| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 前言 | 第10-20页 |
| 1.骨组织工程种子细胞研究的概况 | 第10-15页 |
| ·BMSCs的生物学特性 | 第11-12页 |
| ·BMSCs的分离与纯化及细胞鉴定 | 第12页 |
| ·BMSCs的成骨诱导及细胞鉴定 | 第12-15页 |
| ·化学物质的作用 | 第12-13页 |
| ·生长因子的作用 | 第13-14页 |
| ·基因转移技术的作用 | 第14-15页 |
| 2.实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第15-17页 |
| ·聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR) | 第15-16页 |
| ·定量PCR | 第16-17页 |
| 3.成骨细胞表面标记基因 | 第17-18页 |
| ·碱性磷酸酶(ALP) | 第17页 |
| ·骨形态发生蛋白-2(BMP-2) | 第17-18页 |
| ·成骨细胞特异转录因子(Runx2/CBFA Ⅰ) | 第18页 |
| 4.本课题研究思路的提出 | 第18-19页 |
| 5.实验的研究内容 | 第19-20页 |
| 实验一 BMSCs的体外培养和鉴定 | 第20-32页 |
| 1.引言 | 第20页 |
| 2.材料与方法 | 第20-22页 |
| ·实验动物 | 第20页 |
| ·主要实验仪器和设备 | 第20-21页 |
| ·主要实验试剂 | 第21页 |
| ·实验试剂的配制 | 第21-22页 |
| 3.SD大鼠BMSCs的分离与培养 | 第22-23页 |
| ·SD大鼠BMSCs的分离与原代培养 | 第22页 |
| ·SD大鼠BMSCs的传代培养 | 第22页 |
| ·生长曲线的绘制 | 第22-23页 |
| ·细胞周期测定 | 第23页 |
| ·细胞表面标记物检测 | 第23页 |
| 4.结果 | 第23-24页 |
| ·光镜下SD大鼠BMSCs形态学观察 | 第23-24页 |
| ·生长曲线 | 第24页 |
| ·细胞周期测定 | 第24页 |
| ·细胞表面标记物检测 | 第24页 |
| 5.讨论 | 第24-27页 |
| 6.结论 | 第27-28页 |
| 7.附图 | 第28-32页 |
| 实验二 BMSCs的成骨分化 | 第32-50页 |
| 1.引言 | 第32页 |
| 2.材料与方法 | 第32-33页 |
| ·主要实验仪器和设备 | 第32页 |
| ·主要实验试剂 | 第32-33页 |
| 3.SD大鼠BMSCs的成骨细胞诱导 | 第33-38页 |
| ·成骨诱导培养基 | 第33页 |
| ·成骨诱导过程 | 第33页 |
| ·成骨诱导细胞生长曲线的绘制 | 第33-34页 |
| ·碱性磷酸酶(ALP)染色 | 第34页 |
| ·矿化结节染色(茜素红法) | 第34页 |
| ·实时荧光定量PCR探针法(qRT-PCR) | 第34-38页 |
| ·引物与探针的设计与合成 | 第34-35页 |
| ·RNA的提取 | 第35-36页 |
| ·RNA电泳 | 第36页 |
| ·反转录反应(RT) | 第36-37页 |
| ·qRT-PCR反应 | 第37-38页 |
| 4.结果 | 第38-43页 |
| ·光镜下成骨诱导细胞的形态学观察 | 第38页 |
| ·成骨诱导细胞的生长曲线 | 第38页 |
| ·碱性磷酸酶(ALP)染色 | 第38页 |
| ·矿化结节染色(茜素红法) | 第38页 |
| ·RNA电泳结果 | 第38页 |
| ·实时荧光定量PCR探针法(qRT-PCT) | 第38-43页 |
| ·qRT-PCR的结果分析 | 第43页 |
| 5.讨论 | 第43-45页 |
| 6.结论 | 第45-46页 |
| 7.附图 | 第46-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 主要缩略语中英文对照 | 第57-58页 |
| 附录 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |