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碱性木聚糖酶基因在大肠杆菌中的表达及重组木聚糖酶的特性

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
第1章 绪论第12-25页
   ·概述第12-13页
     ·半纤维素和木聚糖特性第12页
     ·木聚糖降解酶系统第12-13页
   ·研究进展第13-14页
     ·产木聚糖酶酶的微生物第13-14页
     ·木聚糖酶的理化性质第14页
   ·木聚糖酶的纯化方法第14-15页
   ·木聚糖酶活性的测定第15-16页
   ·木聚糖酶的分子生物学第16-18页
     ·木聚糖酶基因研究第16页
     ·木聚糖酶基因的克隆与表达第16-18页
   ·木聚糖酶的应用第18-22页
     ·造纸工业第18-19页
     ·食品工业第19-20页
     ·饲料工业第20-21页
     ·纺织工业第21-22页
     ·酿酒工业第22页
     ·木聚糖酶在其它方面的应用第22页
   ·研究目的和意义第22-23页
   ·研究内容第23-25页
第2章 碱性木聚糖酶基因的扩增及在大肠杆菌中的表达第25-42页
   ·实验材料第25-27页
     ·菌株和质粒第25页
     ·试剂第25页
     ·培养基及主要试剂配制第25-27页
     ·实验仪器第27页
   ·实验方法第27-33页
     ·质粒pCT124 转入大肠杆菌E.coli DH5á第27页
     ·提取质粒pCT124第27-28页
     ·PCR 反应引物的设计第28-29页
     ·PCR 扩增反应及PCR 产物的纯化第29页
     ·DNA 的琼脂糖凝胶电泳第29页
     ·琼脂糖凝胶中DNA 片段的回收第29-30页
     ·木聚糖酶基因原核表达载体pGEX-xylA 的构建第30页
     ·pGEX-xylA 转化大肠杆菌E.coli DH5á第30页
     ·鉴定阳性转化子第30-31页
     ·酶切分析第31页
     ·重组子的诱导表达第31-32页
     ·SDS-PAGE 鉴定表达蛋白第32-33页
     ·其他第33页
   ·结果与分析第33-41页
     ·质粒pCT124 转化大肠杆菌第33页
     ·pCT124 质粒的提取第33页
     ·PCR 克隆碱性木聚糖酶基因第33-34页
     ·碱性木聚糖酶基因原核表达载体pGEX-xylA 的构建及筛选第34-36页
     ·耐碱性木聚糖酶基因的序列分析第36-39页
     ·重组蛋白在E.coli 中诱导表达及鉴定第39-41页
   ·讨论第41-42页
     ·基因表达系统的选择第41页
     ·表达载体的选择第41-42页
第3章 木聚糖酶粗酶酶学性质和应用性质的研究第42-52页
   ·实验材料第42-43页
     ·菌株第42页
     ·培养基第42页
     ·试剂配制第42页
     ·实验仪器第42-43页
   ·实验方法第43-45页
     ·含重组质粒pGEX-xyl 的E.coli DH5á活化及诱导表达第43页
     ·木聚糖酶活力测定第43-44页
     ·胞外、胞内和周质空间的木聚糖酶分布第44页
     ·木聚糖酶的等电点第44-45页
     ·木聚糖酶的最适作用温度及热稳定性第45页
     ·木聚糖酶的耐热性试验第45页
     ·木聚糖酶的最适作用pH第45页
     ·木聚糖酶的碱稳定性试验第45页
     ·金属离子、螯合剂和表面活性剂对木聚糖酶活力的影响第45页
   ·结果与分析第45-51页
     ·木糖标准曲线的绘制第45页
     ·木聚糖酶的等电点第45-47页
     ·木聚糖酶作用的最适温度第47-48页
     ·木聚糖酶的耐热性试验第48-49页
     ·木聚糖酶作用的最适pH 和对pH 的稳定性第49-50页
     ·金属离子对木聚糖酶活性的影响第50-51页
   ·讨论第51-52页
第4章 总结第52-54页
   ·总结第52-53页
   ·创新第53-54页
展望第54-56页
附录第56-61页
参考文献第61-66页
致谢第66-67页
在学期间主要科研成果第67页

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