摘要 | 第6-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一章 绪论 | 第12-15页 |
1 前言 | 第12页 |
2 抗菌肽的研究进展 | 第12页 |
3 蛇毒抗菌肽的研究进展 | 第12-13页 |
4 蛇毒抗菌肽表达系统的选择 | 第13页 |
5 本课题的研究基础与内容 | 第13-15页 |
第二章 金环蛇抗菌肽Cath-BF30 与Cath-BF34 表达载体的构建 | 第15-26页 |
1 前言 | 第15页 |
2 实验材料 | 第15-17页 |
2.1 菌种和质粒 | 第15-16页 |
2.2 主要试剂 | 第16页 |
2.3 主要仪器设备 | 第16-17页 |
3 实验方法 | 第17-20页 |
3.1 蛇毒抗菌肽Cath-BF30 与Cath-BF34 目的基因的设计与合成 | 第17页 |
3.2 蛇毒抗菌肽Cath-BF30 与Cath-BF34 克隆载体的构建 | 第17-18页 |
3.3 蛇毒抗菌肽Cath-BF30 与Cath-BF34 重组酵母菌的构建 | 第18-20页 |
4 结果 | 第20-25页 |
4.1 蛇毒抗菌肽Cath-BF30 与Cath-BF34 基因设计 | 第20页 |
4.2 蛇毒抗菌肽Cath-BF30 与Cath-BF34 基因合成与克隆鉴定 | 第20-22页 |
4.3 蛇毒抗菌肽Cath-BF30 与Cath-BF34 表达载体的构建 | 第22-23页 |
4.4 蛇毒抗菌肽Cath-BF毕赤酵母转化子筛选与鉴定 | 第23-25页 |
5 讨论 | 第25页 |
6 小结 | 第25-26页 |
第三章 金环蛇抗菌肽工程菌表达产物活性鉴定、发酵与纯化 | 第26-36页 |
1 前言 | 第26-27页 |
2 实验材料 | 第27页 |
2.1 菌种和质粒 | 第27页 |
2.2 主要试剂 | 第27页 |
2.3 主要培养基 | 第27页 |
3 实验方法 | 第27-29页 |
3.1 抗菌肽粗样品的获得 | 第27页 |
3.2 透明斑法鉴定抗菌肽粗样品活性 | 第27-28页 |
3.3 96孔板再次鉴定抗菌肽粗产品活性 | 第28页 |
3.4 pH值对目的基因表达影响观察 | 第28页 |
3.5 蛇毒抗菌肽工程菌的发酵 | 第28页 |
3.6 SP强阳离子纯化蛇毒抗菌肽 | 第28-29页 |
4 结果 | 第29-34页 |
4.1 透明斑法鉴定抗菌肽粗品活性 | 第29页 |
4.2 96 孔板鉴定抗菌肽粗品活性 | 第29-30页 |
4.3 培养基pH值对Cath-BF分泌表达产物的影响 | 第30-31页 |
4.4 SMD-Cath-BF大规模发酵 | 第31-33页 |
4.5 Cath-BF表达产物分离纯化 | 第33-34页 |
5 讨论 | 第34-35页 |
6 结论 | 第35-36页 |
第四章 结论 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-42页 |
附录 | 第42-47页 |
附录1 文献综述 | 第42-47页 |
参考文献 | 第46-47页 |
致谢 | 第47页 |