| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 文献综述 | 第7-16页 |
| 1 昆虫吐丝概况及其他吐丝生物 | 第7-10页 |
| 1.1 昆虫吐丝的作用 | 第7-8页 |
| 1.2 昆虫的丝 | 第8-10页 |
| 1.2.1 丝素蛋白 | 第9-10页 |
| 1.2.2 丝胶蛋白 | 第10页 |
| 2 RNAi研究概况 | 第10-14页 |
| 2.1 RNAi的发现 | 第10-11页 |
| 2.2 RNAi的作用机制 | 第11-12页 |
| 2.2.1 siRNA的形成 | 第11页 |
| 2.2.2 siRNA的效应阶段 | 第11页 |
| 2.2.3 siRNA的扩增 | 第11-12页 |
| 2.3 RNAi的特点 | 第12-13页 |
| 2.4 昆虫RNAi的应用方法 | 第13-14页 |
| 2.4.1 注射法 | 第13页 |
| 2.4.2 饲喂法 | 第13-14页 |
| 2.4.3 其他方法 | 第14页 |
| 3 立题依据及目的意义 | 第14-16页 |
| 第二章 亚洲玉米螟丝素轻链基因的克隆 | 第16-34页 |
| 2.1 试验材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 虫源 | 第16页 |
| 2.1.2 试验试剂 | 第16页 |
| 2.1.3 试验仪器 | 第16-17页 |
| 2.2 总RNA提取 | 第17页 |
| 2.3 eDNA第一条链的合成 | 第17-18页 |
| 2.4 亚洲玉米螟丝素轻链基因中间片段扩增 | 第18-20页 |
| 2.4.1 引物设计与合成 | 第18页 |
| 2.4.2 丝素轻链基因中间片段的扩增 | 第18页 |
| 2.4.3 目的基因片段产物的回收与纯化 | 第18-19页 |
| 2.4.4 目的基因产物的连接与转化 | 第19页 |
| 2.4.5 单菌落PCR检测 | 第19-20页 |
| 2.4.6 测序 | 第20页 |
| 2.4.7 序列分析 | 第20页 |
| 2.5 丝素轻链基因的3'Race | 第20-22页 |
| 2.5.1 反应原理与引物设计 | 第20-21页 |
| 2.5.2 3’RACE的扩增 | 第21-22页 |
| 2.6 丝素轻链基因的5’Race | 第22-26页 |
| 2.6.1 反应原理与引物设计 | 第22-23页 |
| 2.6.2 5’RACE的扩增 | 第23-26页 |
| 2.7 序列分析 | 第26-27页 |
| 2.8 结果与分析 | 第27-33页 |
| 2.8.1 丝素轻链基因中间片段扩增结果 | 第27-28页 |
| 2.8.2 3’RACE扩增结果 | 第28-29页 |
| 2.8.3 5’RACE扩增结果 | 第29-31页 |
| 2.8.4 开放阅读框扩增结果 | 第31页 |
| 2.8.5 序列分析 | 第31-33页 |
| 2.9 小结与讨论 | 第33-34页 |
| 第三章 亚洲玉米螟丝素轻链基因在不同发育阶段、不同温度及取食不同寄主后的表达分析 | 第34-42页 |
| 3.1 试验材料 | 第34-35页 |
| 3.1.1 虫源 | 第34页 |
| 3.1.2 试验试剂 | 第34页 |
| 3.1.3 试验仪器 | 第34-35页 |
| 3.2 试验方法 | 第35-36页 |
| 3.2.1 不同发育阶段处理 | 第35页 |
| 3.2.2 不同温度处理 | 第35页 |
| 3.2.3 饲喂不同寄主 | 第35页 |
| 3.2.4 不同处理样品的RNA提取 | 第35页 |
| 3.2.5 反转录 | 第35-36页 |
| 3.2.6 引物设计与合成 | 第36页 |
| 3.2.7 Real-Time PCR检测 | 第36页 |
| 3.2.8 数据分析 | 第36页 |
| 3.3 结果与分析 | 第36-41页 |
| 3.3.1 引物与内参基因的可靠性 | 第36-38页 |
| 3.3.2 亚洲玉米螟丝素轻链基因在不同发育阶段的相对表达量 | 第38-39页 |
| 3.3.3 不同温度条件下亚洲玉米螟丝素轻链基因的相对表达量 | 第39-40页 |
| 3.3.4 取食不同寄主后亚洲玉米螟丝素轻链基因的相对表达量 | 第40-41页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第41-42页 |
| 第四章 亚洲玉米螟丝素轻链基因的RNA干扰 | 第42-50页 |
| 4.1 试验材料 | 第42-43页 |
| 4.1.1 试验虫源 | 第42页 |
| 4.1.2 试验材料 | 第42-43页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第43页 |
| 4.2 试验方法 | 第43-45页 |
| 4.2.1 dsRNA表达载体的构建 | 第43-45页 |
| 4.2.2 喂食dsRNA的试验方法 | 第45页 |
| 4.2.3 目标基因表达量分析 | 第45页 |
| 4.2.4 RNA干扰后对亚洲玉米螟种群部分参数的影响 | 第45页 |
| 4.3 数据分析：参照3.2.8 | 第45页 |
| 4.4 结果与分析 | 第45-48页 |
| 4.4.1 dsRNA表达载体的构建与验证 | 第45-47页 |
| 4.4.2 目标基因表达量分析 | 第47-48页 |
| 4.4.3 RNA干扰后亚洲玉米螟种群部分参数 | 第48页 |
| 4.5 小结与讨论 | 第48-50页 |
| 全文总结 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
