信号肽对膜蛋白定位的影响

摘要	第1-5页
Abstract	第5-9页
第1章 引言	第9-21页
·信号肽概述	第9-15页
·信号假说的建立	第9-10页
·信号肽的结构	第10-11页
·信号肽的分类	第11-14页
·Sec转运途径	第11-12页
·Tat转运途径	第12-14页
·信号肽的应用	第14-15页
·膜蛋白及表达概述	第15-16页
·碱性磷酸酶	第16-18页
·课题研究意义及方案	第18-21页
第2章 材料与方法	第21-34页
·实验材料	第21-24页
·实验试剂药品与实验仪器	第21-23页
·实验材料	第23-24页
·实验方法	第24-34页
·菌种保藏	第24页
·制备感受态细胞	第24-25页
·合成基因	第25页
·质粒的提取	第25-26页
·相关基因的PCR扩增	第26页
·载体和目的基因的酶切	第26-27页
·质粒载体和目的基因酶切产物的纯化	第27-28页
·目的片段与载体的连接	第28页
·连接产物的转化	第28页
·阳性克隆的初步筛选	第28-29页
·融合质粒的验证	第29页
·重组质粒的测序分析	第29-30页
·融合质粒的转化和筛选	第30页
·重组蛋白的诱导表达	第30页
·分离细胞膜	第30-31页
·Tris-SDS-PAGE电泳	第31页
·酶活检测	第31-32页
·有机溶剂抽提法处理膜蛋白	第32页
·Tricine SDS-PAGE电泳	第32-34页
第3章 表达载体的构建	第34-62页
·验证模板质粒pCLE00和pCLE10	第34-35页
·构建质粒pCLE11和pCLE12	第35-40页
·pCLE11和pCLE12基因克隆与筛选	第35-38页
·质粒pCLE11和pCLE12的测序结果	第38-40页
·构建质粒pCLE13和pCLE14	第40-42页
·pCLE13和pCLE14基因克隆与筛选	第40-41页
·质粒pCLE13和pCLE14的测序结果	第41-42页
·构建质粒pCLE15	第42-45页
·pCLE1 5基因克隆、酶切连接与筛选	第42-44页
·质粒pCLE15的测序结果	第44-45页
·构建质粒pCLE16	第45-47页
·pCLE16基因克隆、酶切连接与筛选	第45-47页
·质粒pCLE16的测序结果	第47页
·构建质粒pCLE17	第47-50页
·构建质粒pCLE18	第50-52页
·pCLE18基因克隆与筛选	第50-52页
·质粒pCLE18的测序结果	第52页
·构建质粒pCLE19	第52-54页
·pCLE19基因克隆与筛选	第52-54页
·质粒pCLE19的测序结果	第54页
·构建质粒pCLE20	第54-56页
·pCLE20基因克隆与筛选	第54-56页
·质粒pCLE20的测序结果	第56页
·构建质粒pCLE21和pCLE22	第56-59页
·质粒pCLE21和pCLE22基因克隆与筛选	第56-58页
·质粒pCLE21和pCLE22的测序结果	第58-59页
·构建质粒pCLE23	第59-61页
·质粒pCLE23基因克隆与筛选	第59-61页
·质粒pCLE23的测序结果	第61页
·小结	第61-62页
第4章 重组蛋白的诱导表达	第62-73页
·带PhoA标签的重组蛋白的诱导表达	第62-66页
·重组蛋白的生长曲线图	第62-64页
·重组蛋白的Tris-SDS-PAGE电泳检测	第64-66页
·带MBP标签的重组蛋白的诱导表达	第66-68页
·不带标签的重组蛋白的诱导表达	第68-71页
·小结	第71-73页
第5章 融合蛋白的酶活检测	第73-77页
·带PhoA标签的重组蛋白之全蛋白酶活检测	第73-74页
·带PhoA标签的重组蛋白之膜蛋白酶活检测	第74-76页
·小结	第76-77页
第6章 结论	第77-79页
致谢	第79-80页
参考文献	第80-85页
攻读学位期间获得与学位论文相关的科研成果	第85页