| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 绪论 | 第11-26页 |
| 1.1 根瘤菌与生物固氮 | 第11-16页 |
| 1.1.1 根瘤菌侵染初期 | 第11-12页 |
| 1.1.2 信号转导与根瘤形成 | 第12-13页 |
| 1.1.3 侵染线的形成与根瘤定殖 | 第13-14页 |
| 1.1.4 N_2固定与物质运输 | 第14-16页 |
| 1.2 类菌体中根瘤菌的生理反应 | 第16-18页 |
| 1.2.1 氧化应激 | 第16-17页 |
| 1.2.2 有机过氧化物 | 第17-18页 |
| 1.2.3 低氧环境 | 第18页 |
| 1.3 过氧化物还原酶（Peroxiredoxin） | 第18-24页 |
| 1.3.1 过氧化物还原酶的分类与催化机制 | 第19-21页 |
| 1.3.2 过氧化物还原酶PrxⅡ | 第21-24页 |
| 1.4 RL3841中过氧化物还原酶Ⅱ的敲除方法 | 第24-25页 |
| 1.4.1 单交换 | 第24页 |
| 1.4.2 双交换 | 第24-25页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第25-26页 |
| 第二章 豌豆根瘤菌过氧化物酶Ⅱ基因突变体的构建 | 第26-43页 |
| 2.1 材料 | 第26-31页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第26-27页 |
| 2.1.2 试剂和仪器 | 第27-30页 |
| 2.1.3 培养基和抗生素 | 第30-31页 |
| 2.2 方法 | 第31-35页 |
| 2.2.1 菌株总DNA提取 | 第31-32页 |
| 2.2.2 革兰氏阴性菌质粒提取 | 第32页 |
| 2.2.3 DH5α感受态制备 | 第32-33页 |
| 2.2.4 转化 | 第33页 |
| 2.2.5 豌豆根瘤菌噬菌体裂解液的制备 | 第33页 |
| 2.2.6 三亲本结合 | 第33-34页 |
| 2.2.7 根瘤prxⅡ突变体的构建 | 第34-35页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第35-42页 |
| 2.3.1 RL3841 prxⅡs生物信息学分析 | 第35-36页 |
| 2.3.2 prxⅡs单基因突变体的构建 | 第36-42页 |
| 2.4 小结 | 第42-43页 |
| 第三章 豌豆根瘤菌prxⅡ基因的抗氧化功能 | 第43-47页 |
| 3.1 材料 | 第43页 |
| 3.1.1 菌株 | 第43页 |
| 3.1.2 试剂与仪器 | 第43页 |
| 3.2 方法 | 第43-44页 |
| 3.2.1 无H_2O_2胁迫下菌株的生长 | 第43页 |
| 3.2.2 氧化物抑菌实验 | 第43-44页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第44-46页 |
| 3.3.1 prxⅡ突变对菌株生长的影响 | 第44页 |
| 3.3.2 氧化物抑菌实验 | 第44-46页 |
| 3.4 小结 | 第46-47页 |
| 第四章 豌豆根瘤菌prxⅡ基因在共生固氮中的功能 | 第47-54页 |
| 4.1 材料 | 第47-48页 |
| 4.1.1 菌株与植物种子 | 第47页 |
| 4.1.2 试剂和仪器 | 第47-48页 |
| 4.2 方法 | 第48页 |
| 4.2.1 盆栽实验 | 第48页 |
| 4.2.2 根瘤石蜡包埋及透射电镜切片 | 第48页 |
| 4.2.3 根瘤固氮酶活测定 | 第48页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第48-52页 |
| 4.3.1 植物盆栽实验 | 第48-50页 |
| 4.3.2 根瘤石蜡及电镜切片图 | 第50-52页 |
| 4.4 小结 | 第52-54页 |
| 第五章 豌豆根瘤菌prxⅡ基因的表达分析 | 第54-61页 |
| 5.1 材料 | 第54页 |
| 5.1.1 菌株 | 第54页 |
| 5.1.2 试剂和仪器 | 第54页 |
| 5.2 方法 | 第54-56页 |
| 5.2.1 菌液RNA提取 | 第54-55页 |
| 5.2.2 去除gDNA（Takara试剂盒） | 第55页 |
| 5.2.3 RNA反转录成cDNA（Takara试剂盒） | 第55页 |
| 5.2.4 RT-PCR体系及反应 | 第55页 |
| 5.2.5 不同时期根瘤中基因的表达 | 第55页 |
| 5.2.6 双氧水胁迫下基因的表达 | 第55-56页 |
| 5.2.7 厌氧条件下基因的表达 | 第56页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第56-59页 |
| 5.3.1 不同时期根瘤中基因的表达 | 第57-58页 |
| 5.3.2 H_2O_2胁迫下prxⅡ基因的表达 | 第58页 |
| 5.3.3 厌氧条件下prxⅡ基因的表达 | 第58-59页 |
| 5.4 小结 | 第59-61页 |
| 第六章 总结与展望 | 第61-62页 |
| 6.1 总结 | 第61页 |
| 6.2 展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第71页 |
