摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-25页 |
·柑橘及柑橘衰退病防治研究进展 | 第11-14页 |
·柑橘 | 第11页 |
·柑橘衰退病 | 第11-12页 |
·柑橘衰退病的防治 | 第12-13页 |
·抗柑橘衰退病育种研究进展 | 第13-14页 |
·RNAi原理及其应用研究进展 | 第14-23页 |
·miRNA作用机制 | 第15-16页 |
·siRNA | 第16-18页 |
·piRNA作用机制 | 第18-19页 |
·RNAi的特点 | 第19页 |
·RNAi技术的应用研究 | 第19-21页 |
·RNAi在植物抗病毒工程中的应用 | 第21-22页 |
·RNA沉默抑制因子的研究进展 | 第22-23页 |
·柑橘遗传转化再生系统研究进展 | 第23-25页 |
第二章 引言 | 第25-29页 |
·研究的目的与意义 | 第25-27页 |
·主要技术路线图 | 第27-29页 |
第三章 材料与方法 | 第29-45页 |
·材料 | 第29-32页 |
·试剂 | 第29-30页 |
·主要仪器 | 第30-31页 |
·柑橘材料、质粒和CTV病毒 | 第31-32页 |
·试验方法 | 第32-43页 |
·常规试验方法 | 第32-37页 |
·克隆目标序列 | 第37页 |
·多基因大片段构建策略 | 第37-38页 |
·RNAi载体的构建策略 | 第38-42页 |
·卡那霉素敏感性试验 | 第42页 |
·转化 | 第42-43页 |
·转基因植株的再生 | 第43页 |
·pCAMBIA2301G-HP20转基因植株的评价 | 第43-45页 |
·GUS组织化学染色 | 第43页 |
·PCR检测 | 第43页 |
·CTV攻毒实验 | 第43-45页 |
第四章 结果与分析 | 第45-63页 |
·引物设计结果 | 第45-46页 |
·克隆目标序列 | 第46页 |
·多基因大片段构建 | 第46-48页 |
·P2520片段的拼接 | 第46-47页 |
·P252023片段的拼接 | 第47-48页 |
·RNAi载体pCAMBIA2301-HP2520的构建 | 第48-52页 |
·中间载体pTZ57R-HP2520的构建 | 第48-50页 |
·RNAi载体pCAMBIA2301-HP2520的构建 | 第50-52页 |
·RNAi载体pCAMBIA2301-HP252023的构建 | 第52-55页 |
·中间载体pTZ57R-HP252023的构建 | 第52-53页 |
·RNAi载体pCAMBIA2301-HP252023的构建 | 第53-55页 |
·锦橙上胚轴对卡那霉素的敏感性试验 | 第55页 |
·转化与转基因植株的再生 | 第55-57页 |
·pCAMBIA2301-HP20转基因植株的评价 | 第57-63页 |
·GUS组织化学染色 | 第57-59页 |
·PCR检测 | 第59-60页 |
·CTV攻毒实验 | 第60-63页 |
第五章 讨论 | 第63-71页 |
·CTV沉默抑制因子的拼接 | 第65-66页 |
·RNAi表达载体的构建 | 第66页 |
·柑橘遗传转化体系 | 第66-67页 |
·转基因植株再生 | 第67页 |
·转基因植株的评价 | 第67-68页 |
·外源基因对转基因植株的影响 | 第67页 |
·外源基因整合情况 | 第67-68页 |
·CTV攻毒 | 第68页 |
·利用RNAi防治CTV | 第68-71页 |
第六章 结论 | 第71-73页 |
参考文献 | 第73-87页 |
附录Ⅰ | 第87-99页 |
附录Ⅱ缩略词表 | 第99-101页 |
致谢 | 第101-103页 |
在学期间所发表的文章 | 第103-105页 |
参研的项目 | 第105页 |