| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 绪论 | 第10-21页 |
| ·植物启动子的结构及功能 | 第10-12页 |
| ·转录起始位点 | 第10页 |
| ·TATA 框 | 第10-11页 |
| ·一般上游启动子原件 | 第11-12页 |
| ·CAAT 框 | 第11页 |
| ·GC 框 | 第11-12页 |
| ·特有的上游启动子元件 | 第12页 |
| ·植物启动子的类型及应用 | 第12-18页 |
| ·组成型表达启动子 | 第12-13页 |
| ·组织特异性表达启动子 | 第13页 |
| ·诱导型表达启动子 | 第13-18页 |
| ·生物胁迫诱导型启动子 | 第14页 |
| ·激素诱导型启动子 | 第14页 |
| ·非生物胁迫诱导型启动子 | 第14-18页 |
| ·CMO 基因及其启动子 | 第18-19页 |
| ·CMO 基因 | 第18-19页 |
| ·CMO 启动子 | 第19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 2 pC-CMO 植物表达载体构建 | 第21-32页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·试剂 | 第21页 |
| ·菌株和质粒 | 第21页 |
| ·引物 | 第21页 |
| ·仪器设备 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-27页 |
| ·CMO 基因的获得 | 第22-24页 |
| ·pUC19-CMO 质粒提取 | 第22页 |
| ·PCR 法获得CMO 基因 | 第22-24页 |
| ·CMO 基因的酶切 | 第24页 |
| ·载体大片段的获得 | 第24-26页 |
| ·pCAMBIA-1301-pC-GUS 质粒提取 | 第24页 |
| ·pCAMBIA-1301-pC-GUS 载体的酶切 | 第24-25页 |
| ·载体大片段的末端平滑 | 第25页 |
| ·平滑产物的酶切 | 第25-26页 |
| ·pC-CMO 植物表达载体的构建 | 第26-27页 |
| ·CMO 基因与载体大片段的连接 | 第26页 |
| ·转化 | 第26页 |
| ·转化产物的PCR 检测 | 第26-27页 |
| ·测序分析 | 第27页 |
| ·结果分析 | 第27-31页 |
| ·CMO 基因的获得 | 第27-28页 |
| ·载体大片段的获得 | 第28-30页 |
| ·pC-CMO 植物表达载体的构建 | 第30-31页 |
| ·小结 | 第31-32页 |
| 3 工程菌的构建及烟草的转化 | 第32-45页 |
| ·实验材料 | 第32-33页 |
| ·植物材料 | 第32页 |
| ·菌种 | 第32页 |
| ·试剂 | 第32页 |
| ·仪器设备 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-38页 |
| ·植物表达载体转化根癌农杆菌 | 第33-34页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞的制备 | 第33页 |
| ·质粒pCAMBIA-1301-pC-CMO 的提取 | 第33页 |
| ·冻融法转化农杆菌 | 第33页 |
| ·农杆菌的检测 | 第33-34页 |
| ·根癌农杆菌介导转化烟草及抗性芽的筛选 | 第34-35页 |
| ·烟草叶片的预培养 | 第34页 |
| ·农杆菌的培养 | 第34页 |
| ·浸染 | 第34页 |
| ·抗性芽的筛选及转基因植株的生根培养 | 第34-35页 |
| ·转基因烟草的检测 | 第35-38页 |
| ·转基因烟草的PCR 检测 | 第35-36页 |
| ·转基因烟草叶片总DNA 的提取 | 第35页 |
| ·PCR 检测 | 第35-36页 |
| ·转基因烟草的半定量RT-PCR 检测 | 第36-38页 |
| ·转基因烟草叶片总RNA 的提取 | 第36页 |
| ·半定量RT-PCR 检测 | 第36-38页 |
| ·转基因烟草甜菜碱含量的测定 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-44页 |
| ·工程菌的构建及检测 | 第38-39页 |
| ·烟草转化 | 第39-40页 |
| ·转基因烟草的检测 | 第40-44页 |
| ·转基因烟草的PCR 检测 | 第40-42页 |
| ·转基因烟草的半定量RT-PCR 检测 | 第42-43页 |
| ·转基因烟草的甜菜碱含量 | 第43-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 4 盐胁迫条件下CMO 基因在转基因烟草中的表达 | 第45-50页 |
| ·实验材料 | 第45页 |
| ·植物材料 | 第45页 |
| ·试剂 | 第45页 |
| ·仪器设备 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-46页 |
| ·野生型烟草及转基因烟草的预培养 | 第45-46页 |
| ·野生型烟草及转基因烟草的盐胁迫处理 | 第46页 |
| ·盐胁迫处理后转基因烟草的检测 | 第46页 |
| ·盐处理后转基因烟草的半定量RT-PCR 检测 | 第46页 |
| ·盐处理后转基因烟草甜菜碱含量的测定 | 第46页 |
| ·实验结果 | 第46-48页 |
| ·盐胁迫后野生及转基因烟草的表型 | 第46-47页 |
| ·盐胁迫后转基因烟草的检测 | 第47-48页 |
| ·盐诱导后转基因烟草CMO 基因的表达 | 第47-48页 |
| ·盐诱导后转基因烟草总RNA 的提取 | 第47页 |
| ·半定量RT-PCR 检测 | 第47-48页 |
| ·转基因烟草的甜菜碱含量 | 第48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录A | 第57-58页 |
| 附录B | 第58-59页 |
| 附录C | 第59-60页 |
| 附录D | 第60-61页 |
| 附录E | 第61-62页 |
| 附录F | 第62-64页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
