| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 前言 | 第8-10页 |
| 1 材料、试剂和仪器 | 第10-14页 |
| ·细胞株 | 第10页 |
| ·主要试剂 | 第10-11页 |
| ·主要试剂配制 | 第11-13页 |
| ·仪器 | 第13-14页 |
| 2 实验方法与步骤 | 第14-25页 |
| ·细胞培养 | 第14-15页 |
| ·冻存细胞的复苏 | 第14页 |
| ·细胞传代 | 第14页 |
| ·细胞冻存 | 第14-15页 |
| ·MTT 法测定酒精对PC12 细胞增殖的影响 | 第15-16页 |
| ·细胞生长抑制试验-MTT | 第15-16页 |
| ·HOECHST 33258 染色观察PC12 细胞凋亡形态学变化 | 第16页 |
| ·免疫细胞荧光检测LC3 自噬小体 | 第16-17页 |
| ·高内涵活细胞成像系统测定细胞凋亡率和自噬率 | 第17-18页 |
| ·高内涵活细胞成像系统测定细胞凋亡率 | 第17-18页 |
| ·高内涵活细胞成像系统测定细胞自噬率 | 第18页 |
| ·电子显微镜标本的制备 | 第18-19页 |
| ·WESTERN BLOTTING检测自噬和凋亡相关蛋白的表达情况 | 第19-24页 |
| ·细胞总蛋白的提取 | 第19页 |
| ·考马斯亮蓝G250 法定量细胞总蛋白 | 第19-20页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）电泳 | 第20-23页 |
| ·蛋白质转印 | 第23页 |
| ·Western blotting 检测LC3，Beclin-1，p53，Bcl-2，β-actin 蛋白量 | 第23-24页 |
| ·统计学分析 | 第24-25页 |
| 3 结果 | 第25-32页 |
| ·MTT 法测定酒精对PC12 细胞增殖的影响 | 第25页 |
| ·HOECHST 33258 染色观察PC12 细胞凋亡形态学变化 | 第25-26页 |
| ·免疫细胞荧光检测LC3 自噬小体 | 第26-27页 |
| ·高内涵活细胞成像系统检测细胞凋亡率与自噬率 | 第27-30页 |
| ·透射电子显微镜观察细胞超微结构改变 | 第30-31页 |
| ·WESTERN BLOTTING 检测自噬和凋亡相关蛋白的表达情况 | 第31-32页 |
| 4 结论 | 第32-33页 |
| 5 讨论 | 第33-37页 |
| ·建立酒精诱导PC12 损伤模型 | 第33-34页 |
| ·酒精对PC12 细胞自噬的影响 | 第34-35页 |
| ·酒精致PC12 细胞损伤中自噬与凋亡的相互关系 | 第35-37页 |
| 参考文献 | 第37-40页 |
| 文献综述 | 第40-53页 |
| 一、自噬的概念与分类 | 第40-42页 |
| 1 自噬的概念 | 第40-42页 |
| 2 自噬的分类 | 第42页 |
| 二、自噬的分子机制 | 第42-44页 |
| 三、自噬的双重功能 | 第44-49页 |
| 1. 自噬与细胞存活 | 第44-46页 |
| 2. 自噬与细胞死亡 | 第46-49页 |
| 四、展望 | 第49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 附录 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
