| 摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 1 引言 | 第14-28页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第14-15页 |
| ·文献综述 | 第15-26页 |
| ·国内外番茄耐冷性研究进展 | 第15-18页 |
| ·转录因子CBF基因研究进展 | 第18-20页 |
| ·启动子研究进展 | 第20-21页 |
| ·转基因技术在番茄育种上的应用 | 第21-23页 |
| ·番茄转化体系的研究 | 第23-25页 |
| ·转基因作物的安全性 | 第25-26页 |
| ·本研究的内容和技术路线 | 第26-28页 |
| ·本研究的内容 | 第26-27页 |
| ·技术路线 | 第27-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-48页 |
| ·低温胁迫对多毛番茄幼苗生理生化特性的影响 | 第28-32页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-32页 |
| ·多毛番茄中CBF1基因与PMD18-T载体的构建 | 第32-37页 |
| ·材料 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-37页 |
| ·CAMV35S启动子调控多毛番茄中CBF1基因的载体构建 | 第37-39页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-39页 |
| ·RD29A启动子调控多毛番茄中CBF1基因的载体构建 | 第39-40页 |
| ·材料 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-40页 |
| ·植物表达载体转化农杆菌 | 第40-41页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第40页 |
| ·冻融法转化根癌农杆菌 | 第40-41页 |
| ·Ti质粒的筛选和鉴定 | 第41页 |
| ·番茄再生体系及转化体系 | 第41-43页 |
| ·材料 | 第41-42页 |
| ·方法 | 第42-43页 |
| ·农杆菌介导番茄的遗传转化 | 第43-44页 |
| ·番茄无菌苗的培养 | 第43页 |
| ·农杆菌的培养 | 第43页 |
| ·侵染和共培养 | 第43页 |
| ·外植体的筛选 | 第43-44页 |
| ·外植体的继代 | 第44页 |
| ·生根培养 | 第44页 |
| ·驯化移栽 | 第44页 |
| ·抗性植株的PCR检测 | 第44-46页 |
| ·番茄基因组DNA的提取 | 第44-45页 |
| ·引物的设计及PCR检测 | 第45-46页 |
| ·转基因植株的耐低温性检测 | 第46页 |
| ·植物材料 | 第46页 |
| ·低温胁迫诱导 | 第46页 |
| ·CAMV35S和RD29A启动子分别调控类番茄茄中CBF1基因的载体构建 | 第46-48页 |
| ·类番茄茄中CBF1基因与pMD18-T载体的构建 | 第46页 |
| ·CaMV35S调控类番茄茄中CBF1基因的载体构建 | 第46-47页 |
| ·Rd29A启动子调控类番茄茄中CBF1基因的载体构建 | 第47页 |
| ·pCAMhp2408CBF1和pRDhp2408CBF1载体转化农杆菌 | 第47-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-65页 |
| ·低温胁迫对多毛番茄幼苗生理生化特性的影响 | 第48-51页 |
| ·5℃低温胁迫对多毛番茄幼苗MDA和O_2~-含量的影响 | 第48页 |
| ·5℃低温胁迫对多毛番茄幼苗SOD和POD活性的影响 | 第48-49页 |
| ·5℃低温胁迫对多毛番茄幼苗脯氨酸含量和CAT活性的影响 | 第49-50页 |
| ·5℃低温胁迫对多毛番茄幼苗ASA和PAL活性的影响 | 第50-51页 |
| ·5℃低温胁迫对多毛番茄幼苗叶片的影响 | 第51页 |
| ·多毛番茄中CBF1基因与PMD18-T载体的构建 | 第51-53页 |
| ·多毛番茄中CBF1基因的PCR扩增和回收 | 第51-52页 |
| ·菌落的PCR和酶切鉴定 | 第52-53页 |
| ·CAMV35S调控多毛番茄CBF1基因的PCAMHP1033载体构建 | 第53-55页 |
| ·RD29A调控多毛番茄CBF1基因的PRDHP1033载体构建 | 第55-56页 |
| ·植物表达载体PCAMHP1033和PRDHP1033转化农杆菌 | 第56-57页 |
| ·CAMV35S和RD29A启动子分别调控类番茄茄中CBF1基因的载体构建 | 第57-59页 |
| ·CaMV35S调控类番茄茄CBF1基因的pCAMhp2408载体构建 | 第57-58页 |
| ·Rd29A调控类番茄茄CBF1基因的pRDhp2408载体构建 | 第58页 |
| ·pCAMhp2408CBF1和pRDhp2408CBF1载体转化农杆菌 | 第58-59页 |
| ·番茄的遗传转化 | 第59-60页 |
| ·再生植株的PCR检测 | 第60-61页 |
| ·转基因植株的耐低温性检测 | 第61-65页 |
| ·低温胁迫对转化植株的MDA和O_2~-含量的影响 | 第61页 |
| ·低温胁迫对转化植株的SOD和POD活性的影响 | 第61-62页 |
| ·低温胁迫对转化植株的脯氨酸含量和CAT活性的影响 | 第62-63页 |
| ·低温胁迫对转化植株的ASA和PAL活性的影响 | 第63-64页 |
| ·转基因植株的形态观察 | 第64-65页 |
| 4 讨论 | 第65-69页 |
| ·低温与多毛番茄膜脂过氧化 | 第65页 |
| ·低温与多毛番茄膜脂过氧化防御体系 | 第65-66页 |
| ·关于耐冷目的基因的选择 | 第66页 |
| ·关于表达载体构建的策略 | 第66-67页 |
| ·农杆菌转化番茄的影响因素 | 第67页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第67-68页 |
| ·本研究的创新性 | 第68页 |
| ·关于论文的不足之处及工作的延续性 | 第68-69页 |
| 5 结论 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-81页 |
| 图版说明 | 第81-82页 |
| 附录 | 第82-83页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第83页 |
