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MicroRNA-30a靶向作用于Beclin-1对小鼠心肌细胞自噬和凋亡的调控机制的研究

摘要第4-11页
Abstract第11-20页
中英文缩写第24-27页
第一部分 小鼠心肌细胞饥饿模型的成功建立及MICRORNA-30A表达水平的改变第27-48页
    1 材料和仪器第28-32页
        1.1 主要仪器第28-29页
        1.2 主要试剂第29-30页
        1.3 主要溶液配制第30-32页
    2 实验方法第32-38页
        2.1 小鼠心肌细胞饥饿模型的成功构建第32-33页
        2.2 检测小鼠心肌细胞自噬水平第33-36页
        2.3 在饥饿心肌细胞中MICRORNA-30A的表达水平的分析第36-38页
        2.4 统计学分析第38页
    3 研究结果第38-42页
        3.1 MICRORNA-30A在心肌细胞饥饿模型中的表达变化第38-39页
        3.2 EBSS饥饿处理成功诱导小鼠心肌细胞发生自噬第39-42页
    4 讨论第42-45页
    参考文献第45-48页
第二部分 MICRORNA-30A在饥饿诱导的心肌细胞自噬中的作用第48-75页
    1 仪器及材料第49-50页
        1.1 实验主要仪器第49页
        1.2 实验主要试剂第49-50页
        1.3 主要溶液配制第50页
    2 实验方法第50-58页
        2.1 小鼠心肌细胞的分离培养(详细具体操作步骤见第一部分)第50页
        2.2 MICRORNA-30A调控心肌细胞自噬水平第50-57页
        2.3 心肌细胞自噬水平的检测第57页
        2.4 成功构建小鼠心梗模型和评估心肌自噬水平第57-58页
        2.5 统计学分析第58页
    3 研究结果第58-70页
        3.1 过表达MICRORNA-30A对小鼠心肌细胞自噬的调控作用第58-63页
        3.2 抑制MICRORNA-30A对心肌细胞自噬能力的调控作用第63-67页
        3.3 MICRORNA-30A对于小鼠心梗中梗死心肌自噬能力的调控第67-70页
    4 讨论第70-72页
    参考文献第72-75页
第三部分 MICRORNA-30A在饥饿诱导的心肌细胞凋亡中的作用第75-89页
    1 材料和仪器第76页
        1.1 实验仪器第76页
        1.2 主要的试剂第76页
        1.3 配制实验用主要溶液第76页
    2 实验方法第76-79页
        2.1 分离及培养小鼠心肌细胞(详细步骤参见前一部分,这里不再赘述)第76页
        2.2 MICRORNA-30A调控小鼠心肌细胞凋亡第76-77页
        2.3 流式细胞技术检测心肌细胞的凋亡水平第77页
        2.4 小鼠心梗模型的建立和心肌凋亡水平检测第77-79页
        2.5 统计学分析第79页
    3 研究结果第79-84页
        3.1 MICRORNA-30A的过表达对小鼠心肌细胞凋亡水平的调控作用第79-81页
        3.2 抑制MICRORNA-30A对于心肌细胞凋亡的调控作用第81-82页
        3.3 过表达MICRORNA-30A可以抑制缺血引起的凋亡第82-84页
    4 讨论第84-87页
    参考文献第87-89页
第四部分 MICRORNA-30A调控心肌细胞自噬和凋亡靶基因预测及验证第89-101页
    1 材料和仪器第90页
        1.1 主要实验仪器第90页
        1.2 主要实验试剂第90页
        1.3 主要溶液配制第90页
    2 实验方法第90-93页
        2.1 分离并培养小鼠心肌细胞(详细步骤参见第一部分,这里不再赘述)第90页
        2.2 预测靶基因采用生物信息学检索第90-91页
        2.3 靶基因的验证用双荧光素酶报告基因第91-92页
        2.4 MICRORNA-30A对靶基因表达的调控第92-93页
        2.5 统计学分析第93页
    3 研究结果第93-96页
        3.1 生物信息学检索及验证MICRORNA-30A的靶基因第93-94页
        3.2 MICRORNA-30A对心肌细胞BECLIN-1 蛋白表达调控作用第94-96页
    4 讨论第96-99页
    参考文献第99-101页
综述 MIRNA与心血管系统疾病第101-117页
    参考文献第109-117页
个人简历第117-118页
致谢第118页

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