| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 一 前言 | 第9-17页 |
| 1. 前人研究进展和存在的问题 | 第9-16页 |
| ·简述植物防御反应与转录因子的概念 | 第9页 |
| ·植物防御反应 | 第9页 |
| ·转录因子的概念及结构类型 | 第9页 |
| ·WRKY 转录因子家族研究进展 | 第9-15页 |
| ·WRKY 转录因子家族的结构特点 | 第10-11页 |
| ·WRKY 转录因子的调控功能 | 第11-15页 |
| ·WRKY 转录因子对自身表达的调节作用 | 第11-12页 |
| ·WRKY 转录因子在植物防御反应及其在信号转导中的作用. | 第12-14页 |
| ·WRKY 转录因子对植物发育和物质代谢的调节作用. | 第14-15页 |
| ·DREB 转录因子的研究进展 | 第15-16页 |
| ·DREB 转录因子的结构特点 | 第15页 |
| ·DREB 转录因子的调控功能 | 第15-16页 |
| ·DREB 转录因子在逆境应答中的作用 | 第15-16页 |
| 2. 目前存在的的问题 | 第16页 |
| 3. 研究目的和意义 | 第16-17页 |
| 二 材料与方法 | 第17-23页 |
| 1 实验材料 | 第18页 |
| 2. 试验方法 | 第18-23页 |
| ·设计WRKY 基因的引物及扩增目的基因 | 第18-19页 |
| ·利用Getway 克隆技术构建植物超表达载体 | 第19-20页 |
| ·纯化attB-PCR 产物 | 第19-20页 |
| ·BP反应—创建入门载体 | 第20页 |
| ·LR反应----构建目的载体 | 第20页 |
| ·相应植物超表达在的的农杆菌转化及PCR 鉴定 | 第20页 |
| ·转化烟草 | 第20-23页 |
| ·转基因苗的获得 | 第20-21页 |
| ·转基因苗的鉴定 | 第21-23页 |
| 三 结果分析 | 第23-30页 |
| 1 Gateway克隆技术构建植物超表达载体 | 第23-24页 |
| 2 植物超表达载体转化农杆菌及 PCR 检测 | 第24-30页 |
| 四 讨论 | 第30-33页 |
| ·DREB 转录因子在响应渗透胁迫中的可能作用及后续研究 | 第30-31页 |
| ·烟草遗传转化中存在的问题 | 第31-32页 |
| ·烟草转基因植株假阳性检测过程中存在的问题 | 第32页 |
| ·烟草转基因受体材料的选择 | 第32页 |
| ·BP、LR 反应中存在的问题及操作优化 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-40页 |
| 附录1 缩略词及英汉对照 | 第40-41页 |
| 附录2 主要实验仪器 | 第41-42页 |
| 附录3 试验所用主要试剂 | 第42-43页 |
| 附录4 MS 基本培养基配方 | 第43-44页 |
| 附录5 实验所需缓冲液及试剂的配制 | 第44-45页 |
| 附录6 DH5ɑ感受态细胞制备及转化过程 | 第45-46页 |
| 附录7 本文涉及的质粒图谱 | 第46-47页 |
| 附录8 Trizol 法提取烟草叶片 RNA | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48页 |
