| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 目录 | 第9-13页 |
| 符号说明 | 第13-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-21页 |
| 1.1 肿瘤的转移 | 第15-18页 |
| 1.1.1 肿瘤转移概述 | 第15页 |
| 1.1.2 上皮间质转化（EMT）与肿瘤转移 | 第15-16页 |
| 1.1.3 WNT/β-catenin 信号通路与 EMT 及肿瘤转移 | 第16-17页 |
| 1.1.4 肿瘤转移的治疗 | 第17-18页 |
| 1.2 肿瘤转移抑制基因 NDRG1 | 第18-19页 |
| 1.2.1 NDRG1 基因概述 | 第18页 |
| 1.2.2 NDRG1 基因参与肿瘤转移相关的信号通路调节 | 第18-19页 |
| 1.2.3 NDRG1 基因抑制肿瘤的应用 | 第19页 |
| 1.3 本课题的研究来源与重点 | 第19-21页 |
| 第二章 NDRG1 对β-catenin 磷酸化的调节 | 第21-38页 |
| 2.1 前言 | 第21-22页 |
| 2.2 材料与方法 | 第22-29页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第22页 |
| 2.2.2 细胞全蛋白抽提 | 第22-24页 |
| 2.2.3 蛋白免疫印迹（Western Blot） | 第24-27页 |
| 2.2.4 实时荧光定量 PCR | 第27-28页 |
| 2.2.5 统计学分析 | 第28-29页 |
| 2.3 结果 | 第29-37页 |
| 2.3.1 NDRG1 抑制β-catenin 氨基端残基 Ser33/37 及 Thr41 的磷酸化 | 第29-33页 |
| 2.3.2 NDRG1 调节β-catenin 氨基端残基 Ser45 的磷酸化 | 第33-35页 |
| 2.3.3 NDRG1 对β-catenin 的基因转录表达没有影响 | 第35-37页 |
| 2.4 小结 | 第37-38页 |
| 第三章 NDRG1 抑制β-catenin 磷酸化的机制 | 第38-55页 |
| 3.1 前言 | 第38-40页 |
| 3.2 材料与方法 | 第40-43页 |
| 3.2.1 免疫荧光 | 第40-41页 |
| 3.2.2 免疫共沉淀 | 第41页 |
| 3.2.3 siRNA 基因沉默 | 第41-42页 |
| 3.2.4 其他 | 第42-43页 |
| 3.3 结果 | 第43-54页 |
| 3.3.1 NDRG1 可以上调 GSKβ结合蛋白 FRAT1 的表达 | 第43-46页 |
| 3.3.2 NDRG1 可以抑制 GSK3β与 Axin1 的结合 | 第46-48页 |
| 3.3.3 沉默 FRAT1 可以显著增加β-catenin 的磷酸化，降低总β-catenin 的水平 | 第48-51页 |
| 3.3.4 NDRG1 对 GSK3β磷酸化及磷酸酶 PP1、PP2A 的影响 | 第51-54页 |
| 3.4 小结 | 第54-55页 |
| 第四章 NDRG1 对β-catenin 在细胞中分布的影响 | 第55-66页 |
| 4.1 前言 | 第55-56页 |
| 4.2 材料与方法 | 第56-59页 |
| 4.2.1 细胞组分蛋白的抽提 | 第56-58页 |
| 4.2.2 其他 | 第58-59页 |
| 4.3 结果 | 第59-65页 |
| 4.3.1 组分蛋白研究结果 | 第59-63页 |
| 4.3.2 免疫荧光研究结果 | 第63-65页 |
| 4.4 小结 | 第65-66页 |
| 第五章 NDRG1 对 WNT/β-catenin 信号通路的调控 | 第66-79页 |
| 5.1 前言 | 第66-67页 |
| 5.2 材料与方法 | 第67-70页 |
| 5.2.1 WNT 蛋白的使用 | 第67页 |
| 5.2.2 TOP/FOP-flash 荧光报告试验 | 第67-69页 |
| 5.2.3 其他 | 第69-70页 |
| 5.3 结果 | 第70-78页 |
| 5.3.1 NDRG1 可抑制 WNT 诱导的β-catenin 及 cyclin D1 的表达 | 第70-73页 |
| 5.3.2 NDRG1 可抑制 WNT 诱导的β-catenin 核内表达聚集 | 第73-75页 |
| 5.3.3 NDRG1 可抑制 WNT 诱导 TCF/LEF 转录因子的活性 | 第75-78页 |
| 5.4 小结 | 第78-79页 |
| 第六章 NDRG1 调控β-catenin 在细胞中分布的机制 | 第79-93页 |
| 6.1 前言 | 第79-81页 |
| 6.2 材料与方法 | 第81-82页 |
| 6.3 结果 | 第82-92页 |
| 6.3.1 NDRG1 对 PAK4 的表达水平没有明显影响 | 第82页 |
| 6.3.2 NDRG1 抑制 PAK4 在细胞核内的聚积，促进β-catenin 在细胞膜上表达 | 第82-84页 |
| 6.3.3 沉默 PAK4 可以降低细胞核内β-catenin，降低 cyclin D1 表达水平 | 第84-88页 |
| 6.3.4 沉默 PAK4 可以降低抑制β-catenin 介导的 TCF/LEF 转录因子的活性 | 第88-92页 |
| 6.4 小结 | 第92-93页 |
| 第七章 NDRG1 对肿瘤细胞黏附的影响 | 第93-103页 |
| 7.1 前言 | 第93-94页 |
| 7.2 材料与方法 | 第94-97页 |
| 7.2.1 细胞与细胞间黏附试验 | 第94页 |
| 7.2.2 细胞与培养基质分离试验 | 第94-95页 |
| 7.2.3 细胞与基质黏附试验 | 第95-96页 |
| 7.2.4 其他 | 第96-97页 |
| 7.3 结果 | 第97-102页 |
| 7.3.1 NDRG1 促进肿瘤细胞与细胞间黏附 | 第97-98页 |
| 7.3.2 NDRG1 抑制肿瘤细胞从培养基质上脱离 | 第98-99页 |
| 7.3.3 NDRG1 抑制肿瘤细胞与基质黏附 | 第99-102页 |
| 7.4 小结 | 第102-103页 |
| 第八章 讨论 | 第103-113页 |
| 8.1 WNT/β-catenin 信号的调节与肿瘤 | 第103-105页 |
| 8.2 NDRG1 对 WNT/β-catenin 信号的调节 | 第105-110页 |
| 8.2.1 NDRG1 对β-catenin 表达水平的调控 | 第105-108页 |
| 8.2.2 NDRG1 对β-catenin 在细胞中位置分布的调控 | 第108-110页 |
| 8.3 其他肿瘤转移抑制基因对 WNT/β-catenin 信号的调节 | 第110-111页 |
| 8.4 NDRG1 对细胞黏附的调节 | 第111-112页 |
| 8.5 本课题研究总结 | 第112-113页 |
| 第九章 结论 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-123页 |
| 致谢 | 第123-125页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第125页 |
