摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5-6页 |
第1章 文献综述 | 第10-19页 |
1.1 表皮葡萄球菌生物膜形成及危害 | 第10-13页 |
1.1.1 初始附着期 | 第11页 |
1.1.2 聚集时期 | 第11-13页 |
1.2 生物膜形成抑制机理 | 第13-18页 |
1.3 技术路线 | 第18-19页 |
第2章 放线菌TRM41337抑制表皮葡萄球菌生物膜形成能力发酵条件优化 | 第19-40页 |
2.1 材料与方法 | 第19-24页 |
2.1.1 材料 | 第19-20页 |
2.1.2 实验方法 | 第20-21页 |
2.1.3 发酵培养基的优化 | 第21页 |
2.1.4 发酵条件的优化 | 第21-23页 |
2.1.5 活性检测 | 第23-24页 |
2.2 结果与分析 | 第24-38页 |
2.2.1 发酵培养基的确定 | 第24-29页 |
2.2.2 发酵条件优化 | 第29-32页 |
2.2.3 影响发酵液活性关键因素的筛选 | 第32-34页 |
2.2.4 最陡爬坡实验结果 | 第34-35页 |
2.2.5 响应面试验设计结果 | 第35-37页 |
2.2.6 验证实验 | 第37页 |
2.2.7 发酵液蛋白酶活性检测结果 | 第37-38页 |
2.3 结论与分析 | 第38-40页 |
第3章 抑制表皮葡萄球菌生物膜形成活性蛋白的分离纯化 | 第40-62页 |
3.1 材料 | 第40-41页 |
3.1.1 菌株来源 | 第40页 |
3.1.2 主要仪器 | 第40-41页 |
3.1.3 培养基及试剂 | 第41页 |
3.2 方法 | 第41-43页 |
3.2.1 放线菌TRM41337菌株的活化及发酵液的制备 | 第41页 |
3.2.2 放线菌TRM41337发酵液蛋白的获取 | 第41页 |
3.2.3 放线菌TRM41337发酵液蛋白的分离纯化 | 第41页 |
3.2.4 Sephadex-G100凝胶预处理 | 第41-43页 |
3.2.5 蛋白的含量的测定 | 第43页 |
3.2.6 SDS-PAGE检测 | 第43页 |
3.2.7 Sephadex-G75凝胶处理及纯化 | 第43页 |
3.3 发酵液粗蛋白及纯化后蛋白对生物膜形成的影响 | 第43页 |
3.4 放线菌TRM41337发酵液蛋白的鉴定 | 第43-44页 |
3.4.1 放线菌TRM41337发酵液蛋白相对分子质量的测定 | 第43-44页 |
3.4.2 放线菌TRM41337发酵液蛋白序列鉴定 | 第44页 |
3.4.3 放线菌TRM41337发酵液蛋白的氨基酸组成分析 | 第44页 |
3.4.4 放线菌TRM41337发酵液蛋白数据统计与分析 | 第44页 |
3.5 纯化后蛋白经不同理化因素处理后对生物膜形成能力的影响 | 第44-46页 |
3.5.1 不同pH值 | 第44页 |
3.5.2 不同温度 | 第44-45页 |
3.5.3 纯化后蛋白经不同有机试剂处理后对生物膜形成能力的检测 | 第45页 |
3.5.4 纯化后蛋白经不同化学物质处理后对生物膜形成能力的检测 | 第45页 |
3.5.5 纯化后蛋白经不同金属离子处理后对生物膜形成能力的检测 | 第45-46页 |
3.6 结果与分析 | 第46-60页 |
3.6.1 蛋白含量及SDS-PAGE检测 | 第46-47页 |
3.6.2 蛋白质LC-MS测定结果与N端测序 | 第47-50页 |
3.6.3 纯化后蛋白经不同pH值处理后对生物膜形成能力的检测 | 第50页 |
3.6.4 纯化后蛋白经不同温度处理后对生物膜形成能力的检测 | 第50-51页 |
3.6.5 纯化后蛋白经不同有机试剂处理后对生物膜形成能力的检测 | 第51-52页 |
3.6.6 纯化后蛋白经不同化学物质处理后对抑制表皮葡萄球菌生物膜形成能力的检测 | 第52-56页 |
3.6.7 不同金属离子对纯化后蛋白生物膜形成能力的影响 | 第56-60页 |
3.7 结论与分析 | 第60-62页 |
3.7.1 活性蛋白分离纯化及鉴定 | 第60页 |
3.7.2 纯化后蛋白稳定性 | 第60-62页 |
第4章 活性蛋白抑制表皮葡萄球菌生物膜形成机理的初步研究 | 第62-73页 |
4.1 材料与方法 | 第62-65页 |
4.1.1 实验菌株 | 第62页 |
4.1.2 培养基及溶液 | 第62页 |
4.1.3 纯化后蛋白作用机理的初步研究 | 第62-65页 |
4.2 结果与分析 | 第65-71页 |
4.2.1 纯化后蛋白对表皮葡萄球菌生物膜形成的影响 | 第65-66页 |
4.2.2 纯化后蛋白对表皮葡萄球菌生物膜形成不同阶段的影响 | 第66-68页 |
4.2.3 纯化后蛋白对表皮葡萄球菌细胞表面疏水性的影响 | 第68页 |
4.2.4 纯化后蛋白对表皮葡萄球菌胞外蛋白的影响 | 第68-69页 |
4.2.5 纯化后蛋白对表皮葡萄球菌胞外DNA的影响 | 第69-70页 |
4.2.6 纯化后蛋白对表皮葡萄球菌胞外多糖的影响 | 第70-71页 |
4.3 结论与分析 | 第71-73页 |
第5章 结论与展望 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
作者简介 | 第79页 |