| 第一部分 IL-33转基因小鼠的建立和IL-33对肺部炎症的增强作用 | 第1-65页 |
| 中文摘要 | 第7-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 引言 | 第10-16页 |
| IL-33的发现 | 第10页 |
| IL-33的结构 | 第10-11页 |
| IL-33在组织中的表达 | 第11页 |
| IL-33和其受体ST2的信号通路和靶细胞 | 第11-13页 |
| IL-33的剪切释放 | 第13页 |
| IL-33和疾病的关系 | 第13-14页 |
| 细胞因子的体内动物模型 | 第14-16页 |
| 实验材料和方法 | 第16-33页 |
| 一、材料 | 第16-19页 |
| 菌株、质粒和细胞系 | 第16页 |
| 实验动物 | 第16页 |
| 限制性内切酶及其它修饰酶类 | 第16页 |
| 抗体 | 第16-17页 |
| 其它主要试剂及试剂盒 | 第17页 |
| 主要仪器 | 第17-19页 |
| 二、方法 | 第19-33页 |
| RNA提取 | 第19页 |
| 反转录 | 第19-20页 |
| PCR | 第20-21页 |
| 质粒构建 | 第21-22页 |
| 酶切反应 | 第21-22页 |
| DNA片段回收 | 第22页 |
| 连接反应 | 第22页 |
| 转化 | 第22页 |
| 质粒DNA提取 | 第22-23页 |
| 质粒DNA的小量制备 | 第22-23页 |
| 质粒DNA的大量制备 | 第23页 |
| 转基因片断的纯化 | 第23页 |
| 转基因小鼠的制备 | 第23-26页 |
| 组织DNA提取 | 第26页 |
| 转基因拷贝数的鉴定 | 第26页 |
| 组织蛋白质的提取 | 第26页 |
| 蛋白质电泳 | 第26-28页 |
| 蛋白质转膜和免疫印迹 | 第28-29页 |
| 肺组织灌洗 | 第29页 |
| 双向电泳 | 第29-30页 |
| 狭缝杂交 | 第30页 |
| 免疫组化 | 第30-31页 |
| HE、PAS和Wright染色 | 第31页 |
| ELISA | 第31页 |
| 流式细胞术 | 第31页 |
| 细胞培养 | 第31-32页 |
| 真核细胞转染 | 第32页 |
| 统计分析 | 第32-33页 |
| 研究内容、结果与讨论 | 第33-58页 |
| 小鼠IL-33基因的组织表达 | 第33-38页 |
| IL-33在新生小鼠各组织的表达 | 第33-34页 |
| IL-33在成体心脏和脑组织中的表达 | 第34-36页 |
| 讨论 | 第36-38页 |
| mIL-33转基因小鼠的建立 | 第38-54页 |
| 小鼠IL-33基因克隆和转基因载体的构建 | 第38-40页 |
| CMV-mIL-33转基因小鼠的制备和筛选 | 第40-43页 |
| IL-33在其他组织中的表达 | 第43-45页 |
| IL-33在小鼠体内的剪切和分泌释放 | 第45-47页 |
| IL-33转基因小鼠的自发肺部炎症 | 第47-52页 |
| 讨论 | 第52-54页 |
| IL-33基因沉默载体的验证 | 第54-58页 |
| IL-33表达于小鼠NIH-3T3细胞系 | 第54-55页 |
| F5 shRNA可以抑制IL-33基因转录 | 第55-57页 |
| 讨论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 第二部分 hXAGE-3转基因研究 | 第65-84页 |
| 中文摘要 | 第66-67页 |
| 英文摘要 | 第67-68页 |
| 引言 | 第68-71页 |
| 实验材料和方法 | 第71-74页 |
| 一、材料 | 第71页 |
| 菌株、质粒 | 第71页 |
| 实验动物 | 第71页 |
| 主要试剂及试剂盒 | 第71页 |
| 主要仪器 | 第71页 |
| 二、实验方法 | 第71-72页 |
| 生物信息学分析 | 第71页 |
| Homologene筛选 | 第71页 |
| 关键词检索 | 第71-72页 |
| 比对分析 | 第72页 |
| TaxPlot数据库 | 第72页 |
| PCR | 第72-73页 |
| 细胞增殖分析 | 第73-74页 |
| 研究内容,结果与讨论 | 第74-82页 |
| XAGE-3作为灵长类种属特异基因的比较基因组学分析 | 第74-77页 |
| XAGE-3转基因小鼠的建立 | 第77-82页 |
| 目的基因的克隆和载体的构建 | 第77-78页 |
| 动物基因型的确定 | 第78-79页 |
| 表达谱系的分析 | 第79-80页 |
| 对于动物生物学行为的影响 | 第80-81页 |
| 讨论 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-84页 |
| 第三部分 hMAN2C1基因的相关研究 | 第84-102页 |
| 中文摘要 | 第85页 |
| 英文摘要 | 第85-86页 |
| 引言 | 第86-88页 |
| 实验材料和方法 | 第88-92页 |
| 质粒和蛋白 | 第88页 |
| 实验动物 | 第88页 |
| 试剂和仪器 | 第88页 |
| 胚胎的冷冻和复苏 | 第88-89页 |
| 多克隆抗体的制备 | 第89-90页 |
| α-甘露糖苷酶酶活分析 | 第90页 |
| PCR | 第90-92页 |
| 研究内容,结果与讨论 | 第92-99页 |
| hMAN2C1多克隆抗体的制备 | 第92-94页 |
| 原核表达hMAN2C1的电泳鉴定 | 第92-93页 |
| PAGE凝胶回收目的片段 | 第93页 |
| 免疫兔制备抗血清 | 第93-94页 |
| 抗血清的鉴定和hMAN2C1在转基因小鼠组织中的分析 | 第94-96页 |
| CMV-hMAN2C1转基因小鼠中组织酶活分析 | 第96-97页 |
| MAN2C1基因沉默转基因小鼠的制备 | 第97-98页 |
| 筛选基因沉默靶序列 | 第97页 |
| 构建基因沉默转基因小鼠 | 第97-98页 |
| 转基因小鼠基因沉默效果 | 第98页 |
| 讨论 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-102页 |
| 缩略语 | 第102-104页 |
| 个人简历 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
