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蓖麻葡萄孢Amphobotrys ricini多样性研究

摘要第8-10页
Abstract第10-12页
第一章 文献综述第13-24页
    1 蓖麻葡萄孢及其危害第13-18页
        1.1 蓖麻葡萄孢分类地位及形态描述第13页
        1.2 侵染循环与寄主范围第13-15页
        1.3 蓖麻葡萄孢的危害第15-16页
        1.4 蓖麻灰霉病的发生与流行第16页
        1.5 蓖麻灰霉病的防治第16-18页
            1.5.1 物理防治第17页
            1.5.2 化学防治第17-18页
            1.5.3 生物防治第18页
    2 分子系统学在真菌分类鉴定中的应用第18-19页
    3 分子标记技术在真菌遗传多样性中的应用第19-20页
    4 交配型基因概述第20-21页
        4.1 交配型类型第20页
        4.2 交配型基因结构第20-21页
        4.3 交配型对真菌多样性的影响第21页
    5 真菌病毒多样性研究第21-23页
        5.1 真菌病毒多样性第21-22页
        5.2 真菌病毒对真菌多样性的影响第22页
        5.3 高通量测序技术在真菌病毒研究中的应用第22-23页
    6 本课题的意义和主要内容第23-24页
        6.1 课题的意义第23页
        6.2 课题的主要内容第23-24页
第二章 Amphobotrys属菌株分类属性鉴定第24-46页
    1 材料第24-28页
        1.1 所用菌株第24-27页
        1.2 培养基第27页
        1.3 药品及试剂第27-28页
        1.4 仪器设备第28页
    2 试验方法第28-34页
        2.1 Amphobotrys属内分类鉴定第28-34页
            2.1.1 菌株活化第28-29页
            2.1.2 菌株生长速率的测定第29页
            2.1.3 菌落形态观察第29页
            2.1.4 分生孢子大小和菌核大小的测定第29页
            2.1.5 菌丝的培养与收集第29-30页
            2.1.6 基因组DNA的提取第30页
            2.1.7 PCR扩增(ITS、G3PDH、HSP60和RPB2)第30-31页
            2.1.8 回收PCR产物并纯化第31-32页
            2.1.9 纯化产物的连接转化及序列测定第32页
            2.1.10 重组质粒的检测第32-33页
            2.1.11 基因的序列分析及系统发育树的构建第33-34页
        2.2 Amphobotrys属分类地位的分子系统学鉴定第34页
            2.2.1 WHA-1菌株的全基因组测序第34页
            2.2.2 WHA-1菌株的基因组分析第34页
            2.2.3 基于全基因组构建系统发育树第34页
    3 结果与分析第34-44页
        3.1 Amphobotrys属内分类鉴定第34-40页
            3.1.1 菌丝生长速度测定第34-35页
            3.1.2 菌落形态观察第35-36页
            3.1.3 分生孢子大小和菌核大小的测定第36-37页
            3.1.4 ITS、G3PDH、HSP60和RPB2的同源比对及系统进化树构建第37-40页
        3.2 Amphobotrys属分类地位的分子系统学鉴定第40-44页
            3.2.1 DNA检测结果第40-41页
            3.2.2 基因组组装结果第41-42页
            3.2.3 基因组圈图绘制第42页
            3.2.4 系统进化树的构建第42-44页
    4 讨论第44-46页
第三章 Amphobotrys ricini群体多样性研究第46-58页
    1 材料第46-49页
        1.1 试验菌株第46页
        1.2 主要试剂第46页
        1.3 相关培养基第46-47页
        1.4 引物第47-49页
    2 试验方法第49-50页
        2.1 基于RAPD的蓖麻葡萄孢的遗传多样性分析第49-50页
            2.1.1 基因组DNA的提取和检测第49页
            2.1.2 RAPD引物的筛选第49页
            2.1.3 随机多态性扩增第49页
            2.1.4 数据处理与分析第49-50页
        2.2 蓖麻葡萄孢交配型检测及交配型基因结构分析第50页
            2.2.1 引物第50页
            2.2.2 交配型检测第50页
            2.2.3 蓖麻葡萄孢交配型基因结构分析第50页
    3 结果与分析第50-56页
        3.1 RAPD扩增图谱分析第50-52页
        3.2 A.ricini群体遗传变异分析第52-54页
        3.3 交配型检测结果第54-55页
        3.4 交配型基因结构分析第55-56页
    4 讨论第56-58页
第四章 Amphobotrys ricini中真菌病毒多样性分析第58-70页
    1 材料第58-59页
        1.1 供试菌株第58页
        1.2 培养基第58页
        1.3 药品与试剂第58-59页
    2 试验方法第59-61页
        2.1 菌丝的培养和收集第59页
        2.2 总RNA的提取与纯化第59页
        2.3 高通量测序第59-60页
        2.4 序列分析第60页
        2.5 RT-PCR第60-61页
        2.6 病毒的验证第61页
        2.7 系统发育分析第61页
    3 结果与分析第61-68页
        3.1 菌株总RNA提取及检测第61-62页
        3.2 高通量测序结果分析第62-67页
        3.3 系统进化分析第67页
        3.4 RT-PCR的验证第67-68页
    4 讨论第68-70页
第五章 全文总结与展望第70-72页
    1 总结第70-71页
    2 展望第71-72页
参考文献第72-81页
附录第81-84页
致谢第84页

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