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肠道病毒71型分子流行病学调查及miRNA抑制肠道病毒71型体外复制的研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-14页
第一章 绪论第14-27页
   ·手足口病第14-16页
     ·手足口病简介第14页
     ·手足口病流行现状第14-15页
     ·手足口病病原学第15页
     ·手足口病的鉴别诊断和检测方法第15-16页
   ·肠道病毒71型第16-21页
     ·肠道病毒71型的简介第16-18页
     ·肠道病毒71型的分子流行病学第18页
     ·病毒的感染与复制第18-20页
     ·肠道病毒71型的致病性和嗜神经性第20页
     ·肠道病毒71型的治疗第20-21页
   ·microRNA第21-24页
     ·microRNA简介第21-22页
     ·病毒microRNA与细胞microRNA第22-24页
     ·肠道病毒71型与microRNA第24页
   ·本研究的目的和立题依据第24-25页
   ·研究内容第25-27页
第二章 用病原和肠道病毒71型检测方法的建立第27-41页
   ·材料和方法第28-34页
     ·材料第28页
     ·方法第28-34页
   ·结果第34-39页
     ·RNA标准品的制备和定量第34-35页
     ·标准曲线的绘制第35页
     ·多重荧光RT-PCR方法的建立第35-36页
     ·多重荧光RT-PCR方法的特异性、灵敏度、重复性第36-39页
     ·多重荧光RT-PCR的临床检测和验证第39页
   ·讨论第39-41页
第三章 镇江市2009-2010年手足口病的流行病学调查第41-49页
   ·材料与方法第41-42页
     ·流行病学资料第41页
     ·其他资料的来源第41页
     ·卫生部发布的《手足口病预防控制指南》规定的手足口病病例诊断第41-42页
     ·统计与分析方法第42页
   ·结果第42-46页
     ·镇江市手足口病的疫情情况第42页
     ·镇江市手足口病的流行病学特点第42-45页
     ·镇江市手足口病的病原学第45-46页
     ·镇江市重症手足口病的分析第46页
   ·讨论第46-49页
第四章 江苏省肠道病毒71型分子流行病学调查第49-59页
   ·材料和方法第49-53页
     ·材料第49-50页
     ·方法第50-53页
   ·结果第53-57页
     ·样品EV71/EV-U双重荧光定量RT-PCR检测结果第53页
     ·EV71vp1基因扩增结果第53-54页
     ·EV71基因进化树分析第54-57页
   ·讨论第57-59页
第五章 肠道病毒71型感染神经细胞后microRNA的变化第59-80页
   ·材料与方法第60-67页
     ·材料第60-61页
     ·方法第61-67页
   ·结果第67-78页
     ·EV71病毒分离和鉴定第67-68页
     ·EV71病毒滴度(TCID50)检测第68页
     ·EV71病毒感染人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞第68-69页
     ·总RNA的提取第69-70页
     ·EV71病毒感染SK-N-SH细胞前后miRNA芯片杂交第70-71页
     ·EV71病毒感染SK-N-SH细胞前后miRNA芯片结果第71-78页
   ·讨论第78-80页
第六章 实时荧光定量PCR验证基因芯片结果第80-92页
   ·材料与方法第81-85页
     ·主要试剂第81-82页
     ·主要仪器第82页
     ·方法第82-85页
   ·结果第85-89页
     ·总RNA的提取第85页
     ·实时荧光定量PCR的结果第85-88页
     ·实时荧光定量PCR与芯片结果的比较第88-89页
   ·讨论第89-92页
第七章 miRNA对肠道病毒71型的调控第92-106页
   ·材料与方法第92-97页
     ·材料第93-94页
     ·方法第94-97页
   ·结果第97-103页
     ·miRNA模拟体和抑制体转染SK-N-SH细胞第97-98页
     ·SK-N-SH细胞病变效应比较第98-99页
     ·miRNA对EV71VP1蛋白表达的影响第99-100页
     ·miRNA对EV71病毒滴度(TCID50)的影响第100-101页
     ·miRNA对EV71RNA的影响第101页
     ·qRT-PCR验证转染后miRNA含量变化第101-102页
     ·利用生物学软件预测miRNA的靶基因第102-103页
   ·讨论第103-106页
第八章 主要结论及展望第106-108页
   ·主要结论第106页
   ·创新点第106-107页
   ·展望第107-108页
参考文献第108-118页
在读期间已发表的论文第118-120页
致谢第120页

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