摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-14页 |
第一章 绪论 | 第14-27页 |
·手足口病 | 第14-16页 |
·手足口病简介 | 第14页 |
·手足口病流行现状 | 第14-15页 |
·手足口病病原学 | 第15页 |
·手足口病的鉴别诊断和检测方法 | 第15-16页 |
·肠道病毒71型 | 第16-21页 |
·肠道病毒71型的简介 | 第16-18页 |
·肠道病毒71型的分子流行病学 | 第18页 |
·病毒的感染与复制 | 第18-20页 |
·肠道病毒71型的致病性和嗜神经性 | 第20页 |
·肠道病毒71型的治疗 | 第20-21页 |
·microRNA | 第21-24页 |
·microRNA简介 | 第21-22页 |
·病毒microRNA与细胞microRNA | 第22-24页 |
·肠道病毒71型与microRNA | 第24页 |
·本研究的目的和立题依据 | 第24-25页 |
·研究内容 | 第25-27页 |
第二章 用病原和肠道病毒71型检测方法的建立 | 第27-41页 |
·材料和方法 | 第28-34页 |
·材料 | 第28页 |
·方法 | 第28-34页 |
·结果 | 第34-39页 |
·RNA标准品的制备和定量 | 第34-35页 |
·标准曲线的绘制 | 第35页 |
·多重荧光RT-PCR方法的建立 | 第35-36页 |
·多重荧光RT-PCR方法的特异性、灵敏度、重复性 | 第36-39页 |
·多重荧光RT-PCR的临床检测和验证 | 第39页 |
·讨论 | 第39-41页 |
第三章 镇江市2009-2010年手足口病的流行病学调查 | 第41-49页 |
·材料与方法 | 第41-42页 |
·流行病学资料 | 第41页 |
·其他资料的来源 | 第41页 |
·卫生部发布的《手足口病预防控制指南》规定的手足口病病例诊断 | 第41-42页 |
·统计与分析方法 | 第42页 |
·结果 | 第42-46页 |
·镇江市手足口病的疫情情况 | 第42页 |
·镇江市手足口病的流行病学特点 | 第42-45页 |
·镇江市手足口病的病原学 | 第45-46页 |
·镇江市重症手足口病的分析 | 第46页 |
·讨论 | 第46-49页 |
第四章 江苏省肠道病毒71型分子流行病学调查 | 第49-59页 |
·材料和方法 | 第49-53页 |
·材料 | 第49-50页 |
·方法 | 第50-53页 |
·结果 | 第53-57页 |
·样品EV71/EV-U双重荧光定量RT-PCR检测结果 | 第53页 |
·EV71vp1基因扩增结果 | 第53-54页 |
·EV71基因进化树分析 | 第54-57页 |
·讨论 | 第57-59页 |
第五章 肠道病毒71型感染神经细胞后microRNA的变化 | 第59-80页 |
·材料与方法 | 第60-67页 |
·材料 | 第60-61页 |
·方法 | 第61-67页 |
·结果 | 第67-78页 |
·EV71病毒分离和鉴定 | 第67-68页 |
·EV71病毒滴度(TCID50)检测 | 第68页 |
·EV71病毒感染人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞 | 第68-69页 |
·总RNA的提取 | 第69-70页 |
·EV71病毒感染SK-N-SH细胞前后miRNA芯片杂交 | 第70-71页 |
·EV71病毒感染SK-N-SH细胞前后miRNA芯片结果 | 第71-78页 |
·讨论 | 第78-80页 |
第六章 实时荧光定量PCR验证基因芯片结果 | 第80-92页 |
·材料与方法 | 第81-85页 |
·主要试剂 | 第81-82页 |
·主要仪器 | 第82页 |
·方法 | 第82-85页 |
·结果 | 第85-89页 |
·总RNA的提取 | 第85页 |
·实时荧光定量PCR的结果 | 第85-88页 |
·实时荧光定量PCR与芯片结果的比较 | 第88-89页 |
·讨论 | 第89-92页 |
第七章 miRNA对肠道病毒71型的调控 | 第92-106页 |
·材料与方法 | 第92-97页 |
·材料 | 第93-94页 |
·方法 | 第94-97页 |
·结果 | 第97-103页 |
·miRNA模拟体和抑制体转染SK-N-SH细胞 | 第97-98页 |
·SK-N-SH细胞病变效应比较 | 第98-99页 |
·miRNA对EV71VP1蛋白表达的影响 | 第99-100页 |
·miRNA对EV71病毒滴度(TCID50)的影响 | 第100-101页 |
·miRNA对EV71RNA的影响 | 第101页 |
·qRT-PCR验证转染后miRNA含量变化 | 第101-102页 |
·利用生物学软件预测miRNA的靶基因 | 第102-103页 |
·讨论 | 第103-106页 |
第八章 主要结论及展望 | 第106-108页 |
·主要结论 | 第106页 |
·创新点 | 第106-107页 |
·展望 | 第107-108页 |
参考文献 | 第108-118页 |
在读期间已发表的论文 | 第118-120页 |
致谢 | 第120页 |