生期间撰写的论文与参加会议情况 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
