| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-31页 |
| 1 H-Y抗原的研究进展 | 第15-23页 |
| ·H-Y抗原的分子基础研究 | 第15-19页 |
| ·H-Y抗体的制备和应用 | 第19-23页 |
| ·H-Y抗体的制备 | 第19-20页 |
| ·H-Y抗体的应用 | 第20-23页 |
| 2 链替换技术提高噬菌体抗体亲和力的研究进展 | 第23-30页 |
| ·噬菌体抗体库技术 | 第23-25页 |
| ·链替换的原理 | 第25-26页 |
| ·链替换的策略 | 第26-28页 |
| ·链替换的实际应用 | 第28-30页 |
| 3 本研究的目的意义 | 第30-31页 |
| 第二章 抗血清学检测的H-Y抗原Fab抗体的表达和特异性鉴定 | 第31-45页 |
| 1 材料与方法 | 第31-38页 |
| ·材料 | 第31-33页 |
| ·主要试剂 | 第31-32页 |
| ·菌株和载体 | 第32页 |
| ·主要仪器 | 第32-33页 |
| ·实验动物 | 第33页 |
| ·方法 | 第33-38页 |
| ·试剂的配制 | 第33-34页 |
| ·睾丸细胞悬液的制备 | 第34页 |
| ·H-Y抗血清的制备 | 第34页 |
| ·Fab抗体可溶性表达噬质粒的构建 | 第34-35页 |
| ·Fab抗体的可溶性表达及Western blot分析 | 第35-36页 |
| ·Fab抗体的特异性分析 | 第36-37页 |
| ·Fab抗体的ELISA鉴定 | 第37-38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-42页 |
| ·Fab抗体可溶性表达噬质粒的构建及表达 | 第38-40页 |
| ·Fab抗体的特异性鉴定 | 第40-42页 |
| ·细胞免疫荧光分析 | 第40页 |
| ·石蜡切片免疫荧光分析 | 第40-42页 |
| ·ELISA分析 | 第42页 |
| 3 讨论 | 第42-45页 |
| 第三章 利用链替换技术提高抗血清学检测的H-Y抗原Fab抗体的亲和力 | 第45-64页 |
| 1 材料与方法 | 第46-52页 |
| ·材料 | 第46-47页 |
| ·主要试剂 | 第46页 |
| ·主要仪器 | 第46页 |
| ·实验动物 | 第46-47页 |
| ·方法 | 第47-52页 |
| ·雌性小鼠脾脏组织总RNA提取 | 第47页 |
| ·扩增多样性的鼠Fab抗体基因 | 第47-48页 |
| ·辅助噬菌体的制备 | 第48页 |
| ·轻链基因库的构建 | 第48-50页 |
| ·轻链替换库的构建 | 第50页 |
| ·重链基因库的构建 | 第50-51页 |
| ·重链替换库的构建 | 第51页 |
| ·噬菌体抗体库的筛选 | 第51-52页 |
| ·噬菌体抗体的ELISA分析 | 第52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-59页 |
| ·RNA的提取 | 第52-53页 |
| ·噬菌体Fab抗体基因的扩增 | 第53-54页 |
| ·轻链基因库的构建 | 第54页 |
| ·轻链替换 | 第54-56页 |
| ·重链基因库构建 | 第56页 |
| ·重链替换 | 第56-57页 |
| ·噬菌体抗体库的筛选 | 第57-59页 |
| 3 讨论 | 第59-64页 |
| ·保证抗体基因文库的多样性 | 第60-61页 |
| ·轻链和重链替换 | 第61页 |
| ·抗体库的筛选 | 第61-62页 |
| ·抗体亲和力的提高 | 第62-64页 |
| 第四章 高亲和力抗血清学检测的H-Y抗原Fab抗体的表达和鉴定 | 第64-77页 |
| 1 材料与方法 | 第64-66页 |
| ·材料 | 第64-65页 |
| ·主要试剂 | 第64-65页 |
| ·主要仪器 | 第65页 |
| ·实验动物 | 第65页 |
| ·方法 | 第65-66页 |
| ·高亲和力噬菌体抗体的蛋白表达和Western blot分析 | 第65页 |
| ·高亲和力噬菌体抗体的ELISA分析 | 第65-66页 |
| ·高亲和力噬菌体抗体的免疫组化分析 | 第66页 |
| ·高亲和力阳性克隆序列测定与结构分析 | 第66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-74页 |
| ·细胞免疫荧光分析 | 第66-69页 |
| ·石蜡切片免疫荧光分析 | 第69页 |
| ·ELISA分析 | 第69-70页 |
| ·抗体基因的序列分析 | 第70-74页 |
| 3 讨论 | 第74-77页 |
| ·高亲和力噬菌体抗体的蛋白表达 | 第74页 |
| ·Fab抗体的免疫荧光分析 | 第74-75页 |
| ·抗体基因同源性分析 | 第75-77页 |
| 第五章 利用高亲和力Fab抗体鉴定小鼠早期胚胎的性别 | 第77-85页 |
| 1 材料与方法 | 第77-79页 |
| ·材料 | 第77-78页 |
| ·主要试剂 | 第77-78页 |
| ·主要仪器 | 第78页 |
| ·实验动物 | 第78页 |
| ·方法 | 第78-79页 |
| ·昆明系小白鼠早期胚胎的采集 | 第78页 |
| ·PCR性别鉴定体系的确定 | 第78-79页 |
| ·胚胎的间接免疫荧光实验 | 第79页 |
| ·PCR法性别鉴定 | 第79页 |
| 2 结果与分析 | 第79-82页 |
| ·PCR性别鉴定体系的确定 | 第79-82页 |
| ·胚胎的间接免疫荧光实验 | 第82页 |
| 3 讨论 | 第82-85页 |
| 第六章 总结 | 第85-87页 |
| 1 研究的主要结论 | 第85页 |
| 2 研究特色和创新点 | 第85-86页 |
| 3 后续研究计划 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-100页 |
| 缩写词表 | 第100-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 作者简历 | 第103-104页 |
