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重组人胰岛素在毕赤酵母中表达的研究

内容提要第1-7页
英文缩略词第7-9页
第1章 绪论第9-21页
   ·糖尿病及其药物治疗第9-11页
   ·胰岛素的结构和功能第11-15页
     ·胰岛素的结构第11-13页
     ·胰岛素的功能第13-15页
   ·基因工程胰岛素的制备第15-20页
     ·重组人胰岛素在大肠杆菌中的生物合成第15-16页
     ·重组人胰岛素在酵母中的生物合成第16-19页
     ·基因工程人胰岛素在高等动植物中的生物合成第19-20页
   ·立题依据第20-21页
第2章 重组人胰岛素表达载体的构建第21-37页
   ·材料和方法第21-31页
     ·材料第21-23页
     ·方法第23-31页
   ·结果第31-35页
     ·InsA,InsB基因的获得第31页
     ·重组质粒pPICZαInsA,pPICZαInsB DNA测序结果第31-32页
     ·PCR获得Pme I 突变位点的DNA片段第32页
     ·PCR筛选Pme I突变DNA片段转化阳性菌株第32-33页
     ·Pme I突变载体酶切鉴定第33页
     ·pPICZαC-InsAΔPmeI,pPICZαC-InsBΔPmeI重组质粒测序第33-34页
     ·完整人胰岛素重组质粒EcoR I酶切结果第34-35页
   ·讨论第35-37页
第3章 重组人胰岛素毕赤酵母分泌表达体系建立和鉴定第37-46页
   ·材料和方法第37-41页
     ·材料第37-38页
     ·方法第38-41页
   ·结果第41-43页
     ·电化学发光法分析重组人胰岛素不同时间点表达量的变化第41-42页
     ·人胰岛素活性单位与表达量之间的推算第42-43页
   ·讨论第43-46页
结论第46-47页
参考文献第47-51页
附录 实验设计路线图第51-52页
致谢第52-53页
摘要第53-56页
Abstract第56-58页

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