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一株放线菌抑制表皮葡萄球菌生物膜形成能力及其活性蛋白抑制机制的研究

摘要第4-5页
abstract第5-6页
第1章 文献综述第10-19页
    1.1 表皮葡萄球菌生物膜形成及危害第10-13页
        1.1.1 初始附着期第11页
        1.1.2 聚集时期第11-13页
    1.2 生物膜形成抑制机理第13-18页
    1.3 技术路线第18-19页
第2章 放线菌TRM41337抑制表皮葡萄球菌生物膜形成能力发酵条件优化第19-40页
    2.1 材料与方法第19-24页
        2.1.1 材料第19-20页
        2.1.2 实验方法第20-21页
        2.1.3 发酵培养基的优化第21页
        2.1.4 发酵条件的优化第21-23页
        2.1.5 活性检测第23-24页
    2.2 结果与分析第24-38页
        2.2.1 发酵培养基的确定第24-29页
        2.2.2 发酵条件优化第29-32页
        2.2.3 影响发酵液活性关键因素的筛选第32-34页
        2.2.4 最陡爬坡实验结果第34-35页
        2.2.5 响应面试验设计结果第35-37页
        2.2.6 验证实验第37页
        2.2.7 发酵液蛋白酶活性检测结果第37-38页
    2.3 结论与分析第38-40页
第3章 抑制表皮葡萄球菌生物膜形成活性蛋白的分离纯化第40-62页
    3.1 材料第40-41页
        3.1.1 菌株来源第40页
        3.1.2 主要仪器第40-41页
        3.1.3 培养基及试剂第41页
    3.2 方法第41-43页
        3.2.1 放线菌TRM41337菌株的活化及发酵液的制备第41页
        3.2.2 放线菌TRM41337发酵液蛋白的获取第41页
        3.2.3 放线菌TRM41337发酵液蛋白的分离纯化第41页
        3.2.4 Sephadex-G100凝胶预处理第41-43页
        3.2.5 蛋白的含量的测定第43页
        3.2.6 SDS-PAGE检测第43页
        3.2.7 Sephadex-G75凝胶处理及纯化第43页
    3.3 发酵液粗蛋白及纯化后蛋白对生物膜形成的影响第43页
    3.4 放线菌TRM41337发酵液蛋白的鉴定第43-44页
        3.4.1 放线菌TRM41337发酵液蛋白相对分子质量的测定第43-44页
        3.4.2 放线菌TRM41337发酵液蛋白序列鉴定第44页
        3.4.3 放线菌TRM41337发酵液蛋白的氨基酸组成分析第44页
        3.4.4 放线菌TRM41337发酵液蛋白数据统计与分析第44页
    3.5 纯化后蛋白经不同理化因素处理后对生物膜形成能力的影响第44-46页
        3.5.1 不同pH值第44页
        3.5.2 不同温度第44-45页
        3.5.3 纯化后蛋白经不同有机试剂处理后对生物膜形成能力的检测第45页
        3.5.4 纯化后蛋白经不同化学物质处理后对生物膜形成能力的检测第45页
        3.5.5 纯化后蛋白经不同金属离子处理后对生物膜形成能力的检测第45-46页
    3.6 结果与分析第46-60页
        3.6.1 蛋白含量及SDS-PAGE检测第46-47页
        3.6.2 蛋白质LC-MS测定结果与N端测序第47-50页
        3.6.3 纯化后蛋白经不同pH值处理后对生物膜形成能力的检测第50页
        3.6.4 纯化后蛋白经不同温度处理后对生物膜形成能力的检测第50-51页
        3.6.5 纯化后蛋白经不同有机试剂处理后对生物膜形成能力的检测第51-52页
        3.6.6 纯化后蛋白经不同化学物质处理后对抑制表皮葡萄球菌生物膜形成能力的检测第52-56页
        3.6.7 不同金属离子对纯化后蛋白生物膜形成能力的影响第56-60页
    3.7 结论与分析第60-62页
        3.7.1 活性蛋白分离纯化及鉴定第60页
        3.7.2 纯化后蛋白稳定性第60-62页
第4章 活性蛋白抑制表皮葡萄球菌生物膜形成机理的初步研究第62-73页
    4.1 材料与方法第62-65页
        4.1.1 实验菌株第62页
        4.1.2 培养基及溶液第62页
        4.1.3 纯化后蛋白作用机理的初步研究第62-65页
    4.2 结果与分析第65-71页
        4.2.1 纯化后蛋白对表皮葡萄球菌生物膜形成的影响第65-66页
        4.2.2 纯化后蛋白对表皮葡萄球菌生物膜形成不同阶段的影响第66-68页
        4.2.3 纯化后蛋白对表皮葡萄球菌细胞表面疏水性的影响第68页
        4.2.4 纯化后蛋白对表皮葡萄球菌胞外蛋白的影响第68-69页
        4.2.5 纯化后蛋白对表皮葡萄球菌胞外DNA的影响第69-70页
        4.2.6 纯化后蛋白对表皮葡萄球菌胞外多糖的影响第70-71页
    4.3 结论与分析第71-73页
第5章 结论与展望第73-74页
参考文献第74-78页
致谢第78-79页
作者简介第79页

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