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游离胆固醇过载诱导平滑肌细胞损伤的相关机制研究

致谢第1-11页
摘要第11-14页
Abstract第14-16页
第一章 绪论第16-52页
   ·动脉粥样硬化疾病的病理生理学及研究概况第17-24页
     ·动脉粥样硬化病理学和病因学基础第17-19页
     ·动脉粥样硬化的危险因素第19-21页
     ·动脉粥样硬化的发病学说第21-23页
     ·动脉粥样硬化的研究方法第23-24页
   ·细胞凋亡和动脉粥样硬化第24-35页
     ·细胞凋亡的基本概念第24-25页
     ·线粒体与细胞凋亡第25-29页
     ·内质网与细胞凋亡第29-32页
     ·细胞死亡与动脉粥样硬化疾病第32-35页
   ·胆固醇与细胞器压力第35-39页
     ·胆固醇在细胞内的代谢途径第36页
     ·胆固醇在细胞内转运的机理第36-37页
     ·胆固醇在细胞内转运的通道第37-38页
     ·ACAT酶,游离胆固醇以及动脉粥样硬化第38-39页
   ·自噬现象及相关疾病第39-49页
     ·细胞程序性死亡与自噬第39-41页
     ·自噬发生及其信号通路第41-44页
     ·自噬和细胞死亡及存活第44-46页
     ·自噬与人类疾病第46-49页
   ·本课题的研究目的、内容与意义第49-52页
     ·本课题的研究目的第49页
     ·本课题的研究内容第49-50页
     ·本课题的研究意义第50-52页
第二章 胆固醇过载诱导平滑肌细胞早期功能损伤的相关机制研究第52-76页
   ·前言第52-53页
   ·材料与方法第53-59页
     ·实验材料第53-54页
     ·大鼠胸主动脉平滑肌细胞的培养第54-55页
     ·平滑肌细胞的鉴定第55-56页
     ·平滑肌细胞胆固醇过载模型的建立以及油红染色法鉴定平滑肌细胞泡沫化。第56-57页
     ·平滑肌细胞内Ca2+和线粒体内Ca2+在胆固醇过载模型中的变化第57-58页
     ·平滑肌细胞内超氧阴离子(ROS)含量在胆固醇过载模型中的变化第58页
     ·平滑肌细胞内线粒体的标记第58-59页
     ·数据统计第59页
   ·实验结果第59-73页
     ·大鼠胸主动脉平滑肌细胞的培养和鉴定第59-61页
     ·滑肌细胞胆固醇过载模型的建立以及油红染色法鉴定平滑肌细胞泡沫化。第61-62页
     ·平滑肌细胞内Ca2+在胆固醇过载模型中的变化第62-63页
     ·平滑肌细胞内线粒体内Ca2+在胆固醇过载模型中的变化第63-64页
     ·平滑肌细胞内活性氧(ROS)含量在胆固醇过载模型中的变化第64-65页
     ·胆固醇过载模型中线粒体结构的变化第65-73页
   ·分析与讨论第73-76页
第三章:游离胆固醇过载诱导平滑肌细胞凋亡及其相关机制研究第76-102页
   ·前言第76-77页
   ·材料与方法第77-86页
     ·实验材料第77-79页
     ·平滑肌细胞活性的测定第79-80页
     ·流式细胞仪测定平滑肌细胞周期第80-81页
     ·胆固醇过载对线粒体膜电位的影响第81-82页
     ·胆固醇过载对细胞内超氧阴离子浓度的影响第82页
     ·平滑肌细胞凋亡坏死的测定第82-83页
     ·蛋白提取与免疫印迹第83-85页
     ·细胞免疫荧光测定cyto C的释放第85-86页
     ·数据统计第86页
   ·实验结果第86-98页
     ·游离胆固醇过载对平滑肌细胞活性的影响第86-88页
     ·游离胆固醇过载对平滑肌细胞周期的影响第88-90页
     ·游离胆固醇过载对平滑肌细胞凋亡坏死的影响第90-92页
     ·游离胆固醇过载对平滑肌细胞线粒体膜电位的影响第92-94页
     ·游离胆固醇过载对平滑肌细胞内超氧阴离子浓度(ROS)的影响第94-95页
     ·游离胆固醇过载对平滑肌细胞内bcl-2、bax蛋白表达以及cyto C放的影响第95-96页
     ·游离胆固醇过载激活平滑肌细胞内质网压力第96-98页
   ·分析与讨论第98-102页
第四章:自噬在游离胆固醇诱导的平滑肌死亡过程中的相关机制研究第102-124页
   ·前言第102-103页
   ·材料与方法第103-107页
     ·实验材料第103-104页
     ·平滑肌细胞凋亡坏死的测定第104-105页
     ·平滑肌细胞透射电镜成像第105-106页
     ·平滑肌细胞内自噬溶酶体的标记第106页
     ·平滑肌细胞内线粒体膜电位的测定第106-107页
     ·蛋白提取于免疫印迹第107页
     ·线粒体和自噬溶酶体共定位的标记第107页
     ·数据统计第107页
   ·实验结果第107-120页
     ·过量游离胆固醇诱导平滑肌细胞死亡第107-109页
     ·游离胆固醇过载诱导平滑肌细胞内自噬现象的产生第109-113页
     ·自噬对过量游离胆固醇诱导的平滑肌细胞死亡起保护作用第113-116页
     ·自噬清除游离胆固醇诱导的损伤细胞器第116-118页
     ·自噬减轻了细胞器损伤造成的细胞压力第118-120页
   ·讨论与分析第120-124页
第五章 总结与展望第124-129页
   ·研究工作总结第124-127页
   ·研究工作创新点第127-128页
   ·研究工作展望第128-129页
参考文献第129-140页
攻读博士学位期间主要的研究成果第140-141页

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