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磷匮乏影响玉米根系发育机制的研究

目录第1-7页
中文摘要第7-14页
Abstract第14-23页
符号说明第23-25页
第一章 前言第25-62页
   ·植物响应磷胁迫机制的研究第25-37页
     ·土壤磷资源状况第25页
     ·磷素在植物生长发育中的作用第25页
     ·植物对低磷胁迫的响应第25-30页
     ·植物对低磷胁迫反应的分子机制第30-37页
   ·植物根系发育的调控第37-43页
     ·根系的主要类型与结构第37-38页
     ·植物根系的发育调控第38-43页
   ·生长素在植物生长发育中的作用第43-59页
     ·生长素极性运输在维管组织分化中的作用第43页
     ·生长素在植物根系生长发育中的作用第43-45页
     ·生长素在植株生长和向性中的作用第45-46页
     ·生长素合成及代谢机制的研究第46-48页
     ·生长素极性分布的调节第48-53页
     ·生长素的作用机制研究第53-57页
     ·生长素信号与细胞分裂素信号的相互作用第57-59页
   ·玉米磷高效育种的意义和根系作物根系改良育种的可行性第59-62页
     ·磷高效转基因育种的研究现状第59页
     ·作物根系改良育种的可行性第59-60页
     ·本工作的目的及意义第60-62页
第二章 玉米自交系Q319和99038的根转录组比较分析第62-96页
   ·材料与方法第63-70页
     ·植物材料第63页
     ·药品及试剂第63页
     ·玉米溶液培养方法第63页
     ·根系形态参数的测定第63页
     ·玉米植株生物量的测定第63-64页
     ·Real-time RT-PCR分析第64页
     ·基因芯片实验方法第64页
     ·玉米根段RNA的抽提与纯化第64页
     ·RNA体外扩增第64-66页
     ·荧光标记的aRNA的合成与回收第66-67页
     ·芯片杂交第67-69页
     ·芯片洗涤第69页
     ·芯片的扫描第69-70页
     ·芯片原始数据的获取和处理第70页
   ·结果与分析第70-93页
     ·不同供磷水平下99038与Q319的生物量和根系形态的差异第70-71页
     ·DNA芯片杂交结果的可靠性分析第71-74页
     ·差异基因的数目及功能分类第74-75页
     ·足磷条件下99038与Q319差异表达基因第75-84页
     ·低磷处理2d时99038和Q319之间的差异表达基因第84-86页
     ·低磷处理8d时99038与Q319的差异表达基因第86-93页
   ·讨论第93-96页
     ·玉米磷吸收和利用效率的差别取决于多个基因的差异表达第93页
     ·多种激素信号参与了玉米根系构型和生长速率的调节第93-94页
     ·低磷胁迫对玉米根系性状的影响涉及多个重要基因的表达改变第94-96页
第三章 转ZmPTF1促进玉米根系发育提高了玉米耐低磷特性第96-116页
   ·材料与方法第96-99页
     ·植物材料和质粒、菌株第96-97页
     ·药品、试剂和培养基(液)第97页
     ·ZmPTF1植物表达载体的鉴定及农杆菌转化第97页
     ·农杆菌介导的玉米芽尖遗传转化和转基因植株检测第97页
     ·ZmPTF1及下游基因的表达分析第97-98页
     ·ZmPTF1启动子元件分析第98页
     ·植株生长发育过程中形态学观察分析方法第98页
     ·生物量、可溶性糖和植株磷含量测定第98-99页
   ·结果与分析第99-114页
     ·内源ZmPTF1拷贝数和表达模式分析第99-100页
     ·玉米遗传转化和转基因植株的检测第100-104页
     ·不同磷供给水平下植株形态生物量分析第104-107页
     ·不同磷供给水平下V5期植株磷含量测定第107-108页
     ·转基因植株可溶性糖含量变化第108-110页
     ·ZmPTF1下游基因的表达分析第110-111页
     ·与糖代谢相关基因的表达分析第111-114页
   ·讨论第114-116页
第四章 生长素极性运输相关基因在玉米根系发育中的表达变化第116-141页
   ·材料与方法第118-122页
     ·植物材料、菌株及质粒载体第118页
     ·试剂盒及试剂第118页
     ·数据库及软件第118-119页
     ·玉米生长素极性运输相关基因的生物信息学资料的利用第119-120页
     ·用于基因克隆的cDNA制备和基因克隆第120页
     ·玉米生长素极性运输相关基因的克隆第120-121页
     ·各基因启动子序列的电子克隆及分析第121页
     ·玉米生长素极性运输相关基因的表达模式分析第121-122页
   ·结果与分析第122-138页
     ·生长素极性运输相关基因的克隆和生物信息学分析第122-132页
     ·生长素极性运输相关基因启动子元件分析第132-135页
     ·不同器官和不同供磷水平下生长素极性运输相关基因表达模式分析第135-138页
   ·讨论第138-141页
第五章 转ZmPIN1a/1b基因对玉米生长发育和磷胁迫抗性的影响第141-177页
   ·材料与方法第142-144页
     ·材料第142页
     ·方法第142-143页
     ·玉米芽尖遗传转化和转基因植株的分子检测第143页
     ·植株形态学分析方法第143-144页
     ·转基因植株数字基因表达谱分析第144页
   ·结果与分析第144-174页
     ·植物表达载体pCAMBIA-Prsp::ZmPIN1a/1b-Tnos-P35S::EPSP的构建第145页
     ·玉米遗传转化植株的选择和分子鉴定第145-147页
     ·转ZmPIN1a/1b基因植株的表型分析第147-153页
     ·ZmPIN1a过表达对玉米产量性状和抗逆性的影响第153-156页
     ·不同供磷水平下添加生长调节物质对转ZmPIN1a植株和对照植株的影响第156-158页
     ·生长素极性运输相关基因在转ZmPIN1a基因株系中的表达分析第158-160页
     ·转ZmPIN1a基因植株数字表达谱分析第160-174页
   ·讨论第174-177页
第六章 转ZmAUX1基因对玉米根系生长和低磷胁迫的反应第177-189页
   ·材料与方法第177-178页
     ·材料第177页
     ·方法第177-178页
   ·结果与分析第178-188页
     ·植物表达载体pCAMBIA1300-Pubi::ZmAUX1-Tnos-P35S::EPSP构建第178页
     ·转基因植株的获得第178页
     ·转基因后代的分子鉴定第178-181页
     ·转ZmAUX1正、反义基因植株的表型分析第181-187页
     ·ZmAUX1表达水平对生长素极性运输相关基因表达的影响第187-188页
   ·讨论第188-189页
第七章 结语第189-194页
参考文献第194-213页
附录Ⅰ 材料与方法第213-223页
附录Ⅱ 第二章中部分实验结果第223-236页
附录Ⅲ 第三章中部分实验结果第236-240页
附录Ⅳ 第四章中部分实验结果第240-271页
附录Ⅴ 第五章中部分实验结果第271-296页
博士学习期间发表的文章及申请的专利第296-297页
致谢第297-298页
学位论文评阅及答辩情况表第298页

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