摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-13页 |
引言 | 第13-25页 |
1 核型分析 | 第13-15页 |
·染色体标本的制作 | 第13-14页 |
·取材 | 第13-14页 |
·预处理 | 第14页 |
·固定、解离 | 第14页 |
·核型分析方法 | 第14-15页 |
·手工核型分析法 | 第14页 |
·染色体图像核型分析系统分析法 | 第14-15页 |
·利用Adobe Photoshop 软件进行核型分析 | 第15页 |
2 染色体微切割、微分离及微克隆技术 | 第15-22页 |
·染色体标本的制作及目标染色体的辨认 | 第16页 |
·目标染色体的显微切割和分离 | 第16-19页 |
·微细玻璃针法 | 第16-17页 |
·激光显微切割法 | 第17页 |
·微细玻璃针和激光显微切割相结合的方法 | 第17页 |
·激光捕获微分离法 | 第17-18页 |
·光镊分离法 | 第18页 |
·流式细胞分类器法 | 第18-19页 |
·单染色体的体外扩增 | 第19-20页 |
·连接接头PCR | 第19页 |
·简并引物PCR | 第19-20页 |
·扩增产物的鉴定 | 第20页 |
·Southern 杂交分析 | 第20页 |
·原位杂交分析 | 第20页 |
·染色体显微切割技术的应用 | 第20-22页 |
·研究染色体自身的结构 | 第20-21页 |
·构建染色体或染色体特定区段的DNA 文库 | 第21页 |
·建立单染色体高密度的分子连锁图谱 | 第21页 |
·目的基因的定位与克隆 | 第21-22页 |
·基因组物理作图 | 第22页 |
·染色体进化研究 | 第22页 |
3 向日葵分子生物学研究进展 | 第22-25页 |
·向日葵核型分析研究现状 | 第22-23页 |
·向日葵分子生物学研究现状 | 第23页 |
·本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
第一章 向日葵染色体核型分析 | 第25-37页 |
1 材料与方法 | 第25-29页 |
·材料 | 第25页 |
·植物材料 | 第25页 |
·主要试剂 | 第25页 |
·主要试剂配制 | 第25页 |
·主要仪器设备 | 第25页 |
·方法 | 第25-29页 |
·染色体标本制作 | 第25-26页 |
·染色体核型分析 | 第26-29页 |
2 结果与分析 | 第29-33页 |
·不同预处理对中期分裂相的影响 | 第29页 |
·核型分析 | 第29-33页 |
·染色体数目确定 | 第29页 |
·核型 | 第29-33页 |
3 讨论 | 第33-37页 |
·最佳取材时间确定 | 第33页 |
·根尖预处理 | 第33页 |
·核型分析方法 | 第33-34页 |
·不同基因型向日葵的核型分析 | 第34-37页 |
第二章 向日葵单染色体微切割、微分离、微扩增及SOUTHERN 检测 | 第37-52页 |
1 材料与方法 | 第37-46页 |
·材料 | 第37-39页 |
·植物材料 | 第37页 |
·主要试剂 | 第37页 |
·主要试剂配制 | 第37-38页 |
·Sau3AⅠ连接接头制备 | 第38页 |
·引物 | 第38页 |
·主要仪器设备 | 第38-39页 |
·方法 | 第39-46页 |
·染色体标本制备 | 第39页 |
·微细玻璃针制作 | 第39页 |
·染色体显微切割及分离 | 第39-40页 |
·单染色体体外扩增 | 第40-41页 |
·单染色体扩增产物鉴定 | 第41-46页 |
2 结果与分析 | 第46-50页 |
·向日葵单染色体的显微切割与分离 | 第46-47页 |
·单染色体体外扩增 | 第47页 |
·SOUTHERN 杂交检测 | 第47-50页 |
·基因组DNA 质量分析及探针标记效率估计 | 第47-48页 |
·Southern 杂交检测 | 第48-50页 |
3 讨论 | 第50-52页 |
·向日葵染色体的显微分离 | 第50页 |
·染色体的体外扩增及影响染色体扩增片段大小的因素 | 第50页 |
·污染的控制 | 第50-51页 |
·SOUTHERN 杂交 | 第51-52页 |
第三章 向日葵单染色体的微克隆与DNA 文库的建立 | 第52-62页 |
1 材料与方法 | 第52-57页 |
·材料 | 第52-53页 |
·材料 | 第52页 |
·主要试剂 | 第52页 |
·主要试剂配制 | 第52-53页 |
·主要仪器设备 | 第53页 |
·方法 | 第53-57页 |
·PCR 产物回收纯化 | 第53页 |
·PCR 产物与载体连接 | 第53-54页 |
·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第54页 |
·重组质粒检测 | 第54-57页 |
2 结果与分析 | 第57-60页 |
·PCR 产物克隆及单染色体DNA 文库建立 | 第57页 |
·单染色体DNA 文库检测 | 第57-60页 |
·Kisser法检测重组质粒 | 第57-58页 |
·重组质粒PCR 检测 | 第58页 |
·重组质粒酶切鉴定 | 第58-60页 |
3 讨论 | 第60-62页 |
结论 | 第62-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-73页 |
作者简介 | 第73页 |