| 摘要 | 第4-7页 |
| abstract | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第15-37页 |
| 1.1 IL-17B及其受体IL-17RB | 第15-26页 |
| 1.1.1 IL-17细胞因子家族 | 第15-16页 |
| 1.1.2 IL-17B的分子结构 | 第16页 |
| 1.1.3 IL-17B在不同组织中的表达 | 第16-17页 |
| 1.1.4 IL-17B的生物活性 | 第17-19页 |
| 1.1.5 IL-17B在胚胎发育中的作用 | 第19页 |
| 1.1.6 IL-17B在组织再生中的作用 | 第19-21页 |
| 1.1.7 IL-17B在染色体相关疾病中的作用 | 第21页 |
| 1.1.8 IL-17B在炎症和自身免疫性疾病中的作用 | 第21-23页 |
| 1.1.9 IL-17B在肿瘤发生发展中的作用 | 第23-26页 |
| 1.2 胃癌及其胃癌干细胞(GCSCS)调控机制的研究进展 | 第26-31页 |
| 1.2.1 胃癌流行病学分析 | 第26-27页 |
| 1.2.2 胃癌的风险因素 | 第27页 |
| 1.2.3 肿瘤干细胞(CSCs) | 第27页 |
| 1.2.4 胃癌干细胞(GC-CSCs)的表面标记及其调控机制 | 第27-29页 |
| 1.2.5 影响胃癌干细胞(GC-CSCs)功能的主要信号通路 | 第29-31页 |
| 1.3 小结 | 第31-32页 |
| 1.4 科学问题的提出 | 第32页 |
| 1.5 研究目的、实验方案及意义 | 第32-37页 |
| 1.5.1 研究目的 | 第32-33页 |
| 1.5.1.1 明确IL-17B/IL-17RB信号对胃癌的调控作用及其机制 | 第32页 |
| 1.5.1.2 分析IL-17B对胃癌肿瘤微环境细胞MSC的作用及其机制 | 第32-33页 |
| 1.5.2 实验方案设计 | 第33-36页 |
| 1.5.3 意义 | 第36-37页 |
| 第二章 IL-17B/IL-17RB在胃癌组织和细胞的表达及其与肿瘤干性标志表达的关系 | 第37-74页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第38-41页 |
| 2.1.1 实验所用细胞 | 第38页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第38-40页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第40-41页 |
| 2.2 实验方法 | 第41-53页 |
| 2.2.1 胃癌组织标本的来源 | 第41页 |
| 2.2.2 胃组织标本中IL-17RB和IL-17BmRNA表达的检测 | 第41-43页 |
| 2.2.3 不同处理的胃癌细胞中RNA的提取及检测 | 第43页 |
| 2.2.4 胃癌组织和细胞中蛋白质的提取(Western Blot分析用) | 第43-44页 |
| 2.2.5 蛋白质免疫印记技术(Western Blot) | 第44-46页 |
| 2.2.6 胃癌及癌旁组织病理切片的HE染色 | 第46-47页 |
| 2.2.7 组织芯片中胃癌及癌旁组织免疫组织化学染色 | 第47页 |
| 2.2.8 胃癌和癌旁组织免疫荧光染色(IF) | 第47-48页 |
| 2.2.9 应用慢病毒介导的shRNA干扰胃癌细胞MGC-803的IL-17RB表达 | 第48-50页 |
| 2.2.10 肿瘤细胞的克隆形成实验 | 第50-51页 |
| 2.2.11 细胞迁移实验 | 第51页 |
| 2.2.12 对IL-17B及IL-25的酶联免疫吸附分析(ELISA) | 第51-52页 |
| 2.2.13 通过siRNA对AKT的干扰实验 | 第52页 |
| 2.2.14 肿瘤细胞(MGC-803)的成脂诱导实验 | 第52-53页 |
| 2.2.15 统计分析 | 第53页 |
| 2.3 研究结果 | 第53-71页 |
| 2.3.1 胃癌组织中IL-17RB的表达显著高于其癌旁组织 | 第53-55页 |
| 2.3.2 胃癌组织中IL-17RB的表达与病人生存时间、肿瘤的病理分级和癌组织浸润深度密切相关 | 第55-57页 |
| 2.3.3 胃癌组织中IL-17B与其受体IL-17RB的表达不一致 | 第57-58页 |
| 2.3.4 胃癌细胞不表达IL-17B而表达其受体IL-17RB | 第58页 |
| 2.3.5 胃癌细胞中敲减IL-17RB的表达不影响肿瘤细胞的增殖和迁移 | 第58-60页 |
| 2.3.6 人重组IL-17B(rIL-17B)促进MGC-803细胞的克隆形成和迁移能力 | 第60-63页 |
| 2.3.7 胃癌患者血清中IL-17B的含量显著高于健康人,而IL-25则无显著地变化 | 第63-64页 |
| 2.3.8 胃癌组织中IL-17RB与胃癌细胞的干细胞标记呈正相关表达 | 第64-66页 |
| 2.3.9 IL-17B/IL-17RB信号调控胃癌细胞的干细胞特性 | 第66-68页 |
| 2.3.10 IL-17B/IL-17RB信号通过AKT/GSK3β/β-catenin信号促进胃癌细胞的干细胞特性的上调 | 第68-71页 |
| 2.4 讨论 | 第71-74页 |
| 第三章 IL-17B活化后的间质干细胞(MSC)促进胃癌细胞的增殖和迁移 | 第74-95页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第74-77页 |
| 3.1.1 实验所用细胞 | 第74-75页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第75-76页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第76-77页 |
| 3.2 实验方法 | 第77-84页 |
| 3.2.1 细胞与试剂 | 第77页 |
| 3.2.2 胃癌组织标本中分离培养胃癌间质干细胞(GC-MSC) | 第77-78页 |
| 3.2.3 脐带组织中分离培养间质干细胞(hucMSC) | 第78-79页 |
| 3.2.4 细胞中蛋白质的提取(Western Blot分析用) | 第79页 |
| 3.2.5 蛋白质免疫印记技术(Western Blot) | 第79-81页 |
| 3.2.6 肿瘤细胞的克隆形成实验 | 第81页 |
| 3.2.7 细胞迁移实验 | 第81-82页 |
| 3.2.8 间质干细胞的成脂诱导实验 | 第82页 |
| 3.2.9 mRNA表达的检测 | 第82-84页 |
| 3.2.10 统计分析 | 第84页 |
| 3.3 研究结果 | 第84-92页 |
| 3.3.1 rIL-17B预处理的MSC上清促进肿瘤细胞的增殖和迁移 | 第84-86页 |
| 3.3.2 rIL-17B促进GC-MSC和hucMSC细胞的增殖和迁移 | 第86-88页 |
| 3.3.3 rIL-17B促进hucMSC及GC-MSC中干细胞相关基因表达增加 | 第88-89页 |
| 3.3.4 rIL-17B提高hucMSC及GC-MSC成脂分化能力 | 第89-90页 |
| 3.3.5 rIL-17B诱导hucMSC及GC-MSC自身旁分泌IL-17B的上调 | 第90页 |
| 3.3.6 rIL-17B促进hucMSC及GC-MSC旁分泌细胞因子的增加 | 第90-92页 |
| 3.3.7 rIL-17B促进hucMSC及GC-MSC中p-NF-κB、p-STAT3及β-catenin表达的上调 | 第92页 |
| 3.4 讨论 | 第92-95页 |
| 第四章 体内IL-17B/IL-17RB信号对胃癌发生发展的影响 | 第95-101页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第95-96页 |
| 4.1.1 实验所用细胞和动物 | 第95页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第95-96页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第96页 |
| 4.2 实验方法 | 第96-97页 |
| 4.2.1 胃癌肿瘤组织病理切片的HE染色 | 第96页 |
| 4.2.2 裸鼠体内致瘤实验 | 第96-97页 |
| 4.2.3 裸鼠腹腔转移瘤实验 | 第97页 |
| 4.2.4 统计分析 | 第97页 |
| 4.3 实验结果 | 第97-100页 |
| 4.3.1 外源性的rIL-17B促进SGC-7901的皮肤致瘤 | 第97-99页 |
| 4.3.2 外源性rIL-17B促进SGC-7901肿瘤细胞的侵袭和转移 | 第99-100页 |
| 4.4 讨论 | 第100-101页 |
| 第五章 结论与展望 | 第101-103页 |
| 5.1 结论 | 第101-102页 |
| 5.2 展望 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-115页 |
| 致谢 | 第115-117页 |
| 在学期间取得的科研成果 | 第117-119页 |
