中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-11页 |
缩略词表 | 第11-13页 |
第一章 序论 | 第13-17页 |
参考文献 | 第15-17页 |
第二章 颈椎后纵韧带成纤维细胞体外培养及机械应力加载装置 | 第17-28页 |
第一节 前言 | 第17页 |
第二节 材料与方法 | 第17-20页 |
1 样本选择 | 第17页 |
2 标本采集 | 第17页 |
3 实验主要仪器及试剂 | 第17-18页 |
4 后纵韧带成纤维细胞体外原代培养 | 第18页 |
5 细胞鉴定 | 第18-20页 |
第三节 实验结果 | 第20-22页 |
1 酶消化培养法 | 第20页 |
2 组织块培养法 | 第20-21页 |
3 HE染色、免疫细胞及免疫荧光技术 | 第21-22页 |
第四节 机械应力加载装置 | 第22-23页 |
第五节 Flexercell4000细胞加载培养系 | 第23-25页 |
1 系统简介 | 第23-24页 |
2 参数设置 | 第24页 |
3 细胞准备及牵张应力刺激 | 第24-25页 |
第六节 讨论 | 第25-26页 |
参考文献 | 第26-28页 |
第三章 机械应力刺激对后纵韧带成纤维细胞成骨分化的影响 | 第28-45页 |
第一节 前言 | 第28-29页 |
第二节 半定量RT-PCR | 第29-37页 |
1 RT-PCR技术介绍 | 第29页 |
2 主要仪器及试剂 | 第29-30页 |
3 实验步骤 | 第30-34页 |
4 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) | 第34-37页 |
第三节 结果 | 第37-42页 |
1 实验设计及分组 | 第37-38页 |
2 机械应力加载对成骨指标的影响 | 第38-42页 |
第四节 讨论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-45页 |
第四章 Connexin43在颈椎后纵韧带骨化进展中的信息传递作用 | 第45-80页 |
第一节 前言 | 第45-46页 |
第二节 Western blot蛋白免疫印迹技术 | 第46-53页 |
1 Western blot技术介绍 | 第46-48页 |
2 主要仪器及试剂 | 第48-49页 |
3 实验步骤 | 第49-53页 |
第三节 RNA干扰技术 | 第53-68页 |
1 RNA干扰技术介绍 | 第53-58页 |
2 本实验中主要仪器及试剂 | 第58页 |
3 实验步骤 | 第58-66页 |
4 siRNA技术成功要点 | 第66-68页 |
第四节 实验结果 | 第68-76页 |
1 实验设计及分组 | 第68页 |
2 Connexin43特异siRNA干扰序列的筛选 | 第68-73页 |
3 骨化组与非骨化组细胞connexin43蛋白的表达差异 | 第73-74页 |
4 Connexin43特异siRNA干扰后骨化组细胞的变化 | 第74-75页 |
5 机械应力对Connexin43 siRNA干扰组骨化细胞的影响 | 第75-76页 |
第五节 讨论 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-80页 |
第五章 全文总结 | 第80-81页 |
综述 | 第81-87页 |
在读期间发表论文 | 第87-88页 |
致谢 | 第88-90页 |
上海市科学技术委员会科研计划项目课题任务书 | 第90页 |