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向日葵染色体核型分析及单染色体微切割、微分离和微克隆

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-13页
引言第13-25页
 1 核型分析第13-15页
   ·染色体标本的制作第13-14页
     ·取材第13-14页
     ·预处理第14页
     ·固定、解离第14页
   ·核型分析方法第14-15页
     ·手工核型分析法第14页
     ·染色体图像核型分析系统分析法第14-15页
     ·利用Adobe Photoshop 软件进行核型分析第15页
 2 染色体微切割、微分离及微克隆技术第15-22页
   ·染色体标本的制作及目标染色体的辨认第16页
   ·目标染色体的显微切割和分离第16-19页
     ·微细玻璃针法第16-17页
     ·激光显微切割法第17页
     ·微细玻璃针和激光显微切割相结合的方法第17页
     ·激光捕获微分离法第17-18页
     ·光镊分离法第18页
     ·流式细胞分类器法第18-19页
   ·单染色体的体外扩增第19-20页
     ·连接接头PCR第19页
     ·简并引物PCR第19-20页
   ·扩增产物的鉴定第20页
     ·Southern 杂交分析第20页
     ·原位杂交分析第20页
   ·染色体显微切割技术的应用第20-22页
     ·研究染色体自身的结构第20-21页
     ·构建染色体或染色体特定区段的DNA 文库第21页
     ·建立单染色体高密度的分子连锁图谱第21页
     ·目的基因的定位与克隆第21-22页
     ·基因组物理作图第22页
     ·染色体进化研究第22页
 3 向日葵分子生物学研究进展第22-25页
   ·向日葵核型分析研究现状第22-23页
   ·向日葵分子生物学研究现状第23页
   ·本研究的目的和意义第23-25页
第一章 向日葵染色体核型分析第25-37页
 1 材料与方法第25-29页
   ·材料第25页
     ·植物材料第25页
     ·主要试剂第25页
     ·主要试剂配制第25页
     ·主要仪器设备第25页
   ·方法第25-29页
     ·染色体标本制作第25-26页
     ·染色体核型分析第26-29页
 2 结果与分析第29-33页
   ·不同预处理对中期分裂相的影响第29页
   ·核型分析第29-33页
     ·染色体数目确定第29页
     ·核型第29-33页
 3 讨论第33-37页
   ·最佳取材时间确定第33页
   ·根尖预处理第33页
   ·核型分析方法第33-34页
   ·不同基因型向日葵的核型分析第34-37页
第二章 向日葵单染色体微切割、微分离、微扩增及SOUTHERN 检测第37-52页
 1 材料与方法第37-46页
   ·材料第37-39页
     ·植物材料第37页
     ·主要试剂第37页
     ·主要试剂配制第37-38页
     ·Sau3AⅠ连接接头制备第38页
     ·引物第38页
     ·主要仪器设备第38-39页
   ·方法第39-46页
     ·染色体标本制备第39页
     ·微细玻璃针制作第39页
     ·染色体显微切割及分离第39-40页
     ·单染色体体外扩增第40-41页
     ·单染色体扩增产物鉴定第41-46页
 2 结果与分析第46-50页
   ·向日葵单染色体的显微切割与分离第46-47页
   ·单染色体体外扩增第47页
   ·SOUTHERN 杂交检测第47-50页
     ·基因组DNA 质量分析及探针标记效率估计第47-48页
     ·Southern 杂交检测第48-50页
 3 讨论第50-52页
   ·向日葵染色体的显微分离第50页
   ·染色体的体外扩增及影响染色体扩增片段大小的因素第50页
   ·污染的控制第50-51页
   ·SOUTHERN 杂交第51-52页
第三章 向日葵单染色体的微克隆与DNA 文库的建立第52-62页
 1 材料与方法第52-57页
   ·材料第52-53页
     ·材料第52页
     ·主要试剂第52页
     ·主要试剂配制第52-53页
     ·主要仪器设备第53页
   ·方法第53-57页
     ·PCR 产物回收纯化第53页
     ·PCR 产物与载体连接第53-54页
     ·大肠杆菌感受态细胞的转化第54页
     ·重组质粒检测第54-57页
 2 结果与分析第57-60页
   ·PCR 产物克隆及单染色体DNA 文库建立第57页
   ·单染色体DNA 文库检测第57-60页
     ·Kisser法检测重组质粒第57-58页
     ·重组质粒PCR 检测第58页
     ·重组质粒酶切鉴定第58-60页
 3 讨论第60-62页
结论第62-63页
致谢第63-64页
参考文献第64-73页
作者简介第73页

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