摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略词表 | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
1 TLR及其信号通路研究进展 | 第12-16页 |
1.1 TLR概述 | 第12页 |
1.2 TLR配体 | 第12-14页 |
1.3 TLR介导的信号通路 | 第14-16页 |
2 鱼类TLR | 第16-17页 |
3 草鱼呼肠孤病毒及其草鱼抗病毒免疫学研究进展 | 第17-20页 |
3.1 草鱼呼肠孤病毒 | 第17-19页 |
3.2 草鱼抗GCRV研究现状 | 第19-20页 |
3.3 草鱼抗GCRV感染IFN系统 | 第20页 |
4 本研究问题的由来、目的和意义 | 第20-22页 |
第二章 试验材料和试验方法 | 第22-39页 |
1 试验材料 | 第22-27页 |
1.1 细胞和病毒 | 第22页 |
1.2 实验试剂 | 第22-25页 |
1.2.1 核酸提取相关试剂 | 第22页 |
1.2.2 载体构建相关试剂 | 第22-23页 |
1.2.3 细胞试验相关试剂 | 第23-24页 |
1.2.4 实时荧光定量PCR相关试剂 | 第24页 |
1.2.5 免疫印迹和免疫沉淀相关试剂 | 第24-25页 |
1.2.6 试验所需溶液配制 | 第25页 |
1.3 试验仪器设备 | 第25-27页 |
2 试验方法 | 第27-39页 |
2.1 总RNA提取 | 第27页 |
2.2 反转录 | 第27-28页 |
2.3 载体构建 | 第28-29页 |
2.4 细胞试验相关操作 | 第29-32页 |
2.4.1 细胞传代、冻存和解冻 | 第29-31页 |
2.4.2 细胞瞬时转染 | 第31-32页 |
2.4.3 GCRV和PAMP处理细胞 | 第32页 |
2.4.4 细胞取样 | 第32页 |
2.5 细胞活性检测 | 第32-33页 |
2.6 病毒滴度测定实验 | 第33页 |
2.7 双荧光素酶报告试验 | 第33-34页 |
2.8 IB及IP试验 | 第34-36页 |
2.9 激光共聚焦试验 | 第36-37页 |
2.10 qRT-PCR | 第37-38页 |
2.11 数据处理与统计学分析 | 第38-39页 |
第三章 试验结果与分析 | 第39-55页 |
1 草鱼TLR19抑制病毒的增殖并有助于细胞抗GCRV感染 | 第39-42页 |
1.1 草鱼TLR19抑制病毒的增殖 | 第39-40页 |
1.2 TLR19有助于细胞抗GCRV感染 | 第40-42页 |
2 TLR19对IRF3/7、IFN和NF-κB的影响 | 第42-46页 |
2.1 TLR19增强了IRF3、IFN和NF-κB的启动子活性 | 第42-44页 |
2.2 TLR19促进了IRF3、IFN和NF-κB途径中mRNA的表达量 | 第44-46页 |
2.3 TLR19增强了IRF3的蛋白和磷酸化水平 | 第46页 |
3 TLR19定位在内体上并识别dsRNA | 第46-50页 |
3.1 TLR19识别dsRNA | 第46-48页 |
3.2 TLR19定位在早期内体 | 第48-50页 |
4 TLR19招募TRIF传递下游信号 | 第50-52页 |
5 TLR3促进了GCRV诱导的IFN1的表达 | 第52-55页 |
第四章 讨论 | 第55-58页 |
全文总结与展望 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
作者简历 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-68页 |