| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-25页 |
| ·概述 | 第12-13页 |
| ·半纤维素和木聚糖特性 | 第12页 |
| ·木聚糖降解酶系统 | 第12-13页 |
| ·研究进展 | 第13-14页 |
| ·产木聚糖酶酶的微生物 | 第13-14页 |
| ·木聚糖酶的理化性质 | 第14页 |
| ·木聚糖酶的纯化方法 | 第14-15页 |
| ·木聚糖酶活性的测定 | 第15-16页 |
| ·木聚糖酶的分子生物学 | 第16-18页 |
| ·木聚糖酶基因研究 | 第16页 |
| ·木聚糖酶基因的克隆与表达 | 第16-18页 |
| ·木聚糖酶的应用 | 第18-22页 |
| ·造纸工业 | 第18-19页 |
| ·食品工业 | 第19-20页 |
| ·饲料工业 | 第20-21页 |
| ·纺织工业 | 第21-22页 |
| ·酿酒工业 | 第22页 |
| ·木聚糖酶在其它方面的应用 | 第22页 |
| ·研究目的和意义 | 第22-23页 |
| ·研究内容 | 第23-25页 |
| 第2章 碱性木聚糖酶基因的扩增及在大肠杆菌中的表达 | 第25-42页 |
| ·实验材料 | 第25-27页 |
| ·菌株和质粒 | 第25页 |
| ·试剂 | 第25页 |
| ·培养基及主要试剂配制 | 第25-27页 |
| ·实验仪器 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-33页 |
| ·质粒pCT124 转入大肠杆菌E.coli DH5á | 第27页 |
| ·提取质粒pCT124 | 第27-28页 |
| ·PCR 反应引物的设计 | 第28-29页 |
| ·PCR 扩增反应及PCR 产物的纯化 | 第29页 |
| ·DNA 的琼脂糖凝胶电泳 | 第29页 |
| ·琼脂糖凝胶中DNA 片段的回收 | 第29-30页 |
| ·木聚糖酶基因原核表达载体pGEX-xylA 的构建 | 第30页 |
| ·pGEX-xylA 转化大肠杆菌E.coli DH5á | 第30页 |
| ·鉴定阳性转化子 | 第30-31页 |
| ·酶切分析 | 第31页 |
| ·重组子的诱导表达 | 第31-32页 |
| ·SDS-PAGE 鉴定表达蛋白 | 第32-33页 |
| ·其他 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-41页 |
| ·质粒pCT124 转化大肠杆菌 | 第33页 |
| ·pCT124 质粒的提取 | 第33页 |
| ·PCR 克隆碱性木聚糖酶基因 | 第33-34页 |
| ·碱性木聚糖酶基因原核表达载体pGEX-xylA 的构建及筛选 | 第34-36页 |
| ·耐碱性木聚糖酶基因的序列分析 | 第36-39页 |
| ·重组蛋白在E.coli 中诱导表达及鉴定 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| ·基因表达系统的选择 | 第41页 |
| ·表达载体的选择 | 第41-42页 |
| 第3章 木聚糖酶粗酶酶学性质和应用性质的研究 | 第42-52页 |
| ·实验材料 | 第42-43页 |
| ·菌株 | 第42页 |
| ·培养基 | 第42页 |
| ·试剂配制 | 第42页 |
| ·实验仪器 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-45页 |
| ·含重组质粒pGEX-xyl 的E.coli DH5á活化及诱导表达 | 第43页 |
| ·木聚糖酶活力测定 | 第43-44页 |
| ·胞外、胞内和周质空间的木聚糖酶分布 | 第44页 |
| ·木聚糖酶的等电点 | 第44-45页 |
| ·木聚糖酶的最适作用温度及热稳定性 | 第45页 |
| ·木聚糖酶的耐热性试验 | 第45页 |
| ·木聚糖酶的最适作用pH | 第45页 |
| ·木聚糖酶的碱稳定性试验 | 第45页 |
| ·金属离子、螯合剂和表面活性剂对木聚糖酶活力的影响 | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-51页 |
| ·木糖标准曲线的绘制 | 第45页 |
| ·木聚糖酶的等电点 | 第45-47页 |
| ·木聚糖酶作用的最适温度 | 第47-48页 |
| ·木聚糖酶的耐热性试验 | 第48-49页 |
| ·木聚糖酶作用的最适pH 和对pH 的稳定性 | 第49-50页 |
| ·金属离子对木聚糖酶活性的影响 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| 第4章 总结 | 第52-54页 |
| ·总结 | 第52-53页 |
| ·创新 | 第53-54页 |
| 展望 | 第54-56页 |
| 附录 | 第56-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 在学期间主要科研成果 | 第67页 |