摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第1章 绪论 | 第15-23页 |
1.1 苏云金芽胞杆菌(Bt)毒素 | 第15-16页 |
1.1.1 Bt毒素的种类及其目标昆虫 | 第15页 |
1.1.2 Bt毒素的杀虫机理 | 第15页 |
1.1.3 Bt毒素受体种类及作用 | 第15-16页 |
1.2 昆虫对Bt毒素抗性研究进展 | 第16-18页 |
1.2.1 昆虫对Bt毒素抗性形成 | 第16页 |
1.2.2 昆虫对Bt毒素抗性分子机制研究 | 第16-17页 |
1.2.3 昆虫对Bt毒素抗性遗传特性研究 | 第17-18页 |
1.2.4 家蚕对Bt毒素抗性研究进展 | 第18页 |
1.3 STS分子标记技术及遗传图谱构建 | 第18页 |
1.4 基因组定点编辑技术 | 第18-19页 |
1.4.1 CRISPR/Cas9系统介导的基因组定点编辑技术 | 第19页 |
1.4.2 CRISPR/Cas9系统介导的家蚕基因组编辑 | 第19页 |
1.5 基因定位克隆技术 | 第19-21页 |
1.5.1 植物基因定位克隆 | 第20页 |
1.5.2 动物基因定位克隆 | 第20页 |
1.5.3 家蚕相关基因的定位克隆 | 第20-21页 |
1.6 主要研究内容及意义 | 第21-23页 |
第2章 家蚕对苏云金芽孢杆菌毒素Cry1Ac的抗性水平调查 | 第23-26页 |
2.1 材料与方法 | 第23-24页 |
2.1.1 试剂配制方法 | 第23页 |
2.1.2 供试药剂及试虫抗性的生物测定方法 | 第23-24页 |
2.2 结果与分析 | 第24页 |
2.3 讨论 | 第24-25页 |
2.4 本章小结 | 第25-26页 |
第3章 家蚕对苏云金芽孢杆菌毒素Cry1Ac的抗性遗传分析 | 第26-30页 |
3.1 材料与方法 | 第26页 |
3.1.1 用于抗性遗传分析的群体组配 | 第26页 |
3.1.2 数据统计与分析方法 | 第26页 |
3.2 结果与分析 | 第26-28页 |
3.2.1 抗性品种与敏感品种的杂交F1代群体 | 第26-27页 |
3.2.2 F1代与亲本回交群体 | 第27-28页 |
3.2.3 F1代自交群体 | 第28页 |
3.3 讨论 | 第28-29页 |
3.4 本章小结 | 第29-30页 |
第4章 家蚕对苏云金芽孢杆菌毒素Cry1Ac的抗性基因的定位分析 | 第30-37页 |
4.1 材料与方法 | 第30-33页 |
4.1.1 分子标记连锁分析材料 | 第30-31页 |
4.1.2 主要药品、试剂和仪器设备 | 第31-32页 |
4.1.3 实验方法 | 第32-33页 |
4.2 结果与分析 | 第33-36页 |
4.2.1 回交后代的表现型 | 第33页 |
4.2.2 与抗性基因连锁的STS标记及BC1F群体的基因型 | 第33-34页 |
4.2.3 BC1M群体的基因型分析及Cry1Ac抗性基因的分子遗传连锁图 | 第34-36页 |
4.3 讨论 | 第36页 |
4.4 本章小结 | 第36-37页 |
第5章 家蚕对苏云金芽孢杆菌毒素Cry1Ac的抗性基因预测及克隆测序 | 第37-46页 |
5.1 材料与方法 | 第37-41页 |
5.1.1 候选基因筛选 | 第37页 |
5.1.2 家蚕中肠及中肠总RNA的提取 | 第37-38页 |
5.1.3 主要药品及仪器 | 第38页 |
5.1.4 溶液配置方法 | 第38-39页 |
5.1.5 感受态细胞的制备 | 第39页 |
5.1.6 反转录反应 | 第39页 |
5.1.7 PCR扩增及产物的电泳检测和回收 | 第39-40页 |
5.1.8 PCR产物的连接、转化及克隆测序 | 第40-41页 |
5.1.9 测序结果比对分析 | 第41页 |
5.2 结果与分析 | 第41-44页 |
5.2.1 定位区域内候选基因筛选及目的基因预测 | 第41-42页 |
5.2.2 ACR1与Nistari序列比对分析 | 第42页 |
5.2.3 多个抗性品种与敏感品种序列比对分析 | 第42-44页 |
5.3 讨论 | 第44-45页 |
5.4 本章小结 | 第45-46页 |
第6章 家蚕对苏云金芽孢杆菌毒素Cry1Ac的抗性基因的功能验证 | 第46-51页 |
6.1 材料与方法 | 第46-47页 |
6.1.1 蚕卵准备 | 第46页 |
6.1.2 主要药品、仪器及溶液配制方法 | 第46页 |
6.1.3 实验操作方法 | 第46-47页 |
6.2 结果与分析 | 第47-49页 |
6.2.1 基因干扰后家蚕对Cry1AC毒素的反应 | 第47-48页 |
6.2.2 基因克隆测序检验基因组编辑结果 | 第48-49页 |
6.3 讨论 | 第49-50页 |
6.4 本章小结 | 第50-51页 |
结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第58-59页 |
致谢 | 第59页 |